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SND1作为肺腺癌癌基因和预后标志物的鉴定与分析
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作者 张芮豪 黄华 +7 位作者 朱光胜 吴迪 陈琛 曹培俊 丁晨 刘红雨 陈军 李永文 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期25-37,共13页
背景与目的 转录因子(transcription factor,TF)可以结合特异性序列,对下游基因起到促进或抑制的作用,对肿瘤的发生、迁移、侵袭等生物学过程都有重要的影响。葡萄球菌含核酸酶结构域l(Staphylococcal nuclease-containing structural d... 背景与目的 转录因子(transcription factor,TF)可以结合特异性序列,对下游基因起到促进或抑制的作用,对肿瘤的发生、迁移、侵袭等生物学过程都有重要的影响。葡萄球菌含核酸酶结构域l(Staphylococcal nuclease-containing structural domain 1,SND1)作为一种转录共激活因子,被认为是肿瘤治疗的一个潜在靶点。然而,其在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的表达及作用尚不清楚。本研究主要探索SND1作为LUAD癌基因在LUAD中的作用。方法 从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)、临床蛋白质组肿瘤分析联盟(Clinical Proteomic Tumor Analysis Consortium,CPTAC)和人类蛋白图库(Human Protein Atlas,HPA)等数据库获取数据,探讨SND1表达与LUAD患者预后、免疫细胞浸润和亚细胞定位的关系;利用EdU法、CCK-8法、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell实验、蛋白印迹实验等体外实验探讨SND1在LUAD中的功能作用。结果 在LUAD中SND1的表达上调,且与患者预后不良有关。SND1主要存在于LUAD细胞的细胞质中。富集分析表明SND1与细胞周期密切相关,包括DNA复制和染色体分离等。免疫细胞浸润分析显示,SND1与多种免疫细胞群有关,包括T细胞、B细胞、细胞毒性细胞和树突状细胞。体外研究表明沉默SND1可抑制LUAD细胞的增殖、侵袭和迁移,下调SND1可阻断G1期细胞周期进程。结论 SND1可能是LUAD重要的预后生物标志物,其可促进LUAD细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 snd1 肺肿瘤 细胞周期 免疫浸润
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SND1在食管鳞癌细胞中的表达及对食管癌细胞恶行生物学行为的影响
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作者 尹辉 吴剑 +3 位作者 胡智 黄山 闫群伦 戴天阳 《西部医学》 2024年第5期674-680,共7页
目的研究葡萄球菌核酸酶结构域蛋白1(SND1)基因在人食管鳞状细胞癌(ESCC)中表达水平的表达及对食管癌细胞恶行生物学行为的影响。方法qRT-PCR及Western blot检测SND1在ESCC细胞株中翻译和转录水平的改变。运用sh-SND1病毒载体构建出SND... 目的研究葡萄球菌核酸酶结构域蛋白1(SND1)基因在人食管鳞状细胞癌(ESCC)中表达水平的表达及对食管癌细胞恶行生物学行为的影响。方法qRT-PCR及Western blot检测SND1在ESCC细胞株中翻译和转录水平的改变。运用sh-SND1病毒载体构建出SND1稳定干扰的ESCC细胞株模型,利用克隆形成,Transwell小室及流式细胞术等细胞生物学手段研究SND1基因对ESCC细胞增殖和转移、凋亡的影响,运用动物实验研究SND1基因在体内对ESCC细胞的影响。结果qRT-PCR和Western blot的实验结果表明SND1在ESCC细胞中的转录和翻译水平高于人正常食管上皮细胞(HEEC);经过培养、染色、拍照和通过统计学分析细胞表型实验数据,结果显示干扰SND1基因表达可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力;干扰SND1的表达抑制体内食管癌细胞的增殖能力;化疗药物敏感实验结果显示SND1干扰组食管癌细胞对CPT的敏感性增加,细胞凋亡率明显升高。结论SND1在食管癌细胞中表达上调及促进食管癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 snd1 食管癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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人SND1基因慢病毒载体构建及稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株筛选 被引量:3
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作者 任媛媛 雷静 +4 位作者 赵然 辛灵彪 苏超 高星杰 杨洁 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第28期1-4,共4页
目的构建人SND1基因慢病毒载体,筛选稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株,为探讨SND1基因对卵巢癌的调控作用提供细胞系模型。方法采用PCR法从pCMV-FLAG-SND1质粒中扩增FLAG-SND1基因片段,连接到慢病毒载体表达质粒pLVX-IRES-Hyg中,... 目的构建人SND1基因慢病毒载体,筛选稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株,为探讨SND1基因对卵巢癌的调控作用提供细胞系模型。方法采用PCR法从pCMV-FLAG-SND1质粒中扩增FLAG-SND1基因片段,连接到慢病毒载体表达质粒pLVX-IRES-Hyg中,获得重组慢病毒载体pLVX-FLAG-SND1。以pLVX-FLAGSND1瞬时转染293T细胞48 h,采用Western blotting法检测SND1蛋白表达量。pLVX-FLAG-SND1重组质粒通过与包装质粒共转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。以慢病毒感染SKOV3细胞48 h,在细胞培养基中加入1μg/mL潮霉素B,筛选稳定表达SND1蛋白的细胞株,采用Western blotting法检测该细胞株内SND1蛋白表达量。结果重组慢病毒载体经双酶切和基因测序比对鉴定正确。重组慢病毒载体在瞬时转染的293T细胞中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。SKOV3细胞经慢病毒感染、药物筛选后获得的稳定表达株中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。结论成功构建了SND1基因慢病毒载体pLVXFLAG-SND1,并筛选出稳定表达SND1蛋白的SKOV3细胞株,为进一步明确卵巢癌发生、发展机制奠定了基础。 展开更多
关键词 snd1基因 慢病毒载体 SKOV3细胞 卵巢癌
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SND1对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:2
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作者 高学军 司雨 +3 位作者 张霞 黄玉玲 曲波 李庆章 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期78-82,共5页
SND1(p100)作为转录共激活子,在信号转导和转录激活因子5(STAT5)中起重要作用,已在牛以外的其他物种中报道SND1与STAT5相互作用激活STAT5基因介导基因转录。试验为验证SND1对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期影响,构建SND1表达载体及si ... SND1(p100)作为转录共激活子,在信号转导和转录激活因子5(STAT5)中起重要作用,已在牛以外的其他物种中报道SND1与STAT5相互作用激活STAT5基因介导基因转录。试验为验证SND1对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期影响,构建SND1表达载体及si RNA转染奶牛乳腺上皮细胞,用CASY法检测细胞活力及增殖能力,用流式细胞仪检测奶牛乳腺上皮细胞周期,Western Blot确定SND1转染奶牛乳腺上皮细胞功能。结果表明,SND1对于奶牛乳腺上皮细胞增殖属于正调控因子,SND1与STAT5相互作用影响CyclinD1表达,SND1通过CyclinD1途径促进细胞周期进行。 展开更多
关键词 snd1 奶牛乳腺上皮细胞 过表达 RNA干扰 细胞增殖
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SND1在膀胱癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 卢湧湧 陶利萍 +2 位作者 武志刚 张棋 蒋斌浩 《中国现代医生》 2020年第18期5-8,14,F0003,共6页
目的研究葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)在膀胱癌组织内的基因及蛋白表达,并探讨其临床意义。方法对GEO数据库进行深入挖掘,观察SND1基因在膀胱癌中的表达,并分析其与患者临床信息及预后的关系;收集115例膀胱癌患者的临床预后资料,免... 目的研究葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)在膀胱癌组织内的基因及蛋白表达,并探讨其临床意义。方法对GEO数据库进行深入挖掘,观察SND1基因在膀胱癌中的表达,并分析其与患者临床信息及预后的关系;收集115例膀胱癌患者的临床预后资料,免疫组化法检测癌组织内SND1蛋白的表达,分析患者的临床预后与SND1蛋白之间的关系。结果115例GSE31684数据集中膀胱癌组织中SND1表达升高,且与患者的肿瘤大小、肿瘤分期、组织学类型、淋巴结转移相关,SND1高表达患者的总生存率及无复发生存率均低于SND1低表达患者。结论在膀胱癌组织中SND1表达升高与患者预后不良相关,SND1可能是预测膀胱癌进程与预后的潜在分子标志物。 展开更多
关键词 snd1 膀胱癌 预后 总生存率 无复发生存率
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基于单片机AT89C51SND1C的MP3方案设计 被引量:1
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作者 张兢 李雪梅 +2 位作者 徐伟 侯旭东 吕和胜 《电子设计工程》 2010年第11期162-165,共4页
提出一种基于单片机AT89C51SND1C的MP3播放系统的设计方案。单片机集成了专用的解码器,使用K9F1208闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,存储文件通过播放器上的USB接口设备从PC机上直接下载,液晶显示采用LCD1602。方案设计简单,性价比... 提出一种基于单片机AT89C51SND1C的MP3播放系统的设计方案。单片机集成了专用的解码器,使用K9F1208闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,存储文件通过播放器上的USB接口设备从PC机上直接下载,液晶显示采用LCD1602。方案设计简单,性价比高,低功耗,易扩展。由于采用的是通用单片机实现的,可以很容易地移植到其他微控制器系统中,有很强的市场竞争能力和实用价值。 展开更多
关键词 MP3播放器 AT89C51snd1C 解码器 K9F1208
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Secure Digital Card及其与AT89C51SND1C的接口设计 被引量:2
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作者 杨明极 李媛 孙继禹 《信息技术》 2008年第3期118-120,共3页
针对单片机本身存储容量有限且急需扩展外存的问题,采用SD卡作为解决外存扩展的方案。为了利用微处理器实现读写SD卡的功能,依据串行外设接口协议SPI协议和SD卡的串行外设模式,研究了单片机的SPI接口与SD卡进行通信的问题,简要介绍了SD... 针对单片机本身存储容量有限且急需扩展外存的问题,采用SD卡作为解决外存扩展的方案。为了利用微处理器实现读写SD卡的功能,依据串行外设接口协议SPI协议和SD卡的串行外设模式,研究了单片机的SPI接口与SD卡进行通信的问题,简要介绍了SD卡及其SPI接口特点,给出了单片机AT89C51SND1C与SD卡的接口电路图,分析了SD卡的文件系统结构,并给出了其软件实现流程图,解决了嵌入式系统中大容量存取的问题。 展开更多
关键词 SD卡 SPI AT89C51snd1C
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AT89C51SND1C单片机的MP3播放器设计 被引量:3
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作者 徐阳 徐爱钧 《单片机与嵌入式系统应用》 2015年第10期65-67,共3页
首先分析了便携式MP3播放器的工作原理及其系统构成,接着介绍了一种基于51单片机的MP3播放器设计方案。采用AT89C51SND1C单片机,其片内集成了MP3解码器,使用K9F1208闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,音乐文件通过播放器上的USB接口... 首先分析了便携式MP3播放器的工作原理及其系统构成,接着介绍了一种基于51单片机的MP3播放器设计方案。采用AT89C51SND1C单片机,其片内集成了MP3解码器,使用K9F1208闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,音乐文件通过播放器上的USB接口从PC机上直接下载。该方案设计简单,性价比高、低功耗、易扩展。 展开更多
关键词 AT89C51snd1C MCU MP3
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基于AT89C51SND1C单片机的MP3音乐播放器设计 被引量:2
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作者 徐阳 《长江大学学报(自科版)(上旬)》 CAS 2015年第9期34-37,4,共4页
基于AT89C51SND1C单片机对MP3音乐播放器进行设计,单片机内部集成了MP3解码控制模块和USB控制模块,采用K9F2080闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,音乐文件通过播放器上的USB接口设备从PC机上直接下载,最终实现了MP3播放器最基本的... 基于AT89C51SND1C单片机对MP3音乐播放器进行设计,单片机内部集成了MP3解码控制模块和USB控制模块,采用K9F2080闪存作为外存储器,放音电路采用CS4330,音乐文件通过播放器上的USB接口设备从PC机上直接下载,最终实现了MP3播放器最基本的播放控制、音量控制、音效控制和显示功能。设计方案设计简单,性价比高,低功耗,易扩展。由于采用通用单片机实现设计方案,可以很容易地移植到其他微控制器系统中,因而具有很强的实用价值。 展开更多
关键词 AT89C51snd1 单片机 MP3
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针对人SND1基因两个AUG的细胞应激分析
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作者 高星杰 何津岩 +8 位作者 葛林 张毅 付雪 尹洁 张纬 史雪彬 苏征 姚智 杨洁 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第7期625-629,共5页
目的针对人SND1基因2个蛋白翻译起始密码子AUG构建真核表达质粒pCMV-N-Flag-SND1-No1/2,并分析2个AUG在SND1应激颗粒形成中的作用。方法以SND1全长转录本为模板,PCR法扩增含BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的目的基因SND1-No1/2,双酶切法分别酶... 目的针对人SND1基因2个蛋白翻译起始密码子AUG构建真核表达质粒pCMV-N-Flag-SND1-No1/2,并分析2个AUG在SND1应激颗粒形成中的作用。方法以SND1全长转录本为模板,PCR法扩增含BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的目的基因SND1-No1/2,双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pCMV-N-Flag,以T4-DNA连接酶将两者连接成pCMV-N-Flag-SND1-No1/2重组质粒,然后将构建的重组质粒转染入HeLa细胞内,以Western印迹法检测Flag标签(DYKDDDDK)与SND1-No1/2的融合表达,最后以细胞免疫荧光实验检测在氧化应激状态下Flag-SND1-No1/2融合蛋白与内源性SND1应激颗粒的胞内共定位情况。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误,Western印迹结果检测到融合蛋白Flag-SND1-No1/2的表达;细胞免疫荧光结果显示Flag-SND1-No1/2均可与内源性SND1应激颗粒共定位。结论重组pCMV-N-Flag-SND1-No1/2质粒构建成功,SND1基因第1个AUG的缺失并不影响SND1应激颗粒的形成。 展开更多
关键词 重组融合蛋白质类 应激 质粒 基因表达 snd1 应激颗粒 snd1
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SND1蛋白与HuR蛋白相互结合作用
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作者 高星杰 张毅 +7 位作者 宋娟 付雪 苏超 张桂敏 张春燕 于林 姚智 杨洁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期874-881,共8页
人源SND1(staphylococcal nuclease domain containing 1)蛋白由N端的SN(staphylococcal nucleases)结构域和C端的TSN(Tudor-SN5)结构域组成,其中SN结构域又包含SN1~SN4四个重复的功能片段.本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可... 人源SND1(staphylococcal nuclease domain containing 1)蛋白由N端的SN(staphylococcal nucleases)结构域和C端的TSN(Tudor-SN5)结构域组成,其中SN结构域又包含SN1~SN4四个重复的功能片段.本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可以通过SN结构域与G3BP(Ras-GAP SH3 domain-binding protein)蛋白相互结合,共同参与细胞应激颗粒(stress granules,SGs)的形成.SGs是真核细胞在受到氧化应激、病毒感染等外界刺激时在胞浆内形成的与RNA代谢相关的颗粒状结构.对于SGs的成分鉴定及相互作用的分析一直是学者们研究的热点.本研究中,免疫共沉淀实验结果表明,以抗SND1抗体可以共沉淀出HeLa细胞内另一个重要的应激相关人类抗原R(human antigen R,HuR)蛋白.另外,利用脂质体转染法将pcDNA3-FLAG-HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,成功过表达外源性的FLAG-HuR融合蛋白,再以抗FLAG标签抗体又可以反向共沉淀出内源性SND1蛋白,证明SND1与HuR之间存在蛋白质间的相互结合作用.细胞免疫荧光实验结果表明,当给予HeLa细胞0.5 mmol/L亚砷酸钠氧化应激时,SND1与HuR蛋白共同定位于胞浆中的SGs结构中.GST-pulldown实验结果进一步表明截短的SN结构域可以结合HuR蛋白,其中以SN1功能片段的结合能力最强,表明SND1蛋白是通过SN结构域与HuR蛋白形成应激复合物,参与SGs的胞浆组装.并不定位于SGs的TSN结构域亦可结合HuR蛋白,提示SND1-HuR的蛋白相互作用可能并不局限于SGs,具有其它方面的功能意义. 展开更多
关键词 snd1蛋白 HuR蛋白 应激颗粒 免疫共沉淀 结构域
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基于嵌入式器件AT89C51SND1C的电子治疗仪设计 被引量:1
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作者 马彧 《国外电子元器件》 2008年第6期68-70,73,共4页
通过对目前市场上电子治疗仪的分析,在研究其电子治疗仪工作原理及AT89C51SND1C的基础上,提出了一种基于嵌入式器件AT89C51SND1C的电子治疗仪设计方案,利用嵌入式器件89C51SND1C的MP3功能,产生中频信号与音频信号,并将二者进行调制,通... 通过对目前市场上电子治疗仪的分析,在研究其电子治疗仪工作原理及AT89C51SND1C的基础上,提出了一种基于嵌入式器件AT89C51SND1C的电子治疗仪设计方案,利用嵌入式器件89C51SND1C的MP3功能,产生中频信号与音频信号,并将二者进行调制,通过放大、变压器隔离,输出到电极片上。通过电极片对人体治疗部位的覆盖,使人体感知随音乐信号起伏变化的电流刺激,引起肌肉收缩和舒张,以缓解疲劳和治疗周围神经损伤。 展开更多
关键词 单片机 电子治疗仪 嵌入式 AT89C51snd1C 海量存储器
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水牛SND1基因克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 黄韵琪 邓廷贤 +7 位作者 唐辉 马小娅 梁莎莎 陆杏蓉 段安琴 王文文 庞春英 梁贤威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1759-1767,共9页
试验旨在利用电子克隆法对水牛SND1(staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1)基因进行克隆和序列分析,为探究该基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛SND1基因(GenBank登录号:NM_205784.1)作为种子序列,利用Pri... 试验旨在利用电子克隆法对水牛SND1(staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1)基因进行克隆和序列分析,为探究该基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛SND1基因(GenBank登录号:NM_205784.1)作为种子序列,利用Primer Premier 5.0设计3对引物,以水牛基因组DNA为模板,PCR扩增水牛SND1基因mRNA序列,扩增获得序列连接pMD18-T载体,通过测序拼接获得水牛SND1基因mRNA全序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,水牛SND1基因完整编码序列长为3 503bp,包含长为2 733bp CDS序列,编码910个氨基酸,蛋白分子式为C4523H7183N1281O1354S26,分子质量为102.01ku,理论等电点(pI)为6.74,不稳定系数为42.07,平均亲水性为-0.419,属可溶酸性蛋白。二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,其中α-螺旋占37.80%,无规则卷曲占34.18%。结合Protfun 2.2在线软件对SND1的功能进行预测分析表明,该蛋白在嘌呤和嘧啶、中央中间代谢、能量代谢、氨基酸生物合成发挥功能的可能性分别为0.449、0.401、0.303和0.262。SND1基因编码区序列与黄牛、绵羊、山羊、猪、马、人的同源性分别为98.7%、97.8%、97.8%、93.8%、93.1%和91.7%,物种之间同源性较高,系统进化情况与其亲缘关系远近一致。利用SMART在线软件预测蛋白结构域,结果显示,水牛SND1蛋白包含有4个SN区域,说明SND1基因编码区在进化过程中较为保守。 展开更多
关键词 水牛 snd1基因 生物信息学分析
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SND1低表达宫颈癌CasKi细胞稳定株的构建及其生物学功能变化 被引量:1
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作者 孟浩 付晓 +4 位作者 张春燕 辛灵彪 任媛媛 杨洁 何津岩 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第21期1-4,共4页
目的构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响。方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-p LKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)... 目的构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响。方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-p LKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)慢病毒液,用嘌呤霉素筛选CasKi细胞稳定株。分别用Western blotting技术、RT-PCR技术检测CasKi细胞内SND1蛋白、mRNA表达,确认转染效率。用CCK-8法检测CasKi细胞增殖活力(OD_(450)值),用细胞划痕实验检测CasKi细胞相对迁移距离。结果空白对照组细胞全部死亡,阴性对照组及干扰1~4组细胞部分存活,证明细胞稳定株转染构建成功。干扰1~4组SND1蛋白、mRNA相对表达量与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05;干扰3、4组与其他组比较,P均<0.05。干扰3、4组OD_(450)值、相对迁移距离与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05。结论成功构建了SND1低表达的CasKi细胞稳定株;SND1低表达的CasKi细胞增殖和迁移能力降低。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 snd1蛋白 CASKI细胞 细胞增殖 细胞迁移
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牦牛SND1基因特征序列分析及其蛋白在乳腺的表达 被引量:1
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作者 田奎丽 潘阳阳 +2 位作者 李月琴 崔燕 余四九 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期207-214,共8页
Staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1(SND1,Tudor-SN)是一种参与基因调控的转录共激活因子蛋白,本研究意在克隆牦牛泌乳相关基因SND1,分析其生物学特性,研究其蛋白在乳腺的表达。采集牦牛泌乳期乳腺组织,胰蛋白酶消... Staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1(SND1,Tudor-SN)是一种参与基因调控的转录共激活因子蛋白,本研究意在克隆牦牛泌乳相关基因SND1,分析其生物学特性,研究其蛋白在乳腺的表达。采集牦牛泌乳期乳腺组织,胰蛋白酶消化法得到原代乳腺上皮细胞,纯化到3代,采用RT-PCR扩增克隆SND1基因,测序并拼接,用相关生物信息软件分析牦牛SND1基因特性;用免疫组织化学和免疫荧光技术对牦牛SND1基因编码蛋白进行定位分析。获得如下结果:牦牛SND1基因全序列为3 294 bp,含有2 733 bp的ORF,共包含20种氨基酸。SND1基因编码蛋白为非分泌蛋白,非跨膜蛋白;同源性分析显示,牦牛SND1基因与野牛、家牛、藏羚羊、山羊、猪、野骆驼、马、黑猩猩、人、褐家鼠的同源性分别为99%、98%、96%、94%、91%、90%、90%、89%、89%、85%;系统进化树表明牦牛与野牛和家牛的进化水平较近,与人和鼠的进化水平较远。免疫组织化学染色结果显示,SND1蛋白在分泌上皮细胞(乳腺上皮细胞)和导管上皮细胞呈阳性高表达,在肌上皮细胞呈弱表达。免疫荧光显示,SND1蛋白在乳腺上皮细胞胞核高表达,胞质弱表达。上述研究结果为进一步探究SND1对牦牛泌乳机能的调节提供了相关依据,也为高寒哺乳动物的研究提供了参考资料。 展开更多
关键词 牦牛 snd1 乳腺上皮细胞 生物学特性 表达
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利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统构建HeLa细胞SND1基因敲除稳定株 被引量:2
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作者 刘郁莹 崔晓腾 +5 位作者 高星杰 赵秀娟 付雪 葛林 苏超 杨洁 《天津医科大学学报》 2015年第6期480-483,共4页
目的:利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除He La细胞中SND1基因,构建He La细胞SND1基因敲除稳定株。方法:设计一对特异性识别SND1基因第二个启动子的上下游sg RNA,以PX462质粒为载体,构建出一对重组真核表达质粒。酶切和测序鉴定后,... 目的:利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除He La细胞中SND1基因,构建He La细胞SND1基因敲除稳定株。方法:设计一对特异性识别SND1基因第二个启动子的上下游sg RNA,以PX462质粒为载体,构建出一对重组真核表达质粒。酶切和测序鉴定后,将一对重组质粒共同转染进入He La细胞中,使用嘌呤霉素进行阳性细胞筛选,挑取单克隆细胞进行培养。最后用Western Blot鉴定敲除效果。结果:sg RNA正确插入到PX462质粒载体中,转染并筛选单克隆后的细胞中没有SND1蛋白的表达。结论:成功构建出He La细胞SND1基因敲除稳定株。 展开更多
关键词 snd1 基因敲除 CRISPR/Cas9 HELA细胞
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卵巢癌细胞系OVCAR3过表达SND1稳定株的构建 被引量:1
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作者 杨扬 白虹 辛灵彪 《天津医科大学学报》 2018年第1期7-9,13,共4页
目的:通过慢病毒载体构建过表达SND1的OVCAR3稳定的表达株。方法:重组的pLVX-FLAG-SND1表达载体与包装质粒共同转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。病毒感染的OVCAR3细胞经Hygromycin B筛选出稳定表达株。用Western blot方法... 目的:通过慢病毒载体构建过表达SND1的OVCAR3稳定的表达株。方法:重组的pLVX-FLAG-SND1表达载体与包装质粒共同转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。病毒感染的OVCAR3细胞经Hygromycin B筛选出稳定表达株。用Western blot方法检测SND1蛋白表达。结果:用病毒感染OVCAR3细胞,药物筛选后获得的过表达稳定株中SND1蛋白表达水平明显增高。结论:利用慢病毒表达载体pLVX-FLAG-SND1成功感染并筛选出稳定表达SND1的OVCAR3细胞株,为进一步研究SND1在卵巢癌中的作用提供了体外细胞系模型。 展开更多
关键词 snd1 慢病毒载体 OVCAR3细胞 卵巢癌
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lncRNA SND1-IT1靶向miR-185-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究 被引量:4
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作者 艾合买提江·艾海提 谢有强 陈智全 《河北医药》 CAS 2021年第11期1635-1639,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)葡萄球菌核酸酶结构域包含蛋白1内含子转录本1(SND1-IT1)靶向miR-185-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人胃黏膜上皮正常细胞和胃癌细胞中lnc SND1-IT1和miR-185-5... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)葡萄球菌核酸酶结构域包含蛋白1内含子转录本1(SND1-IT1)靶向miR-185-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人胃黏膜上皮正常细胞和胃癌细胞中lnc SND1-IT1和miR-185-5p的表达。将胃癌细胞AGS分为对照组、si-con、si-lnc SND1-IT1、miR-con、miR-185-5p、si-lnc SND1-IT1+anti-miR-con和si-lnc SND1-IT1+anti-miR-185-5p组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测AGS细胞增殖活力;Transwell实验检测AGS细胞迁移和侵袭能力;蛋白质印记(Western Blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证lnc SND1-IT1对miR-185-5p的靶向作用。结果胃癌细胞中lnc SND1-IT1表达升高,miR-185-5p表达降低(P<0.05)。沉默lnc SND1-IT1或过表达miR-185-5p后,AGS细胞中CyclinD1、CDK2、MMP-2和MMP-9表达降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。与沉默lnc SND1-IT1比较,同时沉默lnc SND1-IT1和miR-185-5p后AGS细胞中CyclinD1、CDK2、MMP-2和MMP-9表达升高,细胞增殖、迁移和侵袭能力升高(P<0.05)。lnc SND1-IT1靶向miR-185-5p并负调控miR-185-5p表达。结论沉默lncRNA SND1-IT1通过靶向miR-185-5p抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 snd1-IT1 miR-185-5p 胃癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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Dual role of MdSND1 in the biosynthesis of lignin and in signal transduction in response to salt and osmotic stress in apple 被引量:3
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作者 Keqin Chen Yunna Guo +4 位作者 Mengru Song Lifu Liu Hao Xue Hongyan Dai Zhihong Zhang 《Horticulture Research》 SCIE 2020年第1期283-295,共13页
Clarifying the stress signal transduction pathway would be helpful for understanding the abiotic stress resistance mechanism in apple(Malus×domestica Borkh.)and could assist in the development of new varieties wi... Clarifying the stress signal transduction pathway would be helpful for understanding the abiotic stress resistance mechanism in apple(Malus×domestica Borkh.)and could assist in the development of new varieties with high stress tolerance by genetic engineering.The key NAC transcription factor SND1,which is involved in the lignin biosynthesis process in apple,was functionally analyzed.The results of the stress treatments indicated that MdSND1 could be induced by salt,mannitol and ABA.Compared with wild-type GL-3 plants,MdSND1-overexpressing apple plants with greater antioxidant capacity and lignin were more resistant to salt and simulated osmotic stress,while RNAi plants were more vulnerable.Additionally,molecular experiments confirmed that MdSND1 could regulate the biosynthesis of lignin by activating the transcription of MdMYB46/83.Moreover,genes known to be involved in the stress signal transduction pathway(MdAREB1A,MdAREB1B,MdDREB2A,MdRD29A,and MdRD22)were screened for their close correlations with the expression of MdSND1 and the response to salt and osmotic stress.Multiple verification tests further demonstrated that MdSND1 could directly bind to these gene promoters and activate their transcription.The above results revealed that MdSND1 is directly involved in the regulation of lignin biosynthesis and the signal transduction pathway involved in the response to both salt and osmotic stress in apple. 展开更多
关键词 snd1 stress MANNITOL
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Isolation and characterization of the secondary wall-related SND1 gene in hawthorn 被引量:1
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作者 CHEN Ke-qin GUO Yun-na +2 位作者 SONG Meng-ru DAI Hong-yan ZHANG Zhi-hong 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第9期2007-2014,共8页
Secondary wall-associated NAC domain protein1 (SND1) is a key regulator directly regulating the expression levels of MYB46 and MYB83 in the regulation network for secondary wall synthesis, especially in plant fibres... Secondary wall-associated NAC domain protein1 (SND1) is a key regulator directly regulating the expression levels of MYB46 and MYB83 in the regulation network for secondary wall synthesis, especially in plant fibres. In this study, a SND1 gene was isolated from hawthorn (Crataegus pinnatifida) and named as CpSND 1 because it has a conservative N-terminal DNA- binding domain with AtSNDI. Arabidopsis plants overexpressing CpSND1 had similar phenotypes as plants overexpressing AtSND1, including inhibited growth, upward-curling leaves, sepal dysplasia and sterility. In addition, overexpressing CpSNDI in Arabidopsis also induced the expression of downstream genes, including lignin, cellulose and xylan biosynthesis genes as well as MYB genes. Our results provided functional information of CpSND1 for future genetic engineering in hawthorn. 展开更多
关键词 HAWTHORN transcription factor snd1 secondary cell wall transcriptional regulation
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