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Diagnosis and treatment of refractory infectious diseases using nanopore sequencing technology:Three case reports
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作者 Qing-Mei Deng Jian Zhang +5 位作者 Yi-Yong Zhang Min Jia Du-Shan Ding Yu-Qin Fang Hong-Zhi Wang Hong-Cang Gu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2024年第22期5208-5216,共9页
BACKGROUND Infectious diseases are still one of the greatest threats to human health,and the etiology of 20%of cases of clinical fever is unknown;therefore,rapid identification of pathogens is highly important.Traditi... BACKGROUND Infectious diseases are still one of the greatest threats to human health,and the etiology of 20%of cases of clinical fever is unknown;therefore,rapid identification of pathogens is highly important.Traditional culture methods are only able to detect a limited number of pathogens and are time-consuming;serologic detection has window periods,false-positive and false-negative problems;and nucleic acid molecular detection methods can detect several known pathogens only once.Three-generation nanopore sequencing technology provides new options for identifying pathogens.CASE SUMMARY Case 1:The patient was admitted to the hospital with abdominal pain for three days and cessation of defecation for five days,accompanied by cough and sputum.Nanopore sequencing of the drainage fluid revealed the presence of orallike bacteria,leading to a clinical diagnosis of bronchopleural fistula.Cefoperazone sodium sulbactam treatment was effective.Case 2:The patient was admitted to the hospital with fever and headache,and CT revealed lung inflammation.Antibiotic treatment for Streptococcus pneumoniae,identified through nanopore sequencing of cerebrospinal fluid,was effective.Case 3:The patient was admitted to our hospital with intermittent fever and an enlarged neck mass that had persisted for more than six months.Despite antibacterial treatment,her symptoms worsened.The nanopore sequencing results indicate that voriconazole treatment is effective for Aspergillus brookii.The patient was diagnosed with mixed cell type classical Hodgkin's lymphoma with infection.CONCLUSION Three-generation nanopore sequencing technology allows for rapid and accurate detection of pathogens in human infectious diseases. 展开更多
关键词 Nanopore sequencing technology third-generation sequencing technology INFECTION PATHOGEN Case report
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基于SMRT技术的水杉全长转录组分析及基因功能注释 被引量:2
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作者 刘小红 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期27-32,共6页
以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长... 以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长转录组测序共获得了包含5914711个亚读段(subreads)的14.0 Gb的数据,质量控制处理后包括236130个全长非嵌合读段(reads)和97626个一致性reads;转录本经去冗余处理后共获得61057个全长一致性读段(unigenes),其中有54099个被成功注释到7个数据库中,注释比达88.60%;对水杉unigenes作CDS(coding sequence)长度分布及转录因子分析,其CDS长度范围为144~6477 nt,平均长度约为679 nt;共检测到2386个转录因子,这些转录因子可以归类为29个家族。 展开更多
关键词 水杉 单分子测序技术 全长转录组 基因 功能注释
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湿地松体细胞胚胎发生过程的全长转录组测序及生物信息学分析
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作者 薛蕾 曾明 +4 位作者 王哲 郭文冰 伍彩云 郭业皇 刘阳 《林业与环境科学》 2024年第5期10-20,共11页
为提高湿地松Pinus elliottii体细胞胚胎发生效率,探究湿地松体胚发生的分子机理,利用SMRT(Single molecule real-time)第三代测序技术对湿地松体胚发生过程进行了全长转录组测序。测序总共生成了77.99 Gb原始数据,经多步筛选、矫正及... 为提高湿地松Pinus elliottii体细胞胚胎发生效率,探究湿地松体胚发生的分子机理,利用SMRT(Single molecule real-time)第三代测序技术对湿地松体胚发生过程进行了全长转录组测序。测序总共生成了77.99 Gb原始数据,经多步筛选、矫正及去冗余后,获得了63334条高质量非冗余全长转录本,平均长度为2070 bp,N50为2317 bp,总注释率可达97.27%。GO功能注释及KEGG代谢通路分析表明,湿地松体胚发生过程中表达的基因多与细胞及细胞器的生长、次生代谢物质的生物合成碳代谢、氨基酸的生物合成以及植物激素相关。根据全长转录本数据,预测了62177条完整编码序列、2668个转录因子、4570个简单序列重复和1432个可变剪切事件。研究获得了湿地松体胚发生过程的全长转录组序列、完整的功能注释和结构信息。 展开更多
关键词 湿地松 体细胞胚胎发生 smrt三代测序 全长转录组
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基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价 被引量:3
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作者 边燕飞 席晓霞 +3 位作者 郑艺 侯强川 孙天松 孙志宏 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期212-220,共9页
目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面... 目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法:采集6份婴幼儿配方奶粉,使用细菌纯培养、单分子实时测序技术(PacBio SMRT)和微滴式数字PCR(ddPCR)联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果:采用纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBio SMRT测序技术,在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过嗜冷菌蜡样芽孢杆菌,其平均相对含量高达23.54%,这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外,在IF3、IF4、IF5和IF6样品中,检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌,其相对含量分别为0.06%,0.01%,0.15%和0.05%。采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析,发现每克奶粉样品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论:在6份婴幼儿配方奶粉中均未检出致病菌,符合食品安全国家标准,然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风险,影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况,初步建立婴幼儿配方奶粉的微生物检测技术。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 污染微生物 纯培养 ddPCR PacBio smrt测序
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自然发酵酸马奶对人体肠道菌群的影响——基于PacBio SMRT测序技术 被引量:6
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作者 温永平 侯强川 张和平 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期4-7,共4页
采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在... 采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在大量的"肠道核心微生物群",饮用酸马奶会使志愿者肠道中硬壁菌门的相对含量升高。在种的水平上,饮用酸马奶可以促进部分有益生菌如柔嫩梭菌群、多形拟杆菌的生长,这可能是酸马奶具有众多益生作用的原因之一。 展开更多
关键词 酸马奶 肠道菌群 PacBiosmrt测序技术
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不同地区奶酪中乳酸菌多样性研究 被引量:2
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作者 吕瑞瑞 杨成聪 +4 位作者 李伟程 赵飞燕 马腾 孙志宏 张和平 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第11期201-208,共8页
乳酸菌作为奶酪中重要的微生物可改善奶酪风味及营养,其代谢产物有利于人体健康。为探究不同地区奶酪乳酸菌的多样性,以14份奶酪样品为研究对象,通过乳酸菌特异性引物与PacBio SMRT三代测序技术相结合的方法进行测序。结果表明:在14份... 乳酸菌作为奶酪中重要的微生物可改善奶酪风味及营养,其代谢产物有利于人体健康。为探究不同地区奶酪乳酸菌的多样性,以14份奶酪样品为研究对象,通过乳酸菌特异性引物与PacBio SMRT三代测序技术相结合的方法进行测序。结果表明:在14份奶酪样品中共发现14个乳酸菌属和65个乳酸菌种,其中乳酸乳球菌(27.10%)和嗜热链球菌(14.35%)为主要优势菌种,不同样品中乳酸菌菌群结构存在较大差异。通过主坐标分析发现:将奶酪样品分为3组,各组奶酪样品的主要优势菌属各有特点,这可能是由于采样地、气候和原料等因素所致。奶酪中鸡乳杆菌、植物乳杆菌和德氏乳杆菌等部分低丰度乳酸菌之间存在显著相关性。本研究结果表明:奶酪样品中乳酸菌菌群结构复杂多样,地理环境和气候是影响奶酪菌群结构的重要因素。本文通过研究不同地区奶酪乳酸菌的多样性,以期为乳酸菌资源开发提供参考依据。 展开更多
关键词 奶酪 乳酸菌 生物多样性 单分子实时测序
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摩洛哥自然发酵驼乳中乳酸菌分离鉴定及特性研究 被引量:3
7
作者 柳青 史迪 +1 位作者 刘文俊 张和平 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期85-95,137,共12页
为了丰富菌种资源库资源,探索乳品细菌多样性及菌株生化特性,对摩洛哥阿尤恩地区4份自然发酵驼乳的乳酸菌应用传统纯培养方法和宏基因组16S rRNA基因测序技术进行分离、鉴定,同时对细菌宏基因组测序进行多样性研究及单菌株生化特性研究... 为了丰富菌种资源库资源,探索乳品细菌多样性及菌株生化特性,对摩洛哥阿尤恩地区4份自然发酵驼乳的乳酸菌应用传统纯培养方法和宏基因组16S rRNA基因测序技术进行分离、鉴定,同时对细菌宏基因组测序进行多样性研究及单菌株生化特性研究。由纯培养结果可知:4份样品中分离乳酸菌株包含3个属、8个种,共82株乳酸菌,其中58.54%为Lactococcus lactis;根据宏基因组测序结果可知:4份样品中分离的细菌分属于7个门、78个属和147个种,Proteobacteria(54.64%)和Firmicutes(41.77%)是样品中的优势菌门,Lactococcus(31.87%)及Lactococcus lactis(22.95%)占比较高,是样品中优势菌属及菌种。通过比较不同乳酸菌在相同环境下的生长情况及产酸速率,从样品中分离得到的48株Lactococcus lactis中筛选得到2株生长快、产酸速率高的菌株IMAU98054和IMAU98084。2株菌最适生长温度为37℃,pH值为5.5~7.5,且有一定的盐耐受性,NaCl质量分数小于6%时生长不会受到明显抑制。2种菌株在37℃发酵18 h后其OD600可达到2.5218和2.5172。研究结果表明:摩洛哥阿尤恩地区自然发酵驼乳中包含多类细菌,Lactococcus lactis是其中的优势菌种,并从其中筛选出2株生长快、产酸速率高的菌株IMAU98054和IMAU98084。 展开更多
关键词 乳酸菌 自然发酵驼乳 PacBio smrt测序技术 生物多样性 生物学特性
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海南地区健康青年肠道中乳酸菌和双歧杆菌多样性研究 被引量:3
8
作者 温永平 沈玲玲 +1 位作者 孙志宏 江正强 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期14-24,共11页
目的:在种的水平揭示海南地区健康青年肠道中乳酸菌和双歧杆菌的丰度和生物多样性,探讨性别、年龄和BMI对上述两者可能的影响。方法:以海南地区27名健康志愿者为研究对象,将乳酸菌特异性引物和双歧杆菌特异性引物扩增与PacBio SMRT测序... 目的:在种的水平揭示海南地区健康青年肠道中乳酸菌和双歧杆菌的丰度和生物多样性,探讨性别、年龄和BMI对上述两者可能的影响。方法:以海南地区27名健康志愿者为研究对象,将乳酸菌特异性引物和双歧杆菌特异性引物扩增与PacBio SMRT测序技术相结合,采用相关生物信息学与统计学方法分析。结果:志愿者肠道中乳酸菌主要由链球菌属、乳杆菌属、魏斯氏菌属、瘤胃球菌属等组成。按照乳酸菌在种水平的组成,所有人群可以分为两个肠型,两个肠型人群唾液链球菌的比例存在显著差异(P<0.05)。此外,男性志愿者肠道中乳酸菌丰度和多样性显著高于女性。依据肠道双歧杆菌多样性特征,可将志愿者分为以链状双歧杆菌、长双歧杆菌、粪双歧杆菌为优势菌的3个类群,性别和BMI均是对双歧杆菌组成产生影响的因素。结论:青年人群肠道中具有丰富的乳酸菌和双歧杆菌,其构成与个人饮食习惯、性别和BMI有一定相关性,肠道中优势乳酸菌和双歧杆菌对人体健康发挥着重要作用。 展开更多
关键词 乳酸菌 双歧杆菌 肠道菌群 特异性引物 单分子实时测序技术
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益生菌Probio-X^(®)对远航海员肠道中乳酸菌菌群的影响 被引量:3
9
作者 吕瑞瑞 杨成聪 +1 位作者 赵飞燕 张和平 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期71-78,共8页
为探究远洋航行及益生菌Probio-X^(®)的摄入对肠道乳酸菌的影响,本研究招募27名长远航海员,随机分为两组,分别服用复合益生菌制剂(n=11)和安慰剂(n=16),试验周期为30 d。采用乳酸菌特异性引物扩增与PacBio SMRT测序技术相结合的方... 为探究远洋航行及益生菌Probio-X^(®)的摄入对肠道乳酸菌的影响,本研究招募27名长远航海员,随机分为两组,分别服用复合益生菌制剂(n=11)和安慰剂(n=16),试验周期为30 d。采用乳酸菌特异性引物扩增与PacBio SMRT测序技术相结合的方式,对长远航海员肠道乳酸菌进行检测。在全部船员肠道中共鉴定到57个属,160个种,主要的优势物种有嗜热链球菌(31.06%)、瘤胃乳杆菌(9.31%)、副血链球菌(6.90%)、唾液链球菌(4.11%)、植物乳杆菌(3.47%)等。在长远航后,益生菌组和安慰剂组海员肠道中乳酸菌特有OTU数量增加,而非度量多维尺度分析(NMDS)结果显示,出海前、后益生菌组和安慰剂组乳酸菌结构并无显著差异,仅在物种水平上部分菌种平均相对含量发生显著变化,如血链球菌和副血链球菌。唾液链球菌和嗜热链球菌是海员出海前肠道中主要的乳酸菌。摄入益生菌后,肠道中链球菌属相对含量较少的部分海员乳酸菌肠型易发生改变,植物乳杆菌和发酵乳杆菌相对含量增加。本研究结果表明,摄入益生菌Probio-X^(®)的长远航海员肠道中副血链球菌和血链球菌显著减少,部分海员的乳酸菌肠型优势物种由链球菌属改变为乳杆菌属,这种改变取决于肠道原始乳酸菌的类别和基础数量。本研究在种水平上分析益生菌Probio-X^(®)对长远航海员肠道乳酸菌多样性的影响,为海员的肠道健康维护提供一个可行的途径。 展开更多
关键词 长远航 益生菌 肠道菌群 乳酸菌 单分子实时测序
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新疆自然发酵酸牛乳连续发酵期间乳酸菌菌群动态变化
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作者 纪欣 刘文俊 +1 位作者 郭艳荣 孙天松 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期9-15,共7页
为了阐明自然发酵酸牛乳长期连续发酵过程中乳酸菌菌群结构动态变化,为其工业化生产提供参考依据,该研究对3份新疆自然发酵酸牛乳样品进行实验室连续发酵9个月,利用纯培养方法及PacBio SMRT测序技术研究酸牛乳样品中乳酸菌多样性。结果... 为了阐明自然发酵酸牛乳长期连续发酵过程中乳酸菌菌群结构动态变化,为其工业化生产提供参考依据,该研究对3份新疆自然发酵酸牛乳样品进行实验室连续发酵9个月,利用纯培养方法及PacBio SMRT测序技术研究酸牛乳样品中乳酸菌多样性。结果表明,随着连续发酵,酸牛乳中微生物群落产酸能力增强,乳酸菌活菌数下降,最终维持在7.0 lgCFU/mL以上。此外,乳酸菌菌群结构不稳定,Lactobacillus delbrueckii、Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus、Streptococcus thermophilus、Lactococcus lactis、Streptococcus salivarius等菌种减少或消失,而Lactobacillus helveticus、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus gallinarum、Enterococcus durans含量增加。将自然发酵酸牛乳中混合菌种直接用于酸牛乳工业化生产尚需更多的研究支撑,从自然发酵乳中筛选发酵特性优良的乳酸菌,确定最佳发酵菌种组合,对酸牛乳工业化生产具有重要意义。 展开更多
关键词 自然发酵酸牛乳 连续发酵 PacBio smrt测序技术 乳酸菌 菌群变化
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Complete genome of Cobetia marina JCM 21022T and phylogenomic analysis of the family Halomonadaceae 被引量:1
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作者 TANG Xianghai XU Kuipeng +2 位作者 HAN Xiaojuan MO Zhaolan MAO Yunxiang 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期528-536,共9页
Cobetia marina is a model proteobacteria in researches on marine biofouling. Its taxonomic nomenclature has been revised many times over the past few decades. To better understand the role of the surface-associated li... Cobetia marina is a model proteobacteria in researches on marine biofouling. Its taxonomic nomenclature has been revised many times over the past few decades. To better understand the role of the surface-associated lifestyle of C. marina and the phylogeny of the family Halomonadaceae, we sequenced the entire genome of C. marina JCM 21022T using single molecule real-time sequencing technology (SMRT) and performed comparative genomics and phylogenomics analyses. The circular chromosome was 4 176 300 bp with an average GC content of 62.44% and contained 3 611 predicted coding sequences, 72 tRNA genes, and 21 rRNA genes. The C. marina JCM 2102U genome contained a set of crucial genes involved in surface colonization processes. The comparative genome analysis indicated the significant differences between C. marina JCM 21022T and Cobetia amphilecti KMM 296 (formerly named C. marina KMM 296) resulted from sequence insertions or deletions and chromosomal recombination. Despite these differences, pan and core genome analysis showed similar gene functions between the two strains. The phylogenomic study of the family Halomonadaceae is relationships were well resolved among every genera Cobetia, Kushneria, Zymobacter, and Halotalea. reported here for the first time. We found that the tested, including Chromohalobacter, Halomonas, 展开更多
关键词 Cobetia marina JCM 21022r Halomonadaceae complete genome sequence comparativegenomics PHYLOGENOMICS surface colonization single molecule real-time sequencingtechnology smrt
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健康蒙古族人肠道中乳酸菌和双歧杆菌多样性 被引量:4
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作者 白梅 侯强川 +5 位作者 孙志宏 王记成 郭帅 韩之皓 王月娇 孟和毕力格 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2697-2709,共13页
【背景】越来越多的研究发现人类的诸多疾病与肠道菌群失衡有关。乳酸菌和双歧杆菌属于肠道中的有益菌,在不同人群肠道中的多样性不尽相同。【目的】在种水平上分析健康蒙古族人群肠道菌群中乳酸菌和双歧杆菌的多样性。【方法】以27名... 【背景】越来越多的研究发现人类的诸多疾病与肠道菌群失衡有关。乳酸菌和双歧杆菌属于肠道中的有益菌,在不同人群肠道中的多样性不尽相同。【目的】在种水平上分析健康蒙古族人群肠道菌群中乳酸菌和双歧杆菌的多样性。【方法】以27名健康蒙古族志愿者为研究对象,其中14名来自中国内蒙古,13名来自蒙古国。首次采用乳酸菌和双歧杆菌的特异性引物扩增与PacBioSMRT三代测序技术相结合,在种水平上探讨志愿者肠道中乳酸菌和双歧杆菌的丰度和生物多样性,并进一步分析性别、BMI(Bodymassindex)值和地域对上述两者可能的影响,以及优势菌种之间的相关性。【结果】在种的水平上,27名志愿者肠道样品中共鉴定到68个乳酸菌和11个双歧杆菌,其中平均相对含量在1%以上的乳酸菌有8个,包括唾液链球菌(Streptococcus salivarius,36.41%)、瘤胃乳酸杆菌(Lactobacillus ruminis,17.94%)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii,3.11%)、罗氏乳杆菌(Lactobacillus rogosae,2.23%)、轻型链球菌(Streptococcus mitis,2.18%)、阴道乳杆菌(Lactobacillus vaginalis,2.02%)、魏斯氏乳杆菌(Weissella confusa,1.54%)和鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus,1.09%);双歧杆菌有5个,包括青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis,39.88%)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum,27.15%)、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum,26.30%)、两歧双歧杆菌(B. bifidum,3.92%)和角双歧杆菌(Bifidobacterium angulatum,1.71%),聚类分析分为链状双歧杆菌和青春双歧杆菌2个主要的类群。分析结果显示:性别、BMI值和地域均未能显著影响志愿者肠道中乳酸菌和双歧杆菌的菌群结构(P>0.05),但男性和女性之间、中国内蒙古地区和外蒙古国的志愿者之间的个别乳酸菌菌种相对含量存在显著差异(P<0.05)。对样品中的优势乳酸菌和双歧杆菌进行Spearman相关性分析发现,乳酸菌和双歧杆菌彼此之间相关性较为密切,不同菌种间相关性不尽相同,与具体的菌种有关。【结论】首次采用PacBio SMRT测序技术在种的水平揭示了健康蒙古族人肠道中乳酸菌和双歧杆菌菌种多样性,为在种水平上解析肠道中乳酸菌和双歧杆菌多样性提供了新的研究思路和实施方案。 展开更多
关键词 肠道菌群 乳酸菌 双歧杆菌 特异性引物 单分子实时测序技术
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锡林郭勒牧场人畜肠道微生物及土壤微生物多样性的比较分析 被引量:2
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作者 王佼 王彦杰 +4 位作者 侯强川 徐海燕 孙志宏 张和平 孙天松 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期337-347,共11页
以内蒙古锡林郭勒镶黄旗呼日敦高勒嘎查牧场内牛、山羊、绵羊、马、人的粪便和土壤为研究对象,利用Pac Bio SMRT测序平台对细菌16S rRNA基因全长进行测序,运用生物信息学分析方法对人畜肠道微生物及土壤微生物多样性进行全面评估.结果发... 以内蒙古锡林郭勒镶黄旗呼日敦高勒嘎查牧场内牛、山羊、绵羊、马、人的粪便和土壤为研究对象,利用Pac Bio SMRT测序平台对细菌16S rRNA基因全长进行测序,运用生物信息学分析方法对人畜肠道微生物及土壤微生物多样性进行全面评估.结果发现,人畜肠道菌群均以厚壁菌门和拟杆菌门为优势菌门,而土壤以酸杆菌门和变形菌门为优势菌门.在属水平,人畜以梭菌属、拟杆菌属为优势菌属,而土壤以Blastocatella和芽孢杆菌属为优势菌属.在种水平人以Escherichia/Shigella dysenteriae和Streptococcus salivarius为优势菌种,而4种家畜的优势菌种均为Oscillibacter valericigenes和Eubacterium coprostanoligenes.土壤以Blastocatella fastidiosa和Bacillus longiquaesitum为优势菌种.比较各样品α多样性发现,人肠道微生物的多样性显著低于其他食草动物.通过主坐标和层次聚类分析发现可将6种样品分为:组1(人)、组2(马)、组3(绵羊、牛、山羊)和组4(土壤)4组.本研究对差异OTU进行比对分析探究了造成该分组的原因.因此本研究揭示了土壤、人和家畜肠道微生物组成和结构存在显著的差异,为进一步研究不同生境中微生物多样性提供数据参考. 展开更多
关键词 肠道微生物 土壤微生物 单分子实时测序 多样性 16S rRNA基因全长测序
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Effect of dietary interventions on the intestinal microbiota of Mongolian hosts 被引量:15
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作者 Jing Li Haiyan Xu +8 位作者 Zhihong Sun Qiangchuan Hou Lai-Yu Kwok Wuri Laga Yanjie Wang Huimin Ma Zhongjie Yu Bilige Menghe Heping Zhang 《Science Bulletin》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第20期1605-1614,共10页
The gut microbiota of Mongolian hosts has distinctive characteristics due to their meat- and dairyoriented daily diets and unique genotype.The aim of the present study was to investigate the effect of switching from t... The gut microbiota of Mongolian hosts has distinctive characteristics due to their meat- and dairyoriented daily diets and unique genotype.The aim of the present study was to investigate the effect of switching from the typical high protein and fat Mongolian diets to carbohydrate-rich meals composed principally of wheat,rice and naked oats on the host gut microbiota within 3 weeks.Our study took the advantage of the long sequence reads produced by the Pac Bio single molecule real-time sequencing technology to enable the profiling of subjects' gut microbiota communities along the diet intervention to the species precision.We found that the bacterial richness and diversity decreased apparently along the diet intervention.During the diet intervention,the gut microbiota composition displayed no significant difference at phylum level(with major phyla of Firmicutes,Bacteroidetes,Tenericutes and Proteobacteria).The relative abundances of some genera such as Bacteroidetes,Faecalibacterium,Roseburia,Alistipes,Streptococcus,and Oscillospira were significantly altered after the diet switching started.Notably,significant changes were also observed in the proportions of the species Bacteroides dorei,Bacteroides fragilis,Bacteroides thetaiotaomicron,Ruminococcus albus,Ruminococcus faecis,Roseburia faecis and Eubacterium ventriosum.These results have demonstrated that diet and host gut microbiota is closely linked. 展开更多
关键词 Gut microbiota Diet intervention MONGOLIAN Pac Bio single molecule real-time sequencing technology(smrt sequencing)
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单分子实时测序技术在环境微生物研究中的应用 被引量:7
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作者 韩迎亚 杨乔乔 +3 位作者 王倩楠 安贤惠 刘有华 李联泰 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期3140-3147,共8页
1975年,第一个cDNA的基因组--噬菌体фX174基因组的测序完成,标志着测序时代的开始。1996年以来人类基因组计划的发起极大地推动了测序技术的应用和发展,第二代测序技术也被称为高通量测序技术。而单分子DNA测序技术是最近10年内发展起... 1975年,第一个cDNA的基因组--噬菌体фX174基因组的测序完成,标志着测序时代的开始。1996年以来人类基因组计划的发起极大地推动了测序技术的应用和发展,第二代测序技术也被称为高通量测序技术。而单分子DNA测序技术是最近10年内发展起来的新一代的测序技术,称为第三代测序技术,其中包括单分子实时测序(Single molecule real time sequencing,SMRT)、真正单分子测序和单分子纳米孔测序等技术。SMRT测序技术有超长读长、测序周期短、不需要模板扩增和直接检测表观修饰位点等特点,为研究人员提供了新的选择。本文综述了SMRT测序技术的基本原理、性能以及它在微生物16S rRNA基因、微生物全基因组以及微生物宏基因组测序等方面的应用,并分析了SMRT测序技术在环境微生物应用中的优势以及存在的问题。 展开更多
关键词 Sanger测序法 smrt测序技术 基因组学 环境微生物
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