藜麦SOD家族基因的鉴定及其对混合盐碱胁迫的响应

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是植物抗氧化系统的关键酶,在保护植物免受生物和非生物胁迫方面发挥重要作用。以拟南芥SOD为基础,通过序列比对在藜麦基因组中鉴定出12个SOD基因,分别定位于细胞核、微体及线粒体,在11条染色体上不均匀分布,其编码蛋白质三级结构显示Cu/Zn-SODs与Fe-SODs为同源二聚体,Mn-SODs为同源四聚体。CqSOD基因内含子/外显子分布模式不尽相同,内含子数介于4~7个,保守基序差异明显。系统发育关系显示,SOD蛋白可分为Cu/Zn-SODs、Fe-SODs及Mn-SODs 3个亚族。此外,所有的CqFe-SODs及CqMn-SODs启动子区都含有脱落酸激素反应顺式元件,CqSOD12与11个CqSOD蛋白及4个CqCAT蛋白存在相互作用。表达谱分析表明,12个CqSOD基因对混合盐碱及硝普钠均有较强响应。研究结果为SOD基因在植物发育和胁迫响应中的作用及分子机制研究奠定基础。

刺梨SOD基因家族鉴定与表达模式分析

【目的】超氧化物歧化酶(SOD)是植物体内氧自由基的天然清除剂,对于保护植物免受环境胁迫起着关键作用,了解其在刺梨响应干旱胁迫中的作用,为深入研究刺梨SOD基因家族的功能提供基础。【方法】通过生物信息学对刺梨SOD基因家族进行系统鉴定和分析,对其理化性质、染色体位置、基因结构、亚家族进化、顺式作用元件和WGCNA进行全面分析,并利用RT-qPCR分析刺梨SOD基因家族在干旱胁迫下的表达模式。【结果】刺梨SOD基因家族有9个成员,包括4个Cu/ZnSOD基因、3个MnSOD基因和2个FeSOD基因,分布在5条染色体上。基因结构显示,同一亚家族成员的基序组成较为相似,但内含子/外显子排列和数量差异较大。亚家族进化分析发现,MnSOD亚家族较原始,其在所有蛋白质位置都表现出高度保守性,其次是FeSOD和Cu/ZnSOD,Cu/ZnSOD亚家族各序列之间差异较大,又可以分为3个亚类。顺式作用元件分析显示,该家族基因参与多种植物激素、生长发育以及胁迫响应,特别是RrCSD2启动子区含有类黄酮生物合成元件(MBSI)。进一步通过转录组和WGCNA分析发现,RrCSD2所在模块的基因显著富集到黄酮和黄酮醇生物合成、类黄酮生物合成和花生四烯酸代谢等途径,表明RrCSD2可能参与类黄酮代谢过程。RT-qPCR结果显示,在干旱胁迫下,除RrMSD1和RrMSD2的表达水平显著下降外,其余7个基因的表达水平总体呈现上升趋势,特别是RrCSD2和RrCSD3的表达水平显著上调。【结论】刺梨SOD基因在干旱胁迫中起到重要作用。

携带SOD1-p.A5S突变的1例肌萎缩侧索硬化患者病例报道及相关文献分析

目的肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种进行性和致命的神经退行性疾病。目前认为Cu/Zn超氧化物歧化酶1基因(Cu/Zn superoxide dismutase gene 1,SOD1)突变是导致家族性ALS的原因之一,对可疑ALS家族史的患者进行SOD1基因测序可能有帮助。本文首次报道中国籍汉族SOD1-p.A5S突变的肌萎缩侧索硬化1例,并总结其临床特征。方法与结果首次报道中国籍汉族SOD1-p.A5S突变的1例ALS临床患者并复习相关病例文献,总结其临床特征。研究病例为男性,34岁,以“双下肢无力2年,加重伴双手无力半年”之主诉入住西安交通大学第一附属医院神经内科,主要临床表现为逐渐进展的四肢无力,无吞咽困难,无认知功能障碍。入院后进一步完善常规检查及肌电图等排除其他诊断,并行基因检测。结合患者典型的临床表现和肌电图提示颈髓、胸髓和腰髓三个区域存在下运动神经元受累的证据,合理排除其他诊断及特征性基因检测结果,诊断为ALS。基因检测结果提示患者存在SOD1一号外显子c.13G>T(p.A5S)杂合突变,其母有可疑病史但已死亡未进行基因验证。出院后随访截至2022年8月21日,随访时间共38个月,病程62个月。进一步查阅文献报道的同一位点突变的其他患者的临床特点,总结发现本例突变患者与其他文献报道同一位点突变患者进展较慢。结论基因测序是诊断家族性ALS的有利工具。SOD1一号外显子c.13G>T(p.A5S)突变为罕见的致病性变异,该亚型患者进展较慢,进一步说明基因检测在ALS的诊断和预后判定中具有重要价值。

scAAV9-IGF-1对SOD1-G93A小鼠抗凋亡通路的作用

目的 探索以自我互补双链腺相关病毒9为载体介导的人胰岛素样生长因子-1 (scAAV9-IGF-1)对SOD1-G93A转基因小鼠抗凋亡通路的作用。方法 采用肌萎缩侧索硬化(ALS)的动物模型即转基因SOD1-G93A突变型及野生型(wild type-SOD1,WT-SOD1)小鼠,在其出生后60 d龄时,雌性同窝阳性SOD1-G93A转基因小鼠采用随机的方法分配到治疗组及溶剂对照组,治疗组全身多点肌肉注射scAAV9-IGF-1,溶剂对照组多点肌肉注射AAV9-GFP,同年龄WT-SOD1作为阴性对照组。在肌肉注射40~50 d后,利用PCR技术检测腰髓中IGF-1含量的变化,同时检测抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2的mRNA含量变化,通过免疫组化染色观察抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达。结果 PCR技术检测显示scAAV9-IGF-1处理后,腰髓中IGF-1的mRNA含量显著高于GFP对照组,抗凋亡通路因子Bclxl、Bcl-2的mRNA含量均高于溶剂对照组(均P<0.05),而与WT组差异无统计学意义。免疫组化染色结果显示,治疗组中抗凋亡通路蛋白Bcl-xl,Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达多于溶剂对照组,并且与WT阴性对照组相当。结论 scAAV9-IGF-1可以激活SOD1-G93A转基因小鼠模型中的抗凋亡通路,其通过上调Bcl-xl,Bcl-2的mRNA水平,进而增加Bcl-xl、Bcl-2的蛋白表达,从而产生抗凋亡的作用。

黄芪续命汤对阿尔兹海默症脾肾亏虚型患者NE、Hs-CRP、SOD及生活能力的影响

【目的】探讨黄芪续命汤对阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)脾肾亏虚型患者的治疗效果及其可能的作用机制。【方法】将134例AD脾肾亏虚型患者随机分为观察组和对照组,每组各67例。对照组给予西医常规治疗,观察组在对照组的基础上联合黄芪续命汤治疗,疗程为12周。观察2组患者治疗前后中医证候积分、简易精神状态量表(MMSE)评分、阿尔兹海默症评定量表(ADAS-Cog)评分及血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、脑源性神经营养因子(BDNF)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素6(IL-6)、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)水平的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗12周后,观察组的总有效率为89.55%(60/67),对照组为71.64%(48/67),组间比较(χ^(2)检验),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的MMSE评分均较治疗前升高(P<0.05),中医证候积分和ADAS-Cog评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对MMSE评分的升高幅度及对中医证候积分和ADAS-Cog评分的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者的血清5-HT、NE、BDNF、SOD水平均较治疗前升高(P<0.05),血清IL-6、Hs-CRP水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对血清5-HT、NE、BDNF、SOD水平的升高幅度及对血清IL-6、Hs-CRP水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。【结论】针对AD脾肾亏虚型患者,在西医常规治疗基础上联合黄芪续命汤治疗,有助于减轻炎症反应,调节氧化应激失衡,促进患者生活能力改善,提高临床疗效。

hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白的制备、穿膜效应及其抗氧化、抗炎症功效

目的 探究人源性细胞膜穿透肽hPP10携带人源性抗氧化蛋白Cu,Zn-SOD的穿膜效应并观察其抗氧化、抗炎功效。方法利用RT-PCR技术扩增人源性SOD基因片段、酶切连接法构建重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD;利用镍柱亲和层析法、分子筛方法纯化Cu,Zn-SOD、hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白并利用Western blotting法鉴定其正确性;利用免疫荧光法、荧光共定位实验、Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD在细胞中的穿膜效应;利用Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白穿膜时间梯度和浓度梯度效应;利用SOD酶活性测定试剂盒检测hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后的SOD酶活性;利用MTT法检测hPP10对细胞活性的影响。利用H2O2建立HEK293氧化应激细胞模型,通过流式细胞分析术(FCM)分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后细胞凋亡情况;并RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后凋亡相关因子的表达情况;通过ROS检测分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后抗氧化能力。TPA诱导建立小鼠耳部炎症模型(5只/组,共4组),然后RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后,NFκB,IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录情况;Western blotting检测NFκB p65、p-NFκB p65、IL-1β、TNFα基因的表达;免疫组化分析炎性因子p-NFκB p65、TNFα基因的表达。结果 成功构建了重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD,并获得Cu,Zn-SOD蛋白和hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白;免疫荧光试验结果表明5μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD转导HEK293细胞具有明显的穿膜效应;荧光共定位实验显示融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD入胞后定位在细胞膜内,部分蛋白定位在细胞核内;Western blotting实验结果表明hPP10-Cu,Zn-SOD转导Hela(P<0.05),HEK293(P<0.01)细胞具有浓度依赖性,细胞内hPP10-Cu,Zn-SOD存在可持续24 h;5μmol/L的hPP10-Cu,Zn-SOD转导细胞具有较好的抗氧化活性(P<0.01);MTT结果显示高达10μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD对于细胞活力的影响小。在氧化应激模型中,FCM结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞降低了细胞的早期凋亡(P<0.01)和晚期凋亡(P<0.05);RT-qPCR结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞使Bcl2、Mcl1、Deptor等抗凋亡因子升高(P<0.05),降低了Bad、P21、P27等促凋亡因子的表达(P<0.05);ROS结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞显著降低了细胞内的活性氧含量(P<0.01)。在炎症模型中,hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白可显著降低IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录(P<0.05);p-NFκB p65、IL-1β及TNFα的表达都呈现了抑制作用(P<0.05);hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白处理组较Cu,Zn-SOD蛋白处理组,降低了炎性因子p-NFκB p65及TNFα基因的表达(P<0.05)。结论 融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD具有明显的穿膜入胞、抗氧化、抗炎功效,且对细胞毒副作用很小。这些结果为hPP10作为新的递送载体奠定基础,也为hPP10-Cu,Zn-SOD应用于护肤品等提供了理论依据。

氮氧化SODm/COm的设计与合成及其体外活性

基于对天然CuZn-SOD酶的分析,本文选取功能氮氧化异烟酸(HINO)配体与过渡金属Cu(II)通过混合溶剂热法合成了一例兼具双酶活性的配合物1,[Cu4(Hino)4(OH)2SO4(H2O)4]n.通过单晶X-射线衍射仪(SC-XRD)、粉末X-射线衍射仪(PXRD)和傅里叶红外光谱仪(FTIR)等对其进行系统的表征.NBT光还原法(NBT,氯化硝基四氮唑蓝)测试显示,配合物1的IC50值为0.43μmol/L,表明其具有优良的抗氧化性能.同时,体外儿茶酚酶模拟测试,配合物1的kcat值为3.166×10^(3)h^(-1),可作为中等强度的酶催化剂.

CeNPs在DOX诱导的心脏毒性中的作用及对SOD的影响

目的 探究CeNPs(纳米氧化铈)在DOX(阿霉素)诱导的心肌细胞损伤中的作用,以及CeNPs对DOX心肌细胞损伤中SOD活性的影响。方法 实验使用H9C2大鼠心肌细胞,DOX处理建立损伤模型,并将细胞随机分为5组:空白对照组、DOX损伤组、CeNPs组、DOX+CeNPs组、DOX+DEX(右丙亚胺,阳性保护药)组进行实验。通过CCK-8法测定存活率、Western Blot法测定蛋白表达量、生化法检测氧化应激指标SOD活性。结果 CCK-8法:DOX+CeNPs组相对于DOX组,细胞存活率显著增高(P<0.0001)。Western Blot法:DOX+CeNPs组与DOX组对比,Bax蛋白表达水平下降(P<0.0001),Bcl-2蛋白表达水平增高(P<0.05)。生化法检测:DOX+CeNPs组与DOX组对比,SOD活力升高(P<0.05)。结论 CeNPs能够提高DOX处理后的细胞存活率;CeNPs调控相关凋亡蛋白的表达减轻DOX处理后的细胞凋亡;CeNPs通过提高SOD活性改善DOX处理后的细胞氧化应激失平衡。

生物反馈电刺激疗法对围绝经期女性盆底功能障碍患者血清SOD、GSH-Px水平的影响

目的观察生物反馈电刺激疗法治疗围绝经期盆底功能障碍性疾病(PFD)患者的临床效果及对血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响。方法收集2019年8月至2022年8月在长沙市第三医院妇产科就诊的204例PFD患者作为研究对象,以随机数字表法分成对照组(102例)与试验组(102例)。对照组给予盆底肌肉锻炼(即Kegel运动),试验组同时联合生物反馈电刺激疗法治疗,比较两组患者临床效果,以及治疗前后盆底肌力、生活质量及血清SOD与GSH-Px水平变化。结果治疗后,试验组总有效率(96.08%)高于对照组(82.35%)[(χ2=4.993,P=0.025)];治疗后,试验组盆底肌力、Ⅰ类/Ⅱ类肌纤维最大值均明显优于对照组[(4.31±0.80)级vs(3.09±0.76)级,(31.69±7.62)uv vs(23.19±7.17)uv,(44.07±12.89)uv vs(34.48±13.15)uv(t=-7.896,-5.802,-3.719,P均<0.01)];治疗后,试验组患者血清SOD、GSH-Px水平明显优于对照组[(5501.28±512.37)pg/mL vs(5096.31±526.42)pg/mL,(824.33±139.69)pmol/L vs(542.68±117.54)pmol/L(t=-3.937,-11.018,P均<0.01)];治疗后,试验组患者盆底功能障碍量表(PFDI-20)总分与其分量表评分以及盆底障碍影响简易量表(PFIQ-7)总分与分量表评分下降显著优于对照组(t=1.967~4.840,P均<0.05)。结论生物反馈电刺激疗法有助于围绝经期女性PFD患者增强盆底肌力,提高血清SOD、GSH-Px水平,提升患者生活质量。

高pH胁迫对小龙虾的急性毒性和SOD活性的影响

pH是衡量水质的一项重要指标,水体pH过高或过低均会对水生生物构成危害。为了解水体pH对小龙虾的影响,为小龙虾养殖生产提供依据,本研究从pH 8–12以1.0为幅度设置5个梯度,分别记录24、48、72、96 h小龙虾的死亡数量来统计死亡率,在得出96 h LC50的基础上(9.71),设置对照组(pH 7.6)和实验组(pH 9.7)2个pH处理组,开始96 h高pH胁迫,于胁迫后0、2、8、24、96 h分别取样测定血液中SOD活性。结果表明,小龙虾在pH 8–12的5个梯度中各时间点的死亡情况不同,pH为8时,各时间点均无小龙虾死亡;pH为9时,24 h无小龙虾死亡;但随时间增长死亡率升高;pH为10时,小龙虾死亡率在24 h为16.50%,96 h增加到53.00%;pH为11时,小龙虾死亡率在24 h到达64.00%,48 h为100%;pH为12时,24 h死亡率为100%。对照组小龙虾血液中的SOD活性随时间变化不显著,各实验组小龙虾血液中的SOD活性随时间增加而降低,实验组与对照组之间0–8 h时无显著差异,24 h和96 h时差异显著(P<0.05)。

SOD3表达在非诺贝特治疗小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探究SOD3的表达在非诺贝特治疗缺血再灌注(I/R)机制中的作用。方法使用基因敲除技术构建SOD3基因敲除的小鼠,通过PCR技术和DNA测序技术鉴定SOD3小鼠的基因分型,蛋白印迹法检测SOD3蛋白的表达。将野生型和SOD3^(-/-)型小鼠随机分为4组,野生型对照羟甲基纤维素(CMC)组(6只)、野生型非诺贝特治疗(Feno)组(6只)、SOD3^(-/-)型CMC对照(SOD3.CMC)组(5只)、SOD3^(-/-)型非诺贝特治疗(SOD3.Feno)组(5只)。使用线栓法制作小鼠大脑中动脉栓塞模型,栓塞90 min后拔出栓线,脑I/R 60 min处死小鼠。手术过程中用脑血流监测仪测局部脑血流,TTC染色后,分析各组脑梗死情况。结果PCR和DNA测序分析显示成功构建SOD3^(-/-)小鼠。I/R后,各组脑血流比较差异无统计学意义(P>0.05)。Feno组较CMC组的脑梗死体积明显缩小(P<0.001);SOD3.Feno组较SOD3.CMC组梗死体积缩小(P<0.001);SOD3.Feno组梗死面积较Feno组显著增加(P<0.05)。结论SOD3的表达是非诺贝特治疗脑I/R损伤的机制之一。

虫草内生真菌发酵产物中SOD的提取及工艺研究

将2株虫草内生真菌进行发酵培养,进一步研究虫草内生真菌的超氧化物歧化酶(SOD)提取工艺。以酶活力为指标,采用正交实验的方式对分离所得的2株虫草内生真菌(01号和02号)的SOD提取工艺进行研究。实验结果表明:01号菌SOD最佳提取工艺为超声波提取时间45 min,液料比40 mL/g,提取液pH 7.0,所得到的SOD活力为421 U;02号菌最佳提取工艺为超声波提取时间75 min,液料比30 mL/g,提取液pH 8.0,所得到的SOD活力为362 U。通过对比01和02号菌,可知虫草内生真菌中含有丰富的SOD,由于2个产地不同,其虫草内生真菌SOD活力差异较大,提取工艺也有明显差异。

补肾通络方联合氨基葡萄糖胶囊治疗膝关节骨性关节炎的疗效及对NO、SOD、CRP的影响

目的:研究补肾通络方联合氨基葡萄糖胶囊治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效及对患者血清一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)水平的影响。方法:将膝关节骨性关节炎患者120例按照随机数字表法分为对照组和观察组各60例。对照组给予氨基葡萄糖胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予补肾通络方治疗,疗程为6个月,比较两组患者治疗前后临床疗效、中医证候积分,视觉模拟评分(visual analog scale,VAS)、西安大略和麦克马斯特大学(Western Ontario and McMaster Universities,WOMAC)骨关节炎指数评分、膝关节功能Lysholm评分及血清NO、SOD、hs-CRP水平与安全性。结果:观察组总有效率为93.33%(56/60),高于对照组的70.00%(42/60)(P<0.05);治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者膝关节VAS、WOMAC、Lysholm评分改善均优于治疗前(P<0.05),观察组优于对照组(P<0.05);治疗后两组患者血清NO及hs-CRP水平均较治疗前下降,SOD水平均较治疗前升高,观察组NO、hs-CRP水平低于对照组(P<0.05),SOD水平高于对照组(P<0.05);治疗过程中两组患者均无明显不良反应发生。结论:补肾通络方联合氨基葡萄糖胶囊可提高膝关节骨性关节炎患者临床疗效,抑制血清NO及hs-CRP水平,促进血清SOD表达,有效恢复患者关节功能,效果优于单用氨基葡萄糖胶囊。

免疫荧光法检测融合蛋白PTD4-Cu,Zn-SOD在人星形胶质细胞中穿膜能力及保护作用

目的观察蛋白质转导4型-铜,锌超氧物歧化酶融合蛋白(protein transduction domain4-cuprum,zinc superoxide dismutase fusion protein,PTD4-Cu,Zn-SOD)能否穿膜进入体外培养的人星形胶质细胞,能否在穿膜后仍保持其生物学活性,能否减轻人星形胶质细胞的缺氧损伤。方法免疫组化及荧光法观察融合蛋白穿膜后在人星形胶质细胞内的荧光分布情况,评估融合蛋白的穿膜能力;制备人星形胶质细胞缺氧损伤模型后,实验分为空白对照组、Cu,Zn-SOD组、PTD4-Cu,Zn-SOD组。空白组加DMEM培养基(不含血清)作为对照,其余两组分别加入含有Cu,Zn-SOD、PTD4-Cu,Zn-SOD终浓度为2μmol/L的DMEM培养基,干预时间为1 h,用SOD活性及MDA含量测试盒,观察融合蛋白干预后的缺氧损伤星形胶质细胞中二者的变化。结果FITC荧光标记的融合蛋白PTD4-Cu,Zn-SOD可以进入体外培养的人星形胶质细胞中,且在细胞核中有聚集分布;经3组干预后,和对照组相比,PTD4-Cu,Zn-SOD组及Cu,Zn-SOD组均能提高星形胶质细胞内的SOD活性,融合蛋白PTD4-Cu,Zn-SOD组提高星形胶质细胞内SOD活性更为明显。和Cu,Zn-SOD组、对照组相比,PTD4-Cu,Zn-SOD组能降低星形胶质细胞内的MDA含量。结论PTD4-Cu,Zn-SOD能穿膜进入体外培养的人星形胶质细胞;融合蛋白PTD4-Cu,Zn-SOD能增加人星形胶质细胞缺氧损伤后的SOD活性,降低MDA含量。

血清D-D联合LDH、FGF23、SOD及Cysc检测对慢性肾衰竭的诊断价值

目的探讨血清D-二聚体(D-D)联合血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)、超氧化物歧化酶(SOD)及胱抑素C(Cysc)对慢性肾衰竭的诊断价值。方法35例慢性肾衰竭患者作为研究组,同期35例健康体检者作为对照组;比较两组血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc的表达水平,采用多因素logistic回归分析D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc是否为慢性肾衰竭发生的影响因素,使用受试者工作(ROC)曲线分析D-D联合LDH、FGF23、SOD及Cysc检测对慢性肾衰竭的诊断价值。结果研究组血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析发现,血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc是慢性肾衰竭发生的危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,各项指标联合检测的曲线下面积(AUC)为0.968,高于D-D、LDH、FGF23、SOD和Cysc单项指标检测的AUC(0.882、0.868、0.725、0.836、0.811,P<0.05),各项指标联合检测的特异度和灵敏度亦高于单项指标检测(P<0.05)。结论血清D-D联合LDH、FGF23、SOD以及Cysc检测对慢性肾衰竭具有较高的诊断价值。

烟草烟雾通过ROS/Sirt3/SOD2通路诱导NSCLC细胞吉非替尼耐药

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)最常见的驱动基因突变。为延长患者生存时间,NSCLC EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)耐药是目前急需解决的重大难题。本研究主要探究烟草烟雾(cigaree smoke,CS)诱导NSCLC发生吉非替尼耐药的机制。方法体外培养PC-9、A549细胞,分别经1μmol/L吉非替尼处理4 h、10%CS萃取物(CS extract,CSE)处理48 h。Western blot检测沉默蛋白3(Sirtuin 3,Sirt3)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)蛋白表达,使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,CCK-8试剂盒检测细胞活性,Ed U检测细胞增殖能力。Sirt3过表达质粒(OV-Sirt3)转染于PC-9和A549细胞中、N-乙酰半胱氨酸乙酯(N-acetylcysteine,NAC)作用于细胞后分别经1μmol/L吉非替尼处理4 h和10%CSE处理48 h。Western blot检测Sirt3、SOD2蛋白表达,DCFH-DA探针检测细胞中的ROS水平,CCK-8检测细胞活性。结果CSE均可促使PC-9、A549细胞对吉非替尼的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))提高(P<0.01),并且增强PC-9和A549细胞的增殖能力,提示CS可诱导NSCLC吉非替尼耐药;ROS参与CSE诱导的吉非替尼耐药(P<0.05);CSE诱导Sirt3、SOD2低表达(P<0.01),且Sirt3/SOD2与肺癌患者不良预后有关(P<0.05);OV-Sirt3的PC-9、A549细胞可逆转CSE诱导的吉非替尼耐药(P<0.05)且显著降低ROS生成;NAC可逆转CSE诱导的PC-9、A549细胞吉非替尼耐药(P<0.05)。结论ROS/Sirt3/SOD2通路参与了CS诱导的NSCLC吉非替尼耐药。

全膝关节置换术对晚期KOA患者IL-1β、SOD及TGF-β1水平的影响

目的 分析膝关节置换术对晚期膝关节骨性关节炎(KOA)患者白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、转移生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法 选取2018年3月至2021年3月于大连市友谊医院进行KOA治疗的154例患者,根据治疗方法将其分为对照组(75例,常规治疗)和研究组(79例,全膝关节置换术)。观察两组治疗后3个月的治疗优良率;随访治疗前、治疗后3个月的疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分、膝关节评分(HSS)和膝关节活动度;治疗前、治疗后3个月的血清中IL-1β、SOD、TGF-β1以及并发症。结果 研究组治疗总有效率为92.40%,高于对照组的49.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组VAS评分低于对照组,膝关节活动度以及HSS评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组血清SOD、TGF-β1高于对照组,血清IL-1β低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 全膝关节置换术能改善晚期KOA患者膝功能及活动度,促进骨损伤修复,减轻疼痛症状及炎症反应,具有较好的安全性。

姜黄素对疫病流行区肥育猪血清SOD和IgG表达的影响

为测定在疫病流行区育肥猪饲料中添加0.1 g/kg姜黄素对血清SOD和IgG表达影响,试验在饲喂杜×长×大三元杂交的猪场进行。饲喂起于26日龄断奶的仔猪至150 d出栏止,在试验的35 d、84 d随机采取60头进行前腔静脉采血,用ELSIA方法测定血清中的SOD和IgG。结果表明,饲喂添加0.1 g/kg姜黄素84 d后,猪血清中的SOD含量和IgG含量可显著提高(P<0.01);35 d测定猪血清中的SOD含量和IgG含量结果组间无显著差异。根据猪场重要数据统计表明,在饲料中添加0.1 g/kg姜黄素,可以提高育肥猪的免疫力,促进育肥猪的健康生长。

自拟补肺健脾益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的临床疗效及对血清TGF-β1、bFGF、SOD水平的影响

【目的】探讨自拟补肺健脾益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的临床疗效及对血清转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。【方法】将86例COPD稳定期肺脾肾虚证患者随机分为对照组和观察组,每组各43例。对照组给予布地奈德吸入剂吸入治疗,并予以常规戒烟、预防呼吸道感染和呼吸功能锻炼。观察组在对照组的基础上联合自拟补肺健脾益肾方治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后临床症状评分、慢性阻塞性肺疾病评估测量表(CAT)评分、肺功能指标以及血清TGF-β1、bFGF、SOD水平的变化情况,评价2组患者的临床疗效,并采用改良呼吸困难量表(m MRC)评估患者治疗后的呼吸困难改善情况。【结果】(1)治疗3个月后,观察组的总有效率为95.35%(41/43),对照组为81.40%(35/43),组间比较,观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的中医临床症状评分(包括主症评分和次症评分)、CAT评分和急性加重次数均较治疗前降低(P<0.05),且观察组的降低作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(3)治疗后,2组患者的1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC等肺功能指标均较治疗前改善(P<0.05),且观察组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)治疗3个月后,观察组患者的呼吸困难改善程度明显优于对照组(P<0.05)。(5)治疗后,2组患者血清SOD水平均较治疗前升高(P<0.05),血清TGF-β1、b FGF水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对血清SOD水平的升高作用及对血清TGF-β1、bFGF水平的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。【结论】自拟补肺健脾益肾方对COPD稳定期患者疗效显著,可有效改善患者呼吸困难等临床症状与肺功能,降低急性加重发作次数,提高患者生活质量,其机制可能与清除自由基、降低气道炎症反应及纤维化有关。

新疆小麦籽粒SOD活性及TaSOD-A1位点等位变异的分布

为了解新疆小麦品种(系)籽粒超氧化物歧化酶(SOD)的活性及TaSOD-A1位点等位变异的分布,用两个功能标记SODA1和SODA11对117份新疆小麦品种(系)的TaSOD-A1位点(基因ID为TraesCS5A01G290800)进行等位变异检测,并结合SOD活性检测结果,分析TaSOD-A1位点不同等位变异与SOD活性的相关性。结果表明,含有TaSOD-A1a等位变异材料的籽粒SOD活性显著高于含有TaSOD-A1b等位变异材料的籽粒,二者占比分别为50.4%和49.6%;新疆冬小麦品种(系)中,TaSOD-A1a等位变异的分布频率高低依次为引进品种(系)>自育品种(系)>地方品种;新疆春小麦品种(系)中,只有3份材料含有TaSOD-A1a等位变异,早期品种(系)中未发现含有TaSOD-A1a等位变异的材料。新疆冬小麦品种(系)的籽粒SOD活性平均值显著高于新疆春小麦品种(系),且新疆冬小麦引进品种(系)中含有TaSOD-A1a等位变异材料的籽粒SOD活性平均值也显著高于含有TaSOD-A1b等位变异材料的籽粒SOD活性。