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SOD1突变蛋白性质与结构分析
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作者 徐愈强 《当代化工研究》 2019年第1期180-182,共3页
SOD1突变蛋白是最常见的引起肌萎缩性脊髓侧索硬化症(AmyotrophicLateralSclerosis,ALS)的原因之一,本文对SOD1基本特征进行了初步的分析,通过分析其核酸组成与疏水性发现其具有酸性蛋白质以及显著的胶原蛋白的特征,整体呈现亲水性。利... SOD1突变蛋白是最常见的引起肌萎缩性脊髓侧索硬化症(AmyotrophicLateralSclerosis,ALS)的原因之一,本文对SOD1基本特征进行了初步的分析,通过分析其核酸组成与疏水性发现其具有酸性蛋白质以及显著的胶原蛋白的特征,整体呈现亲水性。利用PSORTⅡ工具对SOD1亚细胞定位进行预测,数据表明,其在细胞中的分布均匀,在细胞质、细胞核中都有。使用MEGA我们做了进化树分析,结果表明人SOD1与灵长类动物进化关系最近。在最后,利用比较建模的方法构建了SOD1蛋白的三级结构,从结构来看表明预测结果准确。 展开更多
关键词 sod1蛋白 亚细胞定位预测 三级结构预测
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一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定 被引量:3
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作者 赵健 肖伟 +4 位作者 范立强 王富军 吕稼锋 袁勤生 刘建文 《食品与药品》 CAS 2009年第4期7-11,共5页
目的克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性。方法PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测。结果表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin... 目的克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性。方法PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测。结果表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin经酶切鉴定和序列分析,证明质粒构建正确,转化E.coliBL21(DE3)后,重组蛋白获得表达,Ni2+-NTA纯化后的凋亡素融合蛋白纯度达到85%以上,经噻唑蓝(MTT)法测定具有活性。结论成功构建了表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin,并在大肠杆菌中表达了EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,纯化的蛋白质具有诱导HeLa细胞凋亡的能力。 展开更多
关键词 EC—sod3-凋亡蛋白 克隆表达 纯化 噻唑蓝法
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Tofersen的临床研究进展
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作者 王亚茹 王丽双 +2 位作者 温雅静 阚红亮 章晓骅 《中国处方药》 2024年第5期170-171,共2页
Tofersen是一种鞘内给药的反义寡核苷酸药物,用于治疗肌萎缩侧索硬化症(ALS),其旨在通过诱导RNase H介导的超氧化物歧化酶1(SOD1)mRNA降解来减少SOD1蛋白的合成。本文着重对首款针对ALS的基因靶向疗法Tofersen的临床研究进展进行论述。
关键词 反义寡核苷酸 肌萎缩侧索硬化症 Tofersen sod1蛋白
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右美托咪定对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠的神经保护作用机制研究
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作者 吴小军 王日兴 +3 位作者 林芳崇 吕有凯 冯奇桃 云天奇 《转化医学杂志》 2023年第6期297-302,共6页
目的 探讨右美托咪定(Dex)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠的神经保护作用及其机制。方法 C57BL/6新生小鼠70只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HI组)和Dex治疗组(HI+Dex组)、HI+NS-siRNA组、HI+PPARγ-siRNA组、HI+Dex+NS-siRNA组... 目的 探讨右美托咪定(Dex)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠的神经保护作用及其机制。方法 C57BL/6新生小鼠70只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HI组)和Dex治疗组(HI+Dex组)、HI+NS-siRNA组、HI+PPARγ-siRNA组、HI+Dex+NS-siRNA组、HI+Dex+PPARγ-siRNA组各10只。除Sham组外,其余均构建新生小鼠HIBD模型,HI+Dex组腹腔注射0.1 mg/kg Dex。Morris水迷宫实验测定Sham组、HI组、HI+Dex组小鼠的学习记忆能力,2,3,5-三苯基四氮唑氯化物染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡情况,并检测脑组织活性氧(ROS)水平,Western blotting检测脑组织中Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2、SOD2、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)蛋白表达;分析Dex通过PPAR-γ/STAT3通路对SOD2蛋白表达的影响。结果 与Sham组比较,HI组小鼠脑梗死体积增加,逃避潜伏期延长,平台象限游泳时间百分比降低,脑组织凋亡细胞数量增多,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,ROS水平升高,SOD2蛋白水平下降,p-PPARγ和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.01)。与HI组比较,Dex处理后HIBD新生小鼠脑梗死体积缩小,逃避潜伏期缩短,平台象限游泳时间百分比升高,脑组织凋亡细胞数量减少,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,ROS水平降低,SOD2蛋白水平升高,p-PPARγ和p-STAT3蛋白水平升高(P<0.01)。与HI+NS-siRNA组比较,HI+Dex+NS-siRNA组脑组织中p-PPARγ、p-STAT3和SOD2蛋白水平均升高,HI+PPARγ-siRNA组脑组织中p-PPARγ蛋白水平降低(P<0.01);与HI+Dex+NS-siRNA组比较,HI+Dex+PPARγ-siRNA组脑组织中p-PPARγ、p-STAT3和SOD2蛋白水平均降低(P<0.01)。结论 Dex可通过调控PPAR-γ/STAT3通路减轻HIBD新生小鼠脑组织氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,进而发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 脑损伤 缺氧缺血 右美托咪定 细胞凋亡 sod2蛋白 PPARΓ STAT3 新生小鼠
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黑蒜提取液对胰腺癌Panc-1细胞生长与抗氧化分子机制的实验研究 被引量:2
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作者 宫晓静 万玲琴 王义善 《实用医药杂志》 2016年第4期328-330,334,共4页
目的探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对Panc-1细胞生长与抗氧化能力的影响。方法将不同浓度的ABGE(0.2、1.0、1.8 mg/ml)作用于Panc-1细胞,采用CCK-8法分别于24 h、48 h、72 h测定Panc-1细胞株的生长能力;RT-PCR检测ABG... 目的探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对Panc-1细胞生长与抗氧化能力的影响。方法将不同浓度的ABGE(0.2、1.0、1.8 mg/ml)作用于Panc-1细胞,采用CCK-8法分别于24 h、48 h、72 h测定Panc-1细胞株的生长能力;RT-PCR检测ABGE干预后Panc-1细胞VEGFm RNA以及MMP-9m RNA表达变化;ELISA法检测Panc-1细胞上清液中相关蛋白VEGF、SOD的表达情况。结果 CCK-8结果显示,黑蒜提取液对Panc-1细胞株的生长活性具有明显的抑制作用,且具有时间剂量依赖关系;RT-PCR结果显示,黑蒜提取液能明显地上调VEGFm RNA以及下调MMP-9m RNA的表达;ELISA法结果显示,随黑蒜提取液浓度的增加,Panc-1细胞上清液中VEGF蛋白的表达水平下降、SOD蛋白表达增加。结论黑蒜提取液能显著抑制Panc-1细胞的生长能力,其抗氧化能力可能是与下调VEGF蛋白表达、MMP-9以及上调SOD表达有关。 展开更多
关键词 黑蒜提取液 PANC-1细胞 VEGF蛋白 sod蛋白 细胞生长 抗氧化能力
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Effects of Two Kinds of Heavy Metals Including Cr^(6+) and Pb^(2+) on Garlic Germination 被引量:3
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作者 柯佳颖 吴文杰 陈细香 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第2期171-174,共4页
[Objective] This study aimed to revealing the effects of two kinds of heavy metals including Cr6+ and Pb2+ on garlic germination.[Method] Root length,enzyme(SOD and CAT)activity and soluble protein content during ... [Objective] This study aimed to revealing the effects of two kinds of heavy metals including Cr6+ and Pb2+ on garlic germination.[Method] Root length,enzyme(SOD and CAT)activity and soluble protein content during garlic germination were determined under the stress of two kinds of heavy metals including Cr6+ and Pb2+.[Result] During garlic germination,there was an obvious inhibition on buds and seedlings when the concentration of heavy metals including Cr6+ and Pb2+ was more than 20 mg/L,while SOD and CAT had certain buffering ability to the heavy metal toxicity with low concentration.With the stress of Cr6+ in low concentration,SOD activity increased with the increase of metal ion concentration,and then reached maximum when the treatment concentration was 50 mg/L,while CAT activity gradually increased when Cr6+ concentration was lower than 20 mg/L.With the high concentration of Cr6+(more than 50 mg/L)or the Pb2+ stress,SOD and CAT activity continued to decrease with the increase of concentration of heavy metal ions.With various concentrations of heavy metal(Cr6+ and Pb2+)solution,soluble protein content showed the decreasing trend with time prolong,and the decreasing trend was obvious with the increase of concentration.Moreover,the tolerance of garlic on Cr6+ toxicity was much higher than that on Pb2+.[Conclusion] Two kinds of heavy metals including Cr6+ and Pb2+ have impacts on four factors mentioned above during garlic germination,and this study provides a theoretical basis for further discussion of the toxic mechanism of heavy metals on plants. 展开更多
关键词 GARLIC sod CAT Soluble protein
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三唑磷对小白菜中可溶性蛋白质及SOD、CAT、Ca^(2+)-ATPase和Mg^(2+)-ATPase活性的影响 被引量:2
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作者 唐红枫 孙茜 《生物学通报》 北大核心 2009年第5期46-48,共3页
使用一定浓度三唑磷农药喷洒小白菜后,测定7d中其体内可溶性蛋白质及抗氧化酶如SOD、CAT、和蛋白酶Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase的含量变化。结果表明,喷药后可溶性蛋白质在第2~4天含量相对于对照组减小,随后呈上升趋势;SOD和CAT在第2~6... 使用一定浓度三唑磷农药喷洒小白菜后,测定7d中其体内可溶性蛋白质及抗氧化酶如SOD、CAT、和蛋白酶Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase的含量变化。结果表明,喷药后可溶性蛋白质在第2~4天含量相对于对照组减小,随后呈上升趋势;SOD和CAT在第2~6天均高于对照;而Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase第1~4天与对照相差不大,第5、6天略高于对照;第7天各物质都基本还原到与对照接近或持平。说明三唑磷喷洒后致使植物体内产生了大量氧自由基,进而诱导细胞内防御活性氧自由基毒害的物质产生。为食品卫生检测提供了一个参考标准。 展开更多
关键词 三唑磷蛋白sod Mg2+-ATPase Ca2+-ATPase CAT
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LAK细胞中一种自由基清除剂——SLP的分离纯化与抗体制备
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作者 潘英 朱敏生 +4 位作者 沈月 许祥裕 赵建华 钱晖 徐佳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期933-936,共4页
SOD样蛋白(SOD-like protein,SLP)是从LAK 细胞中发现的一种具有自由基清除功能的蛋白.为阐明SLP的生化特性和确定其蛋白序列或基因序列,采用DEAE-Sepharose FF层析从LAK 细胞中得... SOD样蛋白(SOD-like protein,SLP)是从LAK 细胞中发现的一种具有自由基清除功能的蛋白.为阐明SLP的生化特性和确定其蛋白序列或基因序列,采用DEAE-Sepharose FF层析从LAK 细胞中得到部分纯化的SLP,并采用IEF等电聚焦电泳,活性染色,将含有活性蛋白的胶条直接免疫Balb/c 小鼠,制备抗血清并筛选得到多株有中和SLP清除自由基活性的单克隆抗体.Western blot结果表明SLP分子量约为67 kD,并测得pI约为4.2. 展开更多
关键词 LAK细胞 sod蛋白 纯化 抗体 分离 自由基
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人胎盘间充质干细胞移植通过降低超氧化物歧化酶1和解耦联蛋白-2的表达提高卵巢功能 被引量:13
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作者 相丽 马会明 +9 位作者 何艳桃 刘超群 侯巧妮 辛丞 周恺玥 马振华 王燕蓉 裴秀英 陈冬梅 徐仙 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期101-108,共8页
目的探讨人胎盘间充质干细胞(h PMSC)移植治疗对环磷酰胺所致卵巢早衰(POF)模型SD大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)和解耦联蛋白-2(UCP-2)表达的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为4组(n=15):空白对照组,POF模型组,治疗对照组,h PMSC移植组... 目的探讨人胎盘间充质干细胞(h PMSC)移植治疗对环磷酰胺所致卵巢早衰(POF)模型SD大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)和解耦联蛋白-2(UCP-2)表达的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为4组(n=15):空白对照组,POF模型组,治疗对照组,h PMSC移植组。以首计量50 mg/kg、维持剂量8 mg/kg连续14 d给大鼠腹腔注射环磷酰胺溶液建立POF模型,观察大鼠动情周期变化,采用ELISA方法测定血清中雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)、活性氧族(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)水平;HE染色方法检测卵巢组织形态学及卵泡计数,VG染色法观察卵巢组织纤维化情况;采用免疫组织化学和Western blotting法测定SOD1和UCP-2蛋白表达。结果 ELISA结果显示:模型组血清FSH水平[(10.60±1.0)IU/L]明显高于空白对照组[(5.83±0.92)IU/L](P<0.01),而E2、AMH水平[(35.52±10.27)ng/L、(2 090.6±397.5)ng/L]则明显低于空白对照组[(65.62±3.76)ng/L、(3 636.39±204.46)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。与空白对照组相比h PMSC移植组血清中ROS和8-OHd G升高(P<0.05)。卵泡计数显示h MSC移植组闭锁卵泡数(5.36±1.11)显著低于治疗对照组(8.01±2.22)和POF模型组(11.21±1.69)(P<0.05)。与治疗对照组相比,h PMSC移植组中ROS和8-OHdG显著下降(P<0.05)。VG染色显示,与治疗对照组比,hP MSC移植组纤维化面积比例显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与治疗对照组相比,hP MSC移植组中SOD1和UCP-2蛋白表达量显著下降(P<0.05),而hP MSC移植组与对照组则差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示模型组中SOD1和UCP-2蛋白表达相较于治疗对照组是降低的,而hP MSC移植组相较于空白对照组则差异无统计学意义。结论 hP MSC移植改善POF模型SD大鼠氧化应激,降低SOD1及UCP-2表达,起到保护卵巢线粒体功能的作用。 展开更多
关键词 人胎盘间充质干细胞(hPMSC) 超氧化物歧化酶1(sod1)/解耦联蛋白-2(UCP-2)表达 卵巢早衰(POF) 大鼠
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