当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射增敏作用

目的:探讨当归、红芪提取物对直线加速器(X射线)辐射后人肝癌细胞SMMC-7721的增敏作用。方法:96孔板培养人肝癌细胞SMMC-7721,设9个组,对照组(N)即正常对照组,纯辐射组(F)给以源皮距100cm 4Gy的X射线,另设3个纯药物组(DH),设高(H:8mg/mL)、中(M:6mg/mL)、低(L:4mg/mL)三个药物浓度梯度,3个辐射加药组(F+DH)和1个空白组(只有培养液无细胞)。每组设6个复孔。采用MTT法计算当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射前后增殖活性的影响。流式细胞术检测不同组细胞的周期情况,透射电镜及倒置显微镜分别观察各组细胞结构变化,用蛋白印记法检测不同组细胞中p21蛋白表达情况。结果:MTT法证明当归、红芪提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用,对于辐射后的肝癌细胞具有很好的周期抑制作用。不同剂量当归、红芪提取物作用于细胞24h后,抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖呈剂量依赖关系,药物浓度越高,抑制作用越显著。SMMC-7721细胞经辐射后,细胞的抑制率为37.58%,辐射后加不同浓度当归、红芪提取物(4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL),联合作用对细胞的抑制率升高,分别为45.27%、51.86%、59.34%,且呈药物浓度依赖关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。辐射组肝癌细胞较正常组细胞G0/G1期细胞数明显增多,由44.70%升至71.60%(P<0.01),S期细胞减少,高浓度药物也可以使G0/G1期细胞比例有所升高(P<0.01)。辐射加药组细胞G0/G1期阻滞最为明显,并呈药物浓度梯度关系。高浓度药物组、辐射组细胞p21蛋白表达较正常组升高,辐射组+高浓度药物组细胞p21蛋白表达较辐射组明显升高。结论:当归、红芪提取物对于人肝癌SMMC-7721细胞具有很好的抑制作用,对经X线辐射后的细胞具有很好的增敏作用。

小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的作用。方法应用MTT、流式细胞仪和软琼脂克隆形成试验,研究小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的作用。结果小檗碱对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞有抑制增殖、促进凋亡和抑制细胞克隆形成能力。结论小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞有抑制增殖和促进凋亡作用。

红藤脂酸钠对人肝癌细胞系SMMC-7721体外抑瘤作用的实验研究

目的研究中药制剂红藤脂酸钠在体外对人肝癌细胞系SMMC-7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法MTT法测定SMMC-7721细胞生长的抑制百分率,并运用AnnexinV法和TUNEL法检测凋亡发生率。结果MTT法测得对照组与红藤脂酸钠处理组吸光值(A值)分别为:对照组(0.385±0.03),红藤脂酸钠处理组中的250μg/ml组(0.31±0.019)、500μg/ml组(0.199±0.022)、1mg/ml组(0.15±0.033)和2mg/ml组(0.048±0.026);各组间比较有显著性差异(P<0.01)。AnnexinV法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡90%,对照组细胞凋亡17.36%。TUNEL法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡(60.3±6.0)%,与对照组细胞凋亡(6.6±3.5)%相比,差异有显著性(P<0.01)。结论红藤脂酸钠在体外对7721细胞生长有明显的抑制作用,其作用机制可能主要是诱导肿瘤细胞发生凋亡。

抑制AFP基因表达能直接抑制肝癌细胞系SMMC-7721增殖

甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)是哺乳动物胚胎时期由肝脏和软黄囊产生的一个主要的血清蛋白.在正常成人外周血中常常检测不到AFP的存在,而在肝癌患者外周血中,AFP常显著升高,是诊断原发性肝癌的一个重要的肿瘤标志物.

谷氨酰胺对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖影响的体外研究

背景谷氨酰胺与肿瘤的发生密切相关,但其促体外培养肿瘤细胞增殖的机制目前尚不明确。目的探讨谷氨酰胺在体外影响人肝癌细胞系SMMC鄄7721增殖的可能机制。方法人肝癌细胞系SMMC鄄7721与不同浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0mmol/L)的谷氨酰胺共培养24h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测热休克蛋白(HSP)70的表达。结果谷氨酰胺能显著促进人肝癌细胞系SMMC鄄7721的增殖,谷氨酰胺浓度为2.0mmol/L时其促肿瘤生长的作用最强,而后又逐步下降。添加谷氨酰胺的肿瘤细胞,S期细胞比(SPF)和细胞增殖指数(PI)以及HSP70的表达较无谷氨酰胺者显著增加,且其作用随谷氨酰胺浓度的增加而增强,至浓度为2.0mmol/L时其作用最强,而后逐渐下降。结论谷氨酰胺可诱导体外培养的人肝癌细胞系SMMC鄄7721HSP70表达增高,可能是其促肿瘤生长的作用机制之一。

TRAIL诱导肝癌细胞系SMMC-7721的凋亡作用

目的:观察TRAIL诱导肝癌SMMC—7721细胞凋亡的作用.方法:采用MTT法检测细胞存活分数;TUNEL法检测细胞凋亡率;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;电镜观察凋亡细胞超微结构.结果:TRAIL对SMMC-7721细胞的存活分数和凋亡率的影响呈典型的量效关系,经TRAIL作用后的细胞,流式细胞仪检测呈标准的亚二倍峰,电镜观察发现经TRAIL作用的部分细胞具有凋亡细胞的典型形态特征.结论:TRAIL可诱导SMMC—7721细胞凋亡.

HCV核心蛋白对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响

目的:观察HCV核心蛋白对低侵袭性人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响。方法:将HCV核心蛋白的原核表达质粒pcDNA3.0-C-EGFP转染SMMC-7721细胞,以空质粒pcDNA3.0(-)转染的细胞作对照。分别采用RT-PCR、Western blot和ELISA法检测转染细胞HCV核心蛋白mRNA、蛋白及培养上清中蛋白的表达水平;进行纤维连接蛋白黏附实验、侵袭实验及运动实验,MTT法观察细胞增殖情况。结果:重组质粒pcDNA3.0-C-EGFP转染的SMMC-7721细胞HCV核心蛋白mRNA、蛋白及培养上清中蛋白的表达水平,细胞黏附率,侵袭实验及运动实验穿膜细胞数均高于对照(t=8.141、5.762、19.931、2.961、4.112和4.213,P均<0.05)。pcDNA3.0-C-EGFP转染的SMMC-7721细胞增殖率也较对照明显增加(P<0.05)。结论:HCV核心蛋白外源基因可促进SMMC-7721细胞系的增殖。

miR-3682-3p通过调控PI3K/AKT信号通路影响SMMC-7721人肝癌细胞的增殖、侵袭和凋亡

目的分析miR-3682-3p与PI3K/AKT信号通路在肝细胞癌发展中的关系,以期为肝细胞癌的治疗提供新的思路。方法通过qRT-PCR分析MIHA人正常肝细胞和SMMC-7721人肝癌细胞中miR-3682-3p与PI3K/AKT的表达水平。通过转染不同质粒将SMMC-7721人肝癌细胞分为miR-3682-3p mimic组、miR-3682-3p mimic NC组、miR-3682-3p inhibitor组和miR-3682-3p inhibitor NC组,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-3682-3p与PI3K的相互作用关系。采用蛋白免疫印迹、qRT-PCR、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分析不同实验组细胞的增殖、侵袭和凋亡情况。结果miR-3682-3p能够靶向调控PI3K/AKT信号通路,miR-3682-3p表达能够激活PI3K/AKT信号通路,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,凋亡减少。而抑制miR-3682-3p表达后,PI3K/AKT通路受到抑制,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,凋亡增加。结论PI3K是miR-3682-3p的直接靶点,miR-3682-3p通过激活PI3K/AKT通路促进SMMC-7721人肝癌细胞的体外转移活性。

蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响

目的观察蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响。方法体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721,MTT比色法观察蜂王浆冻干粉水溶液及蜂王浆冻干粉含药血清对其增殖的影响。结果蜂王浆冻干粉水溶液能促进人肝癌细胞系SMMC-7721增殖,呈剂量依赖性。而蜂王浆冻干粉含药血清则能抑制该细胞的增殖,其抑制效应亦呈剂量依赖性。结论蜂王浆冻干粉的抗癌效应可能是其代谢产物或刺激机体产生的活性物质所致。

蜂毒肽诱导人肝癌细胞系SMMC-7721程序性坏死

目的探讨蜂毒肽(MLT)对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用及可能机制。方法采用MTT法检测不同浓度蜂毒肽对人肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤及程序性坏死特异性抑制剂-1(Nec-1)对蜂毒肽杀伤SMMC-7721细胞的抑制作用。Hoechst 33342及PI双染色观察细胞程序性坏死的发生,流式细胞术检测细胞程序性坏死率,透射电子显微镜检测细胞超微结构变化,Western blotting法检测SMMC-7721细胞内受体相互作用蛋白1(RIP1)的表达变化。结果与对照组比较,不同浓度蜂毒肽作用SMMC-7721细胞24 h后,细胞增殖活力明显下降(P<0.05);细胞染色呈深蓝色和红色的形态;细胞膜完整性被破坏、细胞器肿胀、细胞器膜被破坏、核膜完整性丧失,表明细胞发生坏死;Westen blotting结果显示,SMMC-7721细胞内RIP1表达比例升高。与蜂毒肽给药组比较,Nec-1预处理组细胞增殖活力显著提高,细胞坏死率降低,细胞内RIP1表达下调。结论蜂毒肽通过RIP1介导的程序性坏死途径诱导SMMC-7721细胞死亡。

苯乙酸对肝癌细胞系SMMC-7721的增殖抑制作用及与RNA编辑酶ADAR1表达的相关性

为探讨苯乙酸(PA)对肝癌细胞系SMMC-7721的增殖抑制作用及其与RNA编辑酶ADAR1表达的相关性,应用细胞计数及MTT法检测了不同浓度(0.5,1.0,2.0和4.0 mmol/L)PA对肝癌细胞系SMMC-7721的增殖抑制作用,通过流式细胞术(FCM)分析了各细胞周期的细胞百分比,应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及免疫印迹杂交分析使用不同浓度(0.5,1.0,2.0 mmol/L)PA作用后肝癌细胞系SMMC-7721中RNA编辑酶ADAR1 mRNA及蛋白表达的变化.结果表明,肝癌细胞系SMMC-7721经不同浓度PA作用后,增殖抑制率随作用时间延长及PA浓度增加而明显提高(P<0.05),但2.0和4.0 mmol/L PA作用72 h后组间差异比较无统计学意义(P>0.05).肝癌细胞系SMMC-7721中RNA编辑酶ADAR1 mRNA及蛋白表达随PA浓度增加而明显降低(P<0.05).通过沉默SMMC-7721细胞中ADAR1的表达发现,ADAR1表达下调可有效抑制肝癌细胞增殖.结果表明,PA可阻抑肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖,且存在时间及剂量的依赖性,作用机制与PA下调ADAR1表达相关.

Hsa-miR-4282对肝癌细胞系SMMC-7721生长的影响

目的探讨Hsa-miR-4282在肝癌细胞系SMMC-7721中的表达及其对细胞生长的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测Hsa-miR-4282在人正常肝上皮细胞系HL-7702和人肝癌细胞系MHCC97-H、SMMC-7721,以及 20例肝癌组织及其相应癌旁组织中的表达。采用瞬时转染法将Hsa-miR-4282 mimics(上调组)和Hsa-miR-4282 inhibitor(下调组)分别转染肝癌SMMC-7721细胞,上调组和下调组分别设置相应阴性对照组。转染后采用MTT法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力。结果 Hsa-miR-4282在肝癌组织、肝癌细胞MHCC97-H及肝癌细胞SMMC-7721中的表达均低于癌旁组织及正常肝细胞HL-7702(P<0.05)。MTT实验结果显示,Hsa-miR-4282上调后肝癌SMMC-7721细胞的OD值低于其阴性对照组,而下调后OD值高于其阴性对照组(P<0.05)。平板克隆形成实验显示,下调组的细胞克隆数高于其阴性对照组[(240±7)个 vs (191±10)个,P=0.005)],而上调组细胞克隆数低于基阴性对照组[(146±10)个 vs (193±12)个,P=0.013)]。流式细胞仪检测结果显示,Hsa-miR-4282上调组细胞凋亡率较其阴性对照组升高[(23.89±1.89)% vs(16.6±1.14)%,P=0.009)],下调组细胞凋亡率较期阴性对照组降低[(14.98±0.46)% vs (17.79±0.73)%,P=0.010]。结论 Hsa-miR-4282上调可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进细胞凋亡,可能与肝癌的发病机制有关。

黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响研究

目的探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月—2016年1月,取人肝癌细胞系SMMC-7721,制备细胞悬液。加入黄芩素(1、2、5、10、20、50、100、200、300μmol/L,分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9组)或LY294002(1、2、5、10、20、30μmol/L,分别命名为B1、B2、B3、B4、B5、B6组),设定空白对照组和二甲基亚砜(DMSO)对照组,采用CCK8试剂盒检测各组细胞增殖水平;采用20μmol/L黄芩素(C1组)单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(C2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组细胞周期;采用2、5、10、20μmol/L黄芩素(分别命名为D1、D2、D3、D4组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用显微摄影检测各组细胞数量;采用20μmol/L黄芩素(E1组)单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(E2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组早期凋亡和晚期凋亡情况;采用20μmol/L黄芩素(F1组)、10μmol/L LY294002(F2组)或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(F3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、周期素D1(Cyclin D1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)mRNA表达水平;采用20μmol/L黄芩素(G1组)、10μmol/L LY294002(G2组)或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(G3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)、Cyclin D1、磷酸化GSK-3β(P-GSK-3β)、磷酸化AKT(P-AKT)表达水平。结果 A8组、A9组、B6组细胞增殖水平低于空白对照组、DMSO对照组(P<0.05)。C2组G0/G1期、G2/M期细胞比例高于空白对照组、DMSO组,S期细胞比例低于空白对照组、DMSO组(P<0.05)。D4组细胞数量少于空白对照组、DMSO组(P<0.05)。空白对照组、DMSO组、E1组、E2组早期凋亡和晚期凋亡比较,差异无统计学意义(P>0.05)。F3组ERK1/2、Cyclin D1、GSK-3β、AKT mRNA表达水平均低于空白对照组、DMSO组(P<0.05)。G3组P-ERK1/2、Cyclin D1、P-GSK-3β、P-AKT表达水平低于空白对照组、DMSO组(P<0.05)。结论黄芩素和LY294002可抑制人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖,但不影响其凋亡。

黄芩素、LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨黄芩素和 PI3K 特异性抑制剂 LY294002对人肝癌细胞系 SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养 SMMC-7721细胞，20μmol／L DMSO 及0、1、5、10、20μmol／L 黄芩素分别处理 SMMC-7721细胞，显微镜观察细胞数量变化；20μmol／L DMSO 及0、1、2、5、10、20、50、100、200和300μmol／L 黄芩素和0、1、2、5、10、20、30μmol／L 的 LY294002处理 SMMC-7721细胞24 h，CCK8法检测细胞增殖活性。将 SMMC-7721细胞随机分为4组，A 组加入0μmol／L 黄芩素；B 组加20μmol／L DMSO；C 组加20μmol／L 黄芩素；D 组加20μmol／L 黄芩素和10μmol／L LY294002，培养24 h，流式细胞术检测细胞周期并计算细胞凋亡比例、RT-PCR 法和 Western blotting法检测凋亡相关因子 Bcl-2、Bax mRNA 和蛋白表达及 p-AKT 活性。结果 SMMC-7721细胞数量随黄芩素／LY294002浓度增加而显著减少，细胞增殖活性明显降低（P 均＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组的 G0～G1期细胞比例明显增多（P ＜0．05），S 期细胞比例明显下降，G2／M期细胞变化无统计学意义（P ＞0．05），C、D 组 G0～G1期细胞升高比例、S 期细胞降低比例比较，P ＜均0．05。与 A 组和 B 组相比，C、D 组早期凋亡和晚期凋亡细胞均明显增多（P 均＜0．05），D 组比 C 组早期凋亡和晚期凋亡细胞增多更明显（P ＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组抑制凋亡因子 Bcl-2 mRNA 水平显著降低（P ＜0．05），凋亡促进因子 Bax mRNA 水平显著增高（P ＜0．05）；D 组 Bcl-2 mR-NA 水平比 C 组降低更明显，而 Bax mRNA 水平比 C 组升高更明显（P 均＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平显著降低（P 均＜0．05），凋亡促进因子 Bax 表达量显著增高（P 均＜0．05），D组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平降低比 C 组更明显（P 均＜0．05），凋亡促进因子 Bax 表达量升高比 C 组更明显（P 均＜0．05）。结论黄芩素与 LY294002可能通过调控凋亡相关因子的表达及增加活化的 AKT水平从而诱导 SMMC-7721细胞凋亡，抑制其增殖，且二者有协同效应。

β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。

藤黄酸促进bax和p53表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡(英文)

目的:观察藤黄酸(gambogicacids,GA)对肝癌细胞凋亡的诱导作用并探讨其分子作用机制。方法与结果: 采用MTT比色法检测藤黄酸对人肝癌和人正常肝细胞增殖作用的影响,结果表明,藤黄酸对人肝细胞性肝癌SMMC 7721 细胞株和QGY 7701细胞株有明显增殖抑制作用,并呈剂量依赖性,而对正常人肝组织L 02细胞株作用相对较弱;光镜及电镜形态学观察结果显示,给予GA后,肝癌细胞发生明显的细胞凋亡形态学变化,如细胞体积变小,细胞核固缩,出现凋亡小体等;采用RT PCR和Westernblotting方法检测baxmRNA以及bax和p53蛋白表达变化,结果表明GA可诱导baxmR NA及bax和p53蛋白表达上调;琼脂糖凝胶电泳显示,给予GA后,SMMC-7721裸小鼠移植瘤组织呈现典型的DNAladder 电泳梯状条带。结论:藤黄酸可显著抑制人肝癌细胞的增殖,其分子作用机制可能通过促进bax和p53表达上调,从而诱导人肝细胞性肝癌细胞凋亡。

刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。

熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。

壳寡糖抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖及其机制探讨

探讨壳寡糖抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖作用及其分子机制。采用噻唑蓝(MTT)法检测壳寡糖的细胞增殖抑制作用;利用流式细胞仪检测肝癌细胞的凋亡情况;用RT-PCR和Western blot方法研究壳寡糖引起凋亡的原因。结果显示,0.8mg/mL的壳寡糖能够抑制SMMC-7721细胞增殖,并且促进SMMC-7721细胞的凋亡,其原因是壳寡糖能够上调促凋亡蛋白Bax的表达。