SNI大鼠模型诱发的早期病理性疼痛相关基因芯片数据的生物信息学分析

为了探讨坐骨神经分支选择性结扎(spared nerve injury, SNI)诱发的神经病理性疼痛早期的基因表达和生物学过程的改变,为神经病理性疼痛分子机制的进一步研究提供生物信息学依据,从GEO数据库下载已有文献构建的SNI早期大鼠模型的基因芯片数据集,应用生物信息学方法筛选差异表达基因,并利用DAVID进行基因本体论(Gene Ontology, GO)及通路富集分析,然后通过STRING数据库分析蛋白质互作网络的中心节点蛋白质。应用生物信息学方法对SNI芯片数据重新进行挖掘,从基因水平探讨SNI模型大鼠诱发的早期神经病理性疼痛发生发展的分子机制,可为SNI诱发早期神经病理性疼痛的发生及维持期的分子机制研究提供参考和依据。分析结果显示细胞外基质和离子通道活性的改变对SNI诱发大鼠早期神经病理性疼痛的发生发展起着关键性的作用,表明细胞外基质受体交互通路和MAPK通路与SNI诱发大鼠早期神经病理性疼痛密切相关,相关的分子机制值得进一步深入研究。

白介素2在小鼠分支选择损伤神经源性疼痛模型中的镇痛作用

目的研究白介素2(IL-2)在小鼠分支选择损伤(SNI)神经痛模型中的镇痛作用。方法制作小鼠SNI模型成功后,用Von Frey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IL-2的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断。结果(1)IL-2的镇痛作用在给药后30min出现,75min时消失,105min后又再次出现,可维持24h以上。(2)纳洛酮可以完全阻断IL-2的镇痛作用。结论(1)IL-2在小鼠SNI模型中具有镇痛作用,且镇痛作用呈双峰现象,持续时间较长。(2)IL-2的镇痛作用可能通过阿片受体传导。

TNF-α在神经病理性疼痛模型大鼠脑组织中的表达和作用

目的:通过研究保留性神经损伤(SNI)模型大鼠脑组织中TNF-α的表达情况,从而探讨TNF-α在神经病理性疼痛维持中的中枢可能机制。方法:建立SNI大鼠模型,取脑组织进行连续冰冻切片,通过免疫组织化学技术观察TNF-α在不同脑区和核团的表达情况。结果:在SNI模型大鼠的红核区域和内侧纵束间质核部位,TNF-α阳性细胞数和平均灰度值明显高于对照组,P<0.05。结论:红核以及内侧纵束间质核在神经病理性疼痛的发生和维持以及调控过程中发挥重要作用,而TNF-α是其发挥痛觉调控的主要免疫分子之一。

脉冲射频对坐骨神经分支损伤模型大鼠脊髓神经元凋亡的影响

目的:探讨脉冲射频(pulsed radiofrequency,PRF)对坐骨神经分支损伤(spared nerve injury,SNI)模型大鼠脊髓神经元凋亡的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):空白对照组(C组)、模型组(SNI组)、假治疗组(Sham组)和治疗组(PRF组)。于制模前0天,制模后1、4、7、10天,PRF治疗后6、12、24、36、48天分别测定4组大鼠机械缩足阈值(pain mechanical withdrawal threshold,PMWT);在PRF治疗前0天、治疗48天后分别处死每组大鼠4只,提取L4—L6节段脊髓,采用蛋白印记(Western Blot)技术检测bcl-2、caspase-3表达情况,TUNEL法检测脊髓组织凋亡细胞数。结果:(1)坐骨神经分支损伤术后,SNI组、Sham组和PRF组大鼠的PMWT较C组显著降低(P<0.01);(2)经PRF治疗后,PRF组大鼠的PMWT可显著提高(P<0.05);(3)随着PMWT提高,PRF组bcl-2蛋白表达量显著增加,caspase-3蛋白表达量显著降低(P<0.05),而脊髓组织细胞凋亡数量显著下降(P<0.05)。结论:PRF可能通过抑制脊髓神经细胞凋亡对SNI模型大鼠产生良好的镇痛作用。

脉冲射频对保留性神经损伤大鼠Nav1.8 mRNA表达的影响

目的:通过观察保留性神经损伤(spared nerve injury,SNI)模型大鼠接受脉冲射频(pulsed Tadiofrequency,PRF)治疗后疼痛行为学和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)电压门控钠离子通道1.8(Nav1.8)m RNA的表达水平,探讨PRF治疗神经病理性疼痛的可能机制。方法:选择SD大鼠32只,随机均分成4组:空白对照组(C组)、模型组(SNI组)、假治疗组(Sham组)和治疗组(PRF组)。于制模前0天,制模后4、6、8、10天,PRF治疗后6、12、18、24、30、36、42天测定四组大鼠机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT);在PRF治疗6天后每组各处死2只大鼠,42天后每组处死剩余大鼠,取其腰4、5的背根神经节,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析各组大鼠背根神经节Nav1.8 m RNA的表达情况。结果:SNI术后,SNI组、Sham组和PRF组大鼠的MWT较C组显著降低(P<0.01);PRF治疗后,PRF组大鼠的MWT及大鼠背根神经节Nav1.8 m RNA相对表达量显著高于SNI组和Sham组(P<0.01)。结论:PRF治疗对SNI神经病理性疼痛大鼠具有镇痛作用,Nav1.8可能是PRF发挥镇痛作用的一个关键靶点。