Smac多肽对食管鳞状细胞癌耐药性调节机制的研究

目的探究Smac多肽(Smac-N7)对食管癌鳞状细胞系Eca-109和紫杉醇(PTX)耐药株(Eca-109/PTX)耐药性的影响和作用机制。方法采用小剂量间歇诱导法建立Eca-109/PTX细胞株,CCK-8法检测PTX对Eca-109和Eca-109/PTX的半数抑制浓度(IC_(50))。使用PTX和Smac-N7分别或联合处理Eca-109或Eca-109/PTX细胞,并将细胞分为:Eca-109组、Eca-109+PTX组、Eca-109+Smac-N7组、Eca-109+PTX+Smac-N7组;Eca-109/PTX组、Eca-109/PTX+PTX组、Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组。采用流式细胞术、试剂盒和Western blot法分别检测各组Eca-109和Eca-109/PTX细胞的凋亡率和细胞中caspase-3活性与Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,随浓度的增加,PTX对Eca-109与Eca-109/PTX的生长抑制率均明显增加(P<0.05),且PTX对Eca-109的IC_(50)[(0.08±0.01)μg/mL]显著低于其对Eca-109/PTX的IC_(50)[(2.47±0.11μg/mL)](P<0.01)。与Eca-109组或Eca-109/PTX组相比,Eca-109+PTX组、Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与Eca-109+PTX组或Eca-109/PTX+PTX组相比,Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论Smac-N7可在体外通过促进细胞凋亡来改善Eca-109细胞及其耐药株对PTX的敏感度。

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织中Smac/DIABLO的表达及其意义

目的探究非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织中Smac/DIABLO的表达及其意义。方法将大鼠随机分为对照组、高脂组,对照组采用基础饲料喂养,高脂组采用高脂肪饲料喂养。分别于喂养第4、8、12周观察大鼠体质量和肝脏指数变化,检测血脂指标TG、TC和肝功能指标ALT、AST;HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化,流式细胞术检测肝细胞凋亡,免疫组化检测Smac/DIABLO、Caspase-3蛋白表达,Western blotting检测Smac/DIABLO、X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked apoptosis inhibitory protein,XIAP)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,qRT-PCR检测Smac/DIABLO、XIAP、Caspase-3、Caspase-9基因的表达。结果与对照组相比,高脂组大鼠在第4、8、12周肝细胞排列紊乱,有明显的脂肪液泡、炎症细胞浸润、脂质堆积严重,体质量、肝脏指数、TC、TG、ALT、AST、NAS评分、凋亡率显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示,相比于对照组,高脂组大鼠肝组织Smac/DIABLO、Caspase-3表达升高,IOD值显著升高(P<0.05);Western blotting和qRT-PCR结果显示,相比于对照组,高脂组大鼠肝组织Smac/DIABLO、Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达显著升高,XIAP表达显著降低(P<0.05)。结论NAFLD大鼠肝组织Smac/DIABLO蛋白表达显著升高,与其肝细胞凋亡密切相关。

基于caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响

目的基于caspase-3/Bcl2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响。方法建立肺腺癌紫杉醇耐药细胞株A549/Taxol,将细胞分为pcDNANC组(转染pcDNA-NC空白载体)、pcDNA-SMAC组(转染pcDNA-SMAC载体)、siRNA-NC组(转染siRNANC空病毒载体)和siRNA-SMAC组(转染siRNA-SMAC慢病毒载体)。qRT-PCR法检测细胞中SMAC mRNA表达;MTT法检测细胞敏感度;克隆实验法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力;Western blot法检测细胞中caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果肺腺癌A549细胞较BEAS-2B正常细胞中SMAC mRNA表达明显降低(P<0.05)。pcDNA-SMAC组较pcDNA-NC组细胞中SMAC mRNA表达显著升高(P<0.05)。和siRNA-NC组相比,siRNA-SMAC组细胞中SMAC mRNA表达显著降低(P<0.05)。和pcDNA-NC组相比,pcDNA-SMAC组细胞IC_(50)、细胞克隆数、细胞侵袭能力及Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值均显著降低,细胞耐药指数逆转倍数为2.51倍,细胞凋亡能力及caspase-3和Bax蛋白表达明显高于pcDNA-NC组(P<0.05)。和siRNA-NC组相比,siRNA-SMAC组细胞IC_(50)、细胞克隆数、细胞侵袭能力及Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值均显著升高,细胞凋亡能力及caspase-3和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论高表达SMAC可增加肺腺癌细胞的紫杉醇敏感度、抑制细胞增长和侵袭、促进细胞凋亡,且对caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路有一定调控作用。

活血解毒润燥方干预干燥综合征小鼠颌下腺细胞凋亡促进因子Smac表达的机制研究

目的:将干燥综合征(SS)模型小鼠颌下腺细胞凋亡促进因子Smac的表达作为靶点,探究活血解毒润燥方对SS模型小鼠颌下腺组织形态、腺体功能、细胞凋亡的影响及其干预机制。方法:实验选取雌性BALB/c57小鼠为正常对照组,自发性雌性非肥胖型糖尿病(NOD/Ltj)小鼠为SS模型并随机分为模型组、白芍总苷胶囊组和活血解毒润燥方低、中、高剂量组,每组各15只。各组小鼠给药量按照人与动物体表面积比计算等效剂量,正常对照组、模型组小鼠灌胃10 ml/kg蒸馏水,白芍总苷胶囊组(0.234 g/kg)和活血解毒润燥方低剂量组(15.6 g/kg)、中剂量组(31.2 g/kg)、高剂量组(62.4 g/kg)分别灌胃给药,每日1次。药物干预8周后,无菌分离颌下腺,观察各组小鼠颌下腺形态、功能的改变,并分别应用免疫组化法(IHC)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定细胞凋亡促进因子Smac的表达。结果:与正常对照组比较,模型组唾液流量及颌下腺指数均显著降低(P<0.01),颌下腺组织病理学评分显著升高(P<0.01),IHC和Western blot检测Smac表达明显升高(P<0.05),RT-PCR检测Smac表达显著升高(P<0.01)。治疗结束后,与模型组比较,活血解毒润燥方各剂量组和白芍总苷胶囊组唾液流量及颌下腺指数均显著升高(P<0.01),颌下腺组织病理学评分显著降低(P<0.01)。运用IHC和Western blot检测活血解毒润燥方高剂量组和白芍总苷胶囊组Smac表达明显降低(P<0.05),运用RT-PCR检测活血解毒润燥方高剂量组与白芍总苷胶囊组Smac表达显著降低(P<0.01)。结论:活血解毒润燥方可以改善SS模型鼠颌下腺腺泡的分泌功能,提高其颌下腺指数,增加SS模型鼠的唾液分泌量;其作用机制与下调SS模型鼠颌下腺细胞凋亡、促进因子Smac的表达水平有关。

结直肠癌组织中smac的表达及意义

采用免疫组化技术检测54例结直肠癌组织和15例癌旁正常组织中的smac蛋白;用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测29例结直肠癌组织和15例癌旁组织中的smac mRNA。结果显示,smac蛋白及其mRNA在癌组织中的表达显著低于癌旁组织,且与结直肠癌的临床分期和分化程度有关。认为smac蛋白及其mRNA表达的降低可能与结直肠癌的发生有关。

非小细胞肺癌组织Livin和Smac蛋白表达及其临床意义的研究

目的:探讨Livin和Smac蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其对NSCLC患者预后的影响。方法:用免疫组织化学技术检测Livin和Smac蛋白在89例NSCLC组织和25例癌旁肺组织中的表达。结果:NSCLC组织中Livin和Smac蛋白阳性表达率分别为53.9%(48/89)和58.4%(52/89),高于癌旁肺组织中的8.0%(2/25)和12.0%(3/25),差异有统计学意义,χ2值分别为16.723和16.848,P值均为0.000。Livin和Smac蛋白表达密切相关,χ2=18.451,P=0.000,r=0.455。Livin蛋白表达水平与淋巴结转移、TNM分期及病理类型密切相关,χ2值分别为19.433、17.161和7.772,P值分别为0.000、0.000和0.021;与性别、年龄、分化等无关,P均>0.05。Smac蛋白表达水平与淋巴结转移、TNM分期密切相关,χ2值分别为7.748和7.064,P值分别为0.005和0.008;与性别、年龄和病理类型等无关,P均>0.05。Kaplan-Meier法分析显示,Livin蛋白表达阳性组的预后较阴性组差,χ2=7.407,P=0.006;而Smac蛋白表达与预后无关,χ2=0.945,P=0.331。结论:Livin蛋白表达与NSCLC的发生、发展密切相关,并对患者的预后产生不良影响。Smac蛋白表达与NSCLC的发生、发展相关,但与预后无关。Livin有可能成为评估NSCLC进展和预后的有价值指标。

Smac基因过表达对胃癌细胞株MKN-45化疗敏感性的影响

背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一。Smac(secondmitochondria-derivedactivatorofcaspases,Smac或称DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用。本研究旨在观察Smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响。方法:采用脂质体GeneSHUTTLE-40介导的方法,将Smac基因转入胃癌细胞MKN-45,RT-PCR和Westernblot法检测癌细胞中Smac的表达;选用顺铂(1、5、10μg/ml)、丝裂霉素(0.1、1、10μg/ml)和姜黄素(10、20、40μmol/L)分别处理转染前后的胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,倒置显微镜下观察细胞形态变化并摄影,AnnexinV-FITC和碘化丙啶双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:同未转染对照组比较,转染外源性Smac基因后MKN-45细胞SmacmRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.01);各浓度顺铂、丝裂霉素和姜黄素处理24h后,细胞生长抑制率分别增加10.10%～23.80%(P<0.01)、10.01%～15.86%(P<0.01)、11.28%～22.12%(P<0.01),细胞明显变圆、折光增强、漂浮细胞增多,细胞凋亡率分别增加6.7%～20.2%(P<0.01)、5.4%～13.2%(P<0.01)、10.6%～20.1%(P<0.01)。结论:转染外源性Smac基因并使其在胃癌细胞中过表达。

Smac在Ⅰ～Ⅱ期非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:Smac是新近发现的一种由线粒体释放的促凋亡蛋白,主要作用于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisproteins),促进凋亡的发生;Smac在体外实验中显示出抗肿瘤作用,但在肺癌中其作用尚不明确。本研究通过检测Smac蛋白在Ⅰ～Ⅱ期非小细胞肺癌的表达,探讨其与临床病理因素及预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组化方法,对213例Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌肿瘤组织中Smac蛋白的表达情况进行检测。结果:Ⅰ、Ⅱ期NSCLC的5年生存率分别为61.9%和30.0%。Smac蛋白主要定位于细胞浆,以75%的阳性细胞数为分界点时,低表达组占60.6%,高表达组占39.4%。Smac的表达与性别、年龄、血型、病理类型及生存无相关性(P>0.05),但Smac蛋白在无淋巴结转移和有淋巴结转移的表达分别为37.0%和58.3%,二者比较有统计学意义(P<0.05)。结论:Smac蛋白与Ⅰ～Ⅱ期非小细胞肺癌的淋巴结转移有关。

Smac/DIABLO在过氧化氢所致C_2C_(12)肌原细胞凋亡中的作用

为探讨Smac/DIABLO在过氧化氢 (H2 O2 )所致C2 C12 肌原细胞凋亡中的作用 ,采用Hoechst 3 3 2 58染色 ,观察H2 O2 (0 5mmol/L)处理C2 C12 肌原细胞不同时间后 ,细胞核形态学改变并计算凋亡核百分率 ,DNA抽提及琼脂糖电泳观察凋亡特征性梯状带 ,利用细胞成分分离后蛋白质印迹分析H2 O2 是否导致Smac/DIABLO从线粒体释放 ,采用Caspase检测试剂盒及蛋白质印迹分析Caspase 3和Caspase 9的活化 ,转染Smac/DIABLO基因 ,观察Smac/DIABLO过表达对H2 O2 所致的C2 C12 肌原细胞凋亡的影响 .结果表明 :H2 O2 处理 1h后 ,Smac/DIABLO从C2 C12 肌原细胞线粒体释放入胞浆 ,2h更明显 ;H2 O2 处理 4h后 ,Caspase 3和Caspase 9活化 ,12h达高峰 ;H2 O2 处理 2 4h后 ,C2 C12 肌原细胞显示特征性的凋亡形态改变 ,凋亡核百分率明显升高 ,DNA电泳出现明显“梯状”条带 .与单纯过氧化氢损伤组相比 ,Smac/DIABLO高表达的C2 C12 肌原细胞经过氧化氢损伤组的Caspase 3和Caspase 9的活化、凋亡核百分率的升高、“梯状”条带的出现均更明显 .结果表明 ,H2 O2 可导致Smac/DIABLO从C2 C12 肌原细胞线粒体释放 ,促进Caspase 9和Caspase

Smac表达水平对预测直肠癌术前放疗敏感性的临床意义

背景与目的:直肠癌患者术前放疗效果个体差异大,寻找与放疗敏感性相关的生物学标志物,对于直肠癌的个体化治疗有着重要的临床意义。本研究旨在探讨Smac蛋白表达与直肠癌术前放疗病理反应程度的关系,评价Smac蛋白表达水平预测直肠癌术前放疗敏感性的价值。方法:收集我院2002年1月至2006年12月期间接受术前放疗的42例直肠癌病例资料,评价其放疗后病理反应程度,免疫组织化学方法检测手术治疗前活检标本和手术后切除标本中Smac蛋白的表达水平,分析活检组织中Smac蛋白表达水平与病理反应程度的关系,以及放疗前后蛋白表达水平的变化。结果:直肠癌术前放疗后病理反应良好,有效率达73.8%,联合放化疗者优于单纯放疗者(P<0.05);而直肠癌组织中Smac蛋白的表达水平与单纯术前放疗效果密切相关,Smac蛋白高表达者术前放疗有效率(83.3%)明显优于低表达者(25.0%),并且肿瘤组织放疗后Smac蛋白表达水平有明显下降。结论:直肠癌组织中Smac蛋白表达水平可作为术前放疗敏感性的预测因子。

稳定过表达smac基因胃癌细胞株的建立及其化疗敏感性研究

目的探讨smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响。方法采用脂质体将smac基因真核表达载体pcDNA3.1smac及空白载体pcDNA3.1转染入胃癌细胞株MKN45,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株,RTPCR和WesternBlot检测癌细胞smac基因表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、克隆形成实验检测丝裂霉素(MMC)对癌细胞的生长抑制效率。结果建立分别稳定表达smac基因、新霉素抗性基因(neo)的胃癌亚克隆细胞株MKN45/smac、MKN45/neo。RTPCR和WesternBlot证实MKN45/smac细胞的smacmRNA及蛋白表达水平均显著高于MKN45、MKN45/neo(P<0.01)。10μg/mlMMC作用24h后,MKN45、MKN45/neo细胞生长抑制率分别为27.85%、28.12%,而MKN45/smac则高达43.71%(P<0.01);同MKN45、MKN45/neo细胞株比较,MKN45/smac的克隆形成能力分别降低了14.07%(P<0.01)、15.13%(P<0.01)。结论稳定转染smac基因使其在胃癌细胞株中过表达,能显著提高癌细胞对MMC的敏感性,为改善胃癌化疗效果奠定了实验基础。

杏仁核注射红藻氨酸诱导大鼠边缘叶癫痫发作时海马中Smac和XIAP蛋白的表达

应用红藻氨酸(kainic acid,KA)诱导的大鼠边缘叶癫痫发作模型,检测第二个线粒体源的半胱天冬蛋白酶激活物/直接与凋亡抑制蛋白结合的低等电点蛋白(second mitochondrial activator of caspases/direct inhibitor of apoptosis protein-binding protein oflow isoelectric point[PI],Smac/DIABLO)和X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)在癫痫大鼠海马神经元表达。单侧杏仁核内注射KA诱导癫痫发作,1 h后用安定终止发作,然后分别用TUNEL染色和cresvl violet染色观察海马神经元存活和凋亡的变化,用免疫荧光和Western blot检测海马Smac/DIABLO、XIAP和半胱天冬蛋白酶-9(caspase-9)的表达。结果表明,发作终止2 h时KA注射同侧海马CA3区细胞浆内Smac/DIABLO蛋白表达增加,4h时caspase-9出现裂解片断,8 h时出现TUNEL阳性细胞,24 h时达高峰。脑室内注射caspase-9抑制剂z-LEHD-fluoromethylketone(z-LEHD-fmk)可减少TUNEL阳性细胞,增加存活神经元。发作后KA注射同侧海马CA3区神经元caspase-9免疫反应性增强,Smac/DIABLO和XIAP弥散于整个神经元内。对侧海马未检测到TUNEL阳性细胞及Smac/DIABLO和XIAP蛋白的上述变化。以上结果提示,癫痫发作可诱导Smac/DIABLO蛋白从?

Smac、Bcl-2和Ki-67在胰腺癌组织中的表达及预后价值

目的:探讨胰腺癌组织中Smac、Bcl-2和Ki-67蛋白的表达及其与患者临床病理特征和生存期的关系。方法:收集胰腺癌病例30例,随访生存期;所有标本行免疫组织化学检测Smac、Bcl-2和Ki-67的表达;标准评定采用半定量法。结果:30例(100%)胰腺癌组织中均有Smac阳性表达,Bcl-2和Ki-67的阳性表达率分别为63.3%和96.7%;Smac表达与胰腺癌组织分化程度呈正相关(P<0.05),Ki-67表达与之呈负相关(P<0.05),而Bcl-2表达与之无相关性(P>0.05);Smac、Bcl-2和Ki-67的表达强度与临床分期均无关。Smac表达与肿瘤是否发生血管浸润和淋巴结转移无关(P>0.05),而Bcl-2和Ki-67表达差异均有统计学意义(P均<0.05)。Smac表达≤25%与表达>26%2组比较,术后生存率的差异无统计学意义(P=0.08)。Bcl-2表达≤25%与Bcl-2表达>26%2组比较,术后生存率差异有统计学意义(P=0.02),Bcl-2表达≤25%者的生存期明显长于Bcl-2表达>26%者。而Ki-67表达≤25%与表达>26%2组比较,生存率无统计学差异(P=0.63)。多因素分析结果提示,Bcl-2表达、有无淋巴结转移或血管浸润为独立预后因子。结论:Smac蛋白在胰腺癌组织中高表达,胰腺癌组织中Bcl-2蛋白表达水平可作为评价生存期预后的有价值指标。

子痫前期患者胎盘组织及外周血中 Smac、Survivin和 PTEN 的表达及其相关性

目的:探讨Smac、Survivin和PTEN在子痫前期患者胎盘组织和外周血中的表达及其相关性。方法:采用RT-PCR、免疫组化SP法测定90例胎盘组织(其中正常孕妇组、轻度和重度子痫前期组各30例)中Smac、Survivin和PTEN mRNA和蛋白的表达,ELISA法测定外周血中Smac、Survivin和PTEN蛋白的水平。结果:①Smac、Survivin主要定位于绒毛细胞滋养细胞胞浆中,PTEN主要定位于绒毛滋养细胞胞核中。②轻、重度子痫前期组胎盘及外周血中Smac mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,且重度组高于轻度组,差异均有统计学意义(F=19.874和112.774,P<0.001)。③轻、重度组子痫前期组胎盘及外周血中Survivin、PTEN mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且重度组低于轻度组,差异均有统计学意义(F=21.306、23.485和152.751、630.848,P<0.001)。④子痫前期组胎盘和外周血中Smac与Survivin及PTEN蛋白表达呈负相关(P<0.05)。⑤子痫前期组胎盘和外周血中Smac蛋白与新生儿体重及胎盘质量呈负相关,Survivin和PTEN蛋白与新生儿体重及胎盘质量呈正相关(P<0.05)。结论:Smac高表达、Survivin和PTEN低表达在子痫前期的发生、发展中起重要作用,与新生儿预后有关。

PTEN、Smac和LIVIN在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究PTEN、Smac和LIVIN在人胃癌组织中的表达,初步探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测75例胃癌标本黏膜组织中PTEN、Smac和LIVIN蛋白的表达,胃溃疡或十二指肠溃疡患者胃黏膜组织作为正常对照组。结果胃癌组织中LIVIN的表达率显著高于正常胃黏膜组织,PTEN及Smac的表达率则低于正常胃黏膜组织(P均<0.01);LIVIN与Smac、PTEN的表达呈负相关(P均<0.01),PTEN与Smac的表达呈正相关(P<0.01);PTEN、Smac和LIVIN的阳性表达率与肿瘤淋巴转移、临床分期、病理分化程度及浸润深度密切相关。结论LIVIN、PTEN及Smac有可能成为胃癌临床诊断、判断疗效及监测预后的可靠指标。

凋亡抑制因子c-IAP1和促凋亡因子Smac在儿童急性白血病患者骨髓中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白c-IAP1和促凋亡蛋白Smac在儿童急性白血病(AL)患者中的表达情况,分析二者之间的关系及临床意义。方法 AL患儿72例,其中初诊组32例,缓解组30例,复发组10例;另取同期12例非恶性血液病患儿作为对照组。应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素染色法分别检测患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白表达情况;对其中45例患儿采用半定量反转录聚合酶链反应检测其骨髓单个核细胞中c-IAP1、Smac mRNA表达水平。结果 c-IAP1、Smac蛋白在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=19.345、16.621,P<0.008);复发组AL患儿c-IAP1、Smac蛋白表达水平高于对照组(H=8.324、8.324,P<0.008)。c-IAP1、Smac mRNA在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=7.973、5.942,P<0.017)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白和mRNA水平在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病间比较差异无统计学意义(t=-0.482、0.818,P>0.05)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白及mRNA水平呈正相关(r=0.541、0.668,P<0.01)。结论c-IAP1、Smac蛋白参与了儿童AL的发生和发展,并且二者相互影响,但在初诊患儿中二者表达水平与白血病临床类型可能无关。

侵袭性垂体腺瘤smac,XIAP,caspase-3的表达

目的探讨凋亡基因XIAP,caspase-3,smac与侵袭性垂体腺瘤侵袭发生的关系及三者之间的相关性。方法59例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定方法分为侵袭组和非侵袭组,采用免疫组化检测XIAP,caspase-3和smac蛋白的表达,RT-PCR法检测XIAP,caspase-3和smac mRNA的表达,分析侵袭组和非侵袭组XIAP,caspase-3和smac表达水平的差异和相关性。结果59例垂体瘤患者中,31例为侵袭性垂体腺瘤,28例为非侵袭性垂体腺瘤。侵袭性垂体腺瘤组的XIAP蛋白和mRNA表达均较非侵袭性腺瘤组增高,而caspase-3和smac蛋白和mRNA表达较非侵袭性腺瘤组降低。Pearson相关分析显示:侵袭性腺瘤组中caspase-3和smac mRNA的表达成正相关(r=0.50,P<0.01);caspase-3与XIAP mRNA表达呈负相关(r=-0.69,P<0.01);smac与XIAP mRNA表达呈负相关(r=-0.56,P<0.01)。非侵袭性垂体腺瘤组中XIAP,caspase-3和smac mRNA的表达无明显相关性。结论XIAP,caspase-3,smac三者相互协同作用,导致垂体腺瘤侵袭性增强,三者可以作为垂体腺瘤侵袭性的有效参考指标。

无线传感网中简化的SMACS协议

无线传感器网络为了节省能量协议要尽可能的简单,本文是对SMACS协议的简化,去掉了超帧及同步过程。没有了超帧的时间同步机制会带来带来一系列的问题,通过引入虚超帧的概念,引入了新的邻居发现和信道分配的机制,利用邻居收发的信息,建立了两个节点间的通信链路。减少了同步信息的传输,增加了协同工作的一些计算,因计算比传输消耗的能量少,总的来说减少了能量的消耗。

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的Smac、caspase-3表达及死亡方式

目的探讨年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)中Smac、caspase-3的表达和LECs超微结构变化及死亡方式。方法收集皮质性(30例)、核性(24例)、后囊下性(28例)年龄相关性白内障患者晶状体前囊片,以12例高度近视摘出的透明晶状体的晶状体前囊片为对照,应用免疫组织化学链酶菌抗生素蛋白-过氧化物酶法检测Smac、caspase-3蛋白在LECs中的表达,并采用透射电镜观察LECs超微结构的改变及死亡方式。结果Smac、caspase-3蛋白在年龄相关性白内障组LECs中的阳性表达率分别为81.71%、78.05%,与透明晶状体组比较染色阳性率及染色强度差异均有统计学意义(P<0.05)。3种类型年龄相关性白内障透射电镜下均可见LECs多表现为肿胀,线粒体嵴缺失、空泡变、髓样化,粗面内质网扩张、颗粒融合和脱颗粒现象,仅1例核性白内障中可见到核膜皱缩向外呈锐角凸起,部分双层核膜融合,模糊不清,细胞核内染色质浓缩,未见凋亡小体。结论Smac、caspase-3蛋白可能参与了年龄相关性白内障的形成。年龄相关性白内障LECs存在凋亡、胀亡等多种细胞死亡方式,细胞凋亡与细胞胀亡的发生可能存在部分分子机制的重叠。LECs超微结构的改变表明线粒体形态改变和功能异常在年龄相关性白内障发生中起重要作用。

Smac过表达增强氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制和促凋亡作用

目的:研究Smac过表达联合氯化镉(CdCl2)对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响,为以Smac为基础的肿瘤基因治疗以及镉作为抗肝癌药物的开发提供实验依据。方法:实验共设立5组,分别为对照组、pcDNA3.1+组、pcDNA3.1+-hSmac组、CdCl2组以及CdCl2联合Smac组。对照组细胞不进行细胞转染、不染毒;pcDNA3.1+和pcDNA3.1+-hSmac组细胞采用脂质体介导的方法分别转染空载体pcDNA3.1+和携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac;CdCl2组给予不同浓度(10、20和30μmol.L-1)CdCl2;CdCl2联合Smac组细胞首先将pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,然后给予CdCl2处理。采用MTT法检测Smac过表达联合CdCl2对细胞增殖的影响,AO/EB法和AnnexinⅤ/PI双荧光标记流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果:MTT结果显示,与对照组比较,除空载体pcDNA3.1+组无统计学意义外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.001);单纯CdCl2组细胞抑制率随剂量增加而显著上升;分别与相应的单纯CdCl2组和pcDNA3.1+-hSmac组比较,CdCl2联合Smac组细胞的抑制率明显升高(P<0.001)。AO/EB染色荧光显微镜下观察显示,对照组细胞状态良好,而pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol.L-1 CdCl2组及CdCl2联合Smac组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示,pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡率增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组比较,差异均具有统计学意义(P<0.001)。CdCl2联合Smac组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol.L-1 CdCl2组(P<0.001)。结论:CdCl2对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,可诱导细胞凋亡。Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强CdCl2对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用。