miR-218调控SNX4蛋白对急性淋巴E6-1细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨miR-218调控SNX4蛋白对白血病细胞增殖和侵袭的作用及其机制。方法 qPCR检测不同急性淋巴细胞白血病细胞株中miR-218的表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-218与SNX4之间的相互调控作用;细胞增殖实验检测miR-218的表达对E6-1细胞增殖能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-218的表达对E6-1细胞侵袭能力的影响。结果与HuT78,BV173,K562和CCRF-CEM细胞株比较,E6-1细胞株中miR-218表达水平明显降低;miR-218能与SNX4的3'UTR特异性结合,可以调控SNX4的表达活性;过表达miR-218后可以抑制E6-1细胞的增殖行为和侵袭行为。结论过表达miR-218可以通过调控SNX4的表达抑制E6-1细胞的增殖和侵袭。

miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:q PCR检测乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中miR-218的表达情况;分析miR-218的表达和乳腺癌临床病理参数之间的关系;双荧光素酶实验检测miR-218和SNX4之间的关系;过表达miR-218后MTT实验和侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖和侵袭能力变化;过表达SNX4后MTT实验和侵袭实验检测SNX4对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的恢复水平;裸鼠体外成瘤实验检测miR-218对乳腺癌细胞株成瘤能力的影响。结果:miR-218在乳腺癌组织和MCF-7细胞株中表达水平较高,miR-218的表达与乳腺癌的病理分期相关以及淋巴结转移情况有关,SNX4可能是miR-218下游的作用靶点;过表达miR-21可以抑制乳腺癌细胞的增殖侵袭能力,过表达SNX4后可以逆转miR-218对乳腺癌细胞的抑制作用,过表达miR-218后可以抑制乳腺癌细胞株在裸鼠体内的成瘤能力。结论:miR-218在乳腺癌中表达上调,同时miR-218可以调控SNX4的表达而影响乳腺癌细胞增殖和侵袭能力。

分选蛋白SNX4在小鼠睾丸中的表达和定位研究

目的明确分选连接蛋白4(SNX4)在小鼠睾丸中的表达规律及其可能参与的内体分选功能。方法利用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测小鼠睾丸中SNX家族23个家族成员的mRNA的表达差异。利用Real-time PCR技术检测小鼠肝、脾、肾、脑和睾丸的mRNA的表达差异。利用免疫组织化学和免疫荧光染色的方法,检测SNX4和大鼠肉瘤(Ras)蛋白超家族成员中的Rab家族成员之一Rab5在睾丸及支持细胞中的定位。结果在小鼠的睾丸中SNX4的相对表达量可达到肝脏的约(15.49±4.92)倍(P<0.01);在睾丸中,SNX家族中的23个家族成员中,SNX1和SNX4的相对表达量较高。SNX4在睾丸支持细胞(sertoli cells)表达,并且与早期内体的标志物Rab5具有共定位的特性。结论SNX4在小鼠睾丸sertoli cells高表达并且和Rab5共定位,SNX4的蛋白分布提示其可能参与了sertoli cells中内体的运输和分选过程。