SNF1A转基因果蝇的构建

将质粒GH12596中的果蝇SNF1AcDNA用PCR方法扩增,并与pEGFP N2质粒中的荧光蛋白GFP编码序列连接入果蝇转基因载体pUAST上,构建了UAS SNF1A GFP质粒.转入果蝇细胞内,利用mini white标记基因筛选,得到3个独立的转基因果蝇品系.将这些转基因果蝇品系分别定位平衡,并用单果蝇PCR方法加以佐证.然后将转基因品系分别与eyGAL4,actin GAL4,pGMR GAL4等3个GAL4果蝇品系交配,在荧光显微镜下检测到该基因在果蝇中的表达.从而确认了用显微注射技术能够得到稳定的转基因果蝇模型,为开展用果蝇GAL4 UAS系统大规模研究基因功能奠定了基础.