右美托咪定对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠的神经保护作用机制研究

目的 探讨右美托咪定(Dex)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠的神经保护作用及其机制。方法 C57BL/6新生小鼠70只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HI组)和Dex治疗组(HI+Dex组)、HI+NS-siRNA组、HI+PPARγ-siRNA组、HI+Dex+NS-siRNA组、HI+Dex+PPARγ-siRNA组各10只。除Sham组外,其余均构建新生小鼠HIBD模型,HI+Dex组腹腔注射0.1 mg/kg Dex。Morris水迷宫实验测定Sham组、HI组、HI+Dex组小鼠的学习记忆能力,2,3,5-三苯基四氮唑氯化物染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡情况,并检测脑组织活性氧(ROS)水平,Western blotting检测脑组织中Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2、SOD2、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)蛋白表达;分析Dex通过PPAR-γ/STAT3通路对SOD2蛋白表达的影响。结果 与Sham组比较,HI组小鼠脑梗死体积增加,逃避潜伏期延长,平台象限游泳时间百分比降低,脑组织凋亡细胞数量增多,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,ROS水平升高,SOD2蛋白水平下降,p-PPARγ和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.01)。与HI组比较,Dex处理后HIBD新生小鼠脑梗死体积缩小,逃避潜伏期缩短,平台象限游泳时间百分比升高,脑组织凋亡细胞数量减少,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,ROS水平降低,SOD2蛋白水平升高,p-PPARγ和p-STAT3蛋白水平升高(P<0.01)。与HI+NS-siRNA组比较,HI+Dex+NS-siRNA组脑组织中p-PPARγ、p-STAT3和SOD2蛋白水平均升高,HI+PPARγ-siRNA组脑组织中p-PPARγ蛋白水平降低(P<0.01);与HI+Dex+NS-siRNA组比较,HI+Dex+PPARγ-siRNA组脑组织中p-PPARγ、p-STAT3和SOD2蛋白水平均降低(P<0.01)。结论 Dex可通过调控PPAR-γ/STAT3通路减轻HIBD新生小鼠脑组织氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,进而发挥神经保护作用。

人胎盘间充质干细胞移植通过降低超氧化物歧化酶1和解耦联蛋白-2的表达提高卵巢功能

目的探讨人胎盘间充质干细胞(h PMSC)移植治疗对环磷酰胺所致卵巢早衰(POF)模型SD大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)和解耦联蛋白-2(UCP-2)表达的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为4组(n=15):空白对照组,POF模型组,治疗对照组,h PMSC移植组。以首计量50 mg/kg、维持剂量8 mg/kg连续14 d给大鼠腹腔注射环磷酰胺溶液建立POF模型,观察大鼠动情周期变化,采用ELISA方法测定血清中雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)、活性氧族(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)水平;HE染色方法检测卵巢组织形态学及卵泡计数,VG染色法观察卵巢组织纤维化情况;采用免疫组织化学和Western blotting法测定SOD1和UCP-2蛋白表达。结果 ELISA结果显示:模型组血清FSH水平[(10.60±1.0)IU/L]明显高于空白对照组[(5.83±0.92)IU/L](P<0.01),而E2、AMH水平[(35.52±10.27)ng/L、(2 090.6±397.5)ng/L]则明显低于空白对照组[(65.62±3.76)ng/L、(3 636.39±204.46)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。与空白对照组相比h PMSC移植组血清中ROS和8-OHd G升高(P<0.05)。卵泡计数显示h MSC移植组闭锁卵泡数(5.36±1.11)显著低于治疗对照组(8.01±2.22)和POF模型组(11.21±1.69)(P<0.05)。与治疗对照组相比,h PMSC移植组中ROS和8-OHdG显著下降(P<0.05)。VG染色显示,与治疗对照组比,hP MSC移植组纤维化面积比例显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与治疗对照组相比,hP MSC移植组中SOD1和UCP-2蛋白表达量显著下降(P<0.05),而hP MSC移植组与对照组则差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示模型组中SOD1和UCP-2蛋白表达相较于治疗对照组是降低的,而hP MSC移植组相较于空白对照组则差异无统计学意义。结论 hP MSC移植改善POF模型SD大鼠氧化应激,降低SOD1及UCP-2表达,起到保护卵巢线粒体功能的作用。