SMU.2055基因对变异链球菌UA159耐酸能力的影响

目的针对变异链球菌(S.mutans)UA159构建SMU.2055基因缺陷菌株,研究SMU.2055基因对S.mutans耐酸能力的影响。方法利用同源重组的方法,构建SMU.2055基因缺陷菌株。连续监测野生菌株和基因缺陷菌株在不同pH值环境中菌液的A600值,比较在不同pH值条件下的生长能力。将两种菌株转入一组pH值跨度为2.5~7.0的BHI培养基,厌氧培养3 h,观察其致死性pH值。加入过量的葡萄糖,检测两种菌株糖酵解能力。制备通透细胞,分别检测两种菌株的细胞通透性、质子通透性和H+-ATPase活性。激光共聚焦显微镜下观察两种菌株生物膜形成能力。结果与野生菌株相比,SMU.2055基因缺陷菌株早期生长活性、pH5.5时H+-ATPase活性、生物膜形成能力均明显下降,致死性pH值、质子通透性、细胞通透性均明显升高,糖酵解能力未见明显变化。结论 SMU.2055基因与S.mutans的耐酸性作用相关。SMU.2055基因缺陷菌株耐酸能力的降低与其致死性pH值、细胞通透性、质子通透性、H+-ATPase活性、生物膜的形成有关,与其糖酵解能力无关。对研究SMU.2055基因功能奠定基础。

变异链球菌UA159中SMU.2055基因在致龋性的作用

目的构建变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)SMU.2055基因缺陷菌株,确定SMU.2055基因对S.mutans形态及与致龋性相关的生物学特性的影响。方法利用同源重组的方法,构建SMU.2055基因缺陷菌株。在扫描电子显微镜及透射电子显微镜下观察野生菌株及基因缺陷菌株的形态结构。连续监测野生菌株及基因缺陷菌株的菌液A600值及p H值,比较其生长能力及产酸能力。对两种菌株进行酸适应后,分别进行酸冲击,评价其耐酸能力。结果经过聚合酶链反应及测序鉴定,变异链球菌SMU.2055基因缺陷菌株构建成功。扫描电子显微镜结果显示,与野生菌株相比,基因缺陷菌株菌体形态发生改变,菌体间不规则物质较少。透射电子显微镜下观察,基因缺陷菌株细胞膜较模糊,细胞膜完整性被破坏。基因缺陷菌株的生长能力及耐酸能力较野生菌株均有所下降,而基因缺陷菌株与野生菌株间的产酸能力未见明显差异。结论 SMU.2055基因与变异链球菌的形态、生长及耐酸能力密切相关,而对其产酸能力不造成明显影响。