N6-甲基腺苷阅读蛋白人类抗原R对结直肠癌细胞的迁移、侵袭和糖酵解的影响及其与磷酸果糖激酶1的关系

目的探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)阅读蛋白人类抗原R(HuR)对结直肠癌细胞迁移、侵袭及糖酵解能力的影响及其与6-磷酸果糖激酶1(PFK1)的关系。方法收集2022年4—12月在郑州大学附属郑州中心医院首次确诊为结直肠癌的33例患者的组织标本,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织中HuR和PFK1 mRNA表达量,检测正常肠上皮细胞NCM460以及结直肠癌细胞HCT8、SW480、SW620、HCT116、LoVo、RKO和COLO205中HuR mRNA表达量;使用小干扰RNA构建敲减HuR的结直肠癌细胞模型,通过细胞划痕实验、Transwell实验分别检测HuR对结直肠癌细胞迁移和侵袭能力的影响;通过qRT-PCR、Western bolt实验分别检测PFK1 mRNA及其蛋白表达量;采用葡萄糖含量试剂盒、丙酮酸含量试剂盒分别检测葡萄糖摄取量、丙酮酸生成量;通过生物信息学分析探讨HuR与PFK1的关系,采用放线菌素D实验评估HuR对PFK1 mRNA稳定性的影响。结果在结直肠癌组织中,HuR、PFK1在mRNA水平上呈高表达;在结直肠癌细胞系中,HuR在mRNA水平上呈高表达;下调HuR可以显著抑制结直肠癌细胞迁移、侵袭能力,同时可以降低葡萄糖消耗量及丙酮酸生成量;敲低HuR可以抑制PFK1 mRNA的稳定性,降低其在mRNA和蛋白水平的表达量。PFK1上存在m^(6)A修饰位点。结论m^(6)A阅读蛋白HuR可能通过识别结合PFK1上的m^(6)A位点降低PFK1 mRNA稳定性,从而调控结直肠癌细胞的迁移、侵袭和糖酵解能力。

SON-R 6-40非言语智力测验在中国的适用性

SON-R 6-40非言语智力测验是以非文字形式测量个体推理与空间能力的智力评估工具。研究旨在考查SON-R 6-40在中国的适用性。根据全国人口分布,在中国六大行政区6至40岁年龄人群中施测了1721人,通过与荷兰/德国混合样本比较,分析该测验的跨文化等值水平。结果表明:(1)测验信度与结构跨样本一致,说明该测验在两种文化下结构等值;(2)多样本验证性因素分析证明了该测验的测量单位等值性。因此,SON-R 6-40适合在中国推广使用以及用于智力的跨文化比较研究。

IL-33通过miR-19a-3p/MAPK6通路影响心肌缺氧/复氧损伤的机制研究

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)通过miR-19a-3p/MAPK6通路对心肌缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及可能的分子机制。方法 建立H/R诱导的新生小鼠心肌细胞体外模型,使用IL-33进行预处理,向心肌细胞中转入miR-19a-3p mimic,以上调miR-19a-3p表达,转入miR-19a-3p inhibitor,以抑制miR-19a-3p表达,转入pc DNA-MAPK6以上调MAPK6表达。通过Caspase-3活性、细胞凋亡ELISA法和原位细胞凋亡染色检测心肌细胞凋亡。Target Scan数据库预测miR-19a-3p的潜在靶点,双荧光素酶检测报告显示miR-19a-3p与MAPK6之间关系;RT-qPCR法检测心肌细胞miR-19a-3p和MAPK6 mRNA表达,Western blot法检测MAPK6蛋白表达。结果 IL-33预处理可以抑制H/R诱导的miR-19a-3p表达下调和细胞凋亡。双荧光素酶测定报告显示,miR-19a-3p靶向调控MAPK6。IL-33抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,过表达MAPK6减弱了IL-33对H/R的抗凋亡作用。过表达miR-19a-3p抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,而敲低miR-19a-3p可以消除IL-33对H/R诱导的MAPK6表达下调。结论 IL-33通过调控miR-19a-3p/MAPK6信号通路,减少H/R诱导的心肌细胞凋亡。

调脂治疗对不稳定型心绞痛患者血清IL-6、hsCRP、sCD40L的影响

目的探讨调脂治疗在冠心病治疗中的作用机制。方法选取不稳定型心绞痛合并高脂血症患者52例,随机分为研究组和对照组,研究组在对照组常规治疗的基础上加用阿托伐他汀,治疗前后分别测定白细胞介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hsCRP)和可溶性CD40L(sCD40L)和血脂水平,观察阿托伐他汀对不稳定型心绞痛合并高脂血症患者血清中IL-6、hsCRP、sCD40L水平的影响。结果治疗5d后,研究组患者血清中IL-6由(6.63±1.44)mg/L降至(3.03±1.45)mg/L,hsCRP由(9.95±3.62)mg/L降至(5.25±3.12)mg/L,sCD40L由(3.82±1.55)ng/mL降至(2.82±1.55)ng/mL,差别有统计学意义(P<0.05)。结论不稳定型心绞痛合并高脂血症患者使用他汀类药物早期就具有抗炎作用;尽早使用可使患者获益更大。

m6A识别蛋白HuR调控lncRNA TRG-AS1抑制结直肠癌生长的机制研究

目的 探讨N6-甲基腺苷(m6A)识别蛋白人类抗原R(HuR)调控长链非编码RNA T细胞受体γ位点反义RNA 1(lncRNA TRG-AS1)对结直肠癌(CRC)生长的影响。方法 比色法检测CRC患者的癌组织、癌旁组织及正常结肠上皮细胞NCM460及CRC细胞HCT116、SW480、LOVO中m6A含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测TRG-AS1表达;Western blot检测HuR蛋白表达。将HCT116细胞分为Ct组、OE-NC组、OE-HuR组、si-NC组、si-HuR组、siHuR+pcDNA组、si-HuR+pcDNA-TRG-AS1组,CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;裸鼠体内移植瘤实验观察肿瘤生长情况;采用甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)检测TRG-AS1上是否存在m6A位点;RNA pull-down实验和RNA免疫共沉淀(RIP)检测TRG-AS1与HuR蛋白的相互作用。结果 在CRC组织和细胞中,HuR蛋白、TRG-AS1高表达,m6A含量降低,且在HCT116细胞中HuR蛋白、TRG-AS1表达最高,m6A含量最低(P<0.05),选择HCT116细胞为研究对象。与si-NC组比较,si-HuR组HuR蛋白、TRG-AS1表达降低,m6A含量升高(P<0.05);与OE-NC组比较,OE-HuR组HuR蛋白、TRG-AS1表达升高,m6A含量降低(P<0.05);与si-HuR组、si-HuR+pcDNA组比较,si-HuR+pcDNATRG-AS1组HuR蛋白、m6A含量变化差异无统计学意义,TRG-AS1表达升高(P<0.05);下调HuR可抑制HCT116细胞增殖、迁移、侵袭及体内移植瘤的生长,促进细胞凋亡,而上调HuR则呈相反趋势;过表达TRG-AS1减弱了沉默HuR对HCT116细胞增殖、划痕愈合率、侵袭、体内移植瘤生长的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用;TRG-AS1上存在m6A位点,且TRG-AS1能与HuR蛋白相互作用。结论 沉默m6A识别蛋白HuR可通过抑制TRG-AS1表达进而抑制HCT116细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡。

急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、CD40配体的水平变化及临床意义

目的探究急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、CD40配体的水平变化及临床意义。方法选取2020年1月至10月厦门市第三医院心血管内科收治的50例急性ST段抬高型心肌梗死患者作为STEMI组,50例非ST段抬高型急性冠脉综合征患者作为NST-ACS组,另同期选择50名健康体检者作为对照组。比较三组的血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、CD40配体水平。结果STEMI组血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、CD40配体的水平均高于NST-ACS组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合检测的阳性检出率高于其他单一指标,差异有统计学意义(P<0.008)。结论对急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、CD40配体的水平变化进行检测,能够对患者病变程度进行评价,利于后续治疗的开展,值得研究和推广。

羰基还原酶不对称还原(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯

选择R-羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶双酶,协同催化(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯不对称还原制备阿托伐他汀关键手性合成子6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯。转化条件优化结果显示:在不添加外源性辅酶NADP(H)、菌体用量15.0 g/L、147.0 g/L(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯、128.2g/L葡萄糖,30℃、pH 6.5条件下反应6 h后,底物转化率达到100%,产物d.e.值大于99.5%。

生物催化法合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯

利用E.coli BL21/pCDFDuet-gdh-cr-X共表达全细胞催化6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯不对称还原合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯。结果表明:在菌体用量4.85 g/L、葡萄糖与底物质量浓度比为1∶1、温度28℃、pH 7.0条件下,80.0 g/L 6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯生物还原2 h后,底物转化率可达99.0%,产物d.e.值大于99.5%。在考察范围内,NADP+用量对催化效率无显著作用。

利用工业废弃物中获得的(R)-5-甲基-δ-戊酸内酯为原料合成(2R,6R)-2,6,10-三甲基十一醇

(2R,6R)-2,6,10-三甲基十一醇(1)是维生素E、维生素K和植醇的基本结构单元.利用从甾体皂甙元氧化降解产生的工业废弃物中所获得的手性化合物(R)-5-甲基-δ-戊酸内酯(6),先将其转化成为化学性质稳定的(4R)-甲基-5-甲氧甲氧基戊酸甲酯(7),再经十二步反应,以14.1%的总收率合成得到了目标化合物(2R,6R)-2,6,10-三甲基十一醇(1).

白细胞介素-6(IL-6)及(sIL-6R)与胆管癌

随着分子生物学的发展,白细胞介素-6（IL-6）和（sIL-6R）的分子结构及其生物学作用的研究取得了很大的进展。白细胞介素-6（IL-6）及其（sIL-6R）属细胞因子家族,其中白细胞介素-6（IL-6）是一种多效性细胞因子,

血清可溶性CD40配体与白介素-6、肿瘤坏死因子-α、C-反应蛋白在不同糖耐量人群中的变化及相关性

目的观察不同糖耐量水平与血清可溶性CD40配体(s CD40L)以及高敏C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化,分析其与糖代谢状态的关系及它们之间的相关性,探讨其临床意义。方法分别选取正常对照组(NC组)、糖调节异常组(IGR组)、2型糖尿组(T2DM组)、T2DM组伴血管增殖症组(T2DM+VC组)各30例,采用酶联免疫法(ELISA)检测s CD40L、IL-6、TNF-α;CRP用特定蛋白测定仪免疫散射比浊法检测。结果 1糖调节异常组、T2DM组、T2DM组+血管增殖症组患者血清s CD40L、CRP、IL-6、TNF-α水平均高于NC组(P<0.05);2与糖调节异常组相比,T2DM组+血管增殖症组s CD40L、CRP、IL-6、TNF-α水平最高,T2DM组次之,各组间差异有显著性(P<0.05);3s CD40L与CRP、IL-6、TNF-α、空腹血糖、糖化血红蛋白、体质量指数呈正相关(P<0.05)。结论 s CD40L、CRP、IL-6和TNF-α可能参与了糖尿病的发生发展。高水平s CD40L、CRP、IL-6、TNF-α与T2DM发生血管增殖的危险性增高相关。

糖尿病血瘀证病人血清IL-6和sIL2R水平的研究

目的 研究糖尿病血瘀证病人IL -6、sIL2R水平的变化 ,探讨糖尿病血瘀证同IL -6、sIL2R的关系。方法 将 40例 2型糖尿病血瘀证病人与 3 5例非血瘀证病人的IL -6、sIL2R以及糖代谢相关指标进行比较 ,并以2 5例成人健康者作对照。应用化学发光法检测血清IL -6、sIL2R。结果 同健康对照组相比 ,糖尿病血瘀证和非血瘀证病人血清IL -6水平明显升高(P <0 .0 1) ,sIL2R水平未见明显变化。其中 ,血瘀证病人血清IL -6水平明显高于非血瘀证组(P <0 .0 1)。结论 糖尿病时 ,炎症反应可能参与了血瘀证的形成 ,血清IL -6水平升高可能是糖尿病血瘀证的病理生理之一。

拔毛·剃毛对绵羊皮肤中GHR·IGF-1·IGF-1R·KAP3.2和KAP6-1基因表达的影响

选取36只新疆细毛羊随机分成6组进行拔毛、剃毛处理,于第0、3、6、9、12、50天采集皮肤样品,用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析绵羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)、角蛋白关联蛋白KAP3.2和KAP6-1mRNA的相对丰度。实验结果显示,与对照组相比,剃毛可显著提高IGF-1的表达量,但对GHR、IGF-1R、KAP3.2和KAP6-1的表达量均无明显的影响;而拔毛对皮肤中GHRI、GF-1I、GF-1R、KAP3.2和KAP6-1基因表达均无明显影响。

H_4SiW_6Mo_6O_(40)/SiO_2促进一锅法合成4-苯基-6-甲基-5-乙氧羰基-3,4-二氢嘧啶-2(H)-酮

采用溶胶-凝胶法制备H4SiW6Mo6O40/SiO2为催化剂,以乙酰乙酸乙酯、苯甲醛和尿素为原料,无水乙醇为溶剂一锅法合成4-苯基-6-甲基-5-乙氧羰基-3,4-二氢嘧啶-2(H)-酮.研究结果表明:催化剂用量、反应温度、反应时间和反应物的物质的量比是影响4-苯基-6-甲基-5-乙氧羰基-3,4-二氢嘧啶-2(H)-酮合成收率的重要因素.当n(苯甲醛)∶n(乙酰乙酸乙酯)∶n(尿素)为1∶1.2∶1.5,反应温度为90℃,催化剂的用量占反应物料总质量的2.5%,反应时间为90min时,产品收率可达72.3%.通过熔点,IR,1HNMR和MS等测试手段对合成的3,4-二氢嘧啶酮化合物进行了表征.

阻塞性呼吸暂停低通气综合征患者血清sCD40L、IL-18、IL-6及MMP-9的水平及意义

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清炎症因子(sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9)的临床意义。方法选择OSAHS患者(其中轻度30例,中、重度30例)为实验组,另选择健康者30例为正常对照组,测定各组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平。测定睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低脉搏血氧饱和度(SpO2)。结果①比较正常对照组、轻度OSAHS组、(中、重度)OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平,发现OSAHS组比正常对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);②OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平密切相关,且分别与睡眠呼吸监测指标(AHI、最低SpO2)密切相关。结论 OSAHS患者血清炎症因子sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平升高,表明OSAHS是一种与炎症密切相关的疾病。

(3S,6S)-及(3S,6R)-3-苄氧甲基-6-甲基-吗啉-2,5-二酮的制备及其晶体结构

以2-溴丙酸和N-叔丁氧羰基-O-苄基-L-丝氨酸为起始试剂首先制得N-(2-溴丙基)-O-苄基-L-丝氨酸(BPBS),在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)/三乙胺(Et3N)溶剂中80℃经9h后BPBS发生分子内环化反应生成(3S,6S)-3-苄氧甲基-6-甲基-吗啉-2,5-二酮[(3S,6S)-BMMD]及(3S,6R)-BMMD共存体,产率70%.将所制得的共存体以乙酸乙酯为重结晶溶剂,采用微分重结晶法,经4次"溶解-部分重结晶"操作循环制得两种纯光学构型的(3S,6S)-BMMD和(3S,6R)-BMMD.将两种光学纯双手性中心的BMMD分别溶于乙酸乙酯,室温下培养得(3S,6S)-BMMD和(3S,6R)-BMMD的单晶体,以X射线衍射法测定上述两种BMMD的分子结构.

H3PW6Mo6O40／SiO2催化合成7-羟基4-甲基香豆素

采用溶胶-凝胶法制备了二氧化硅负载磷钨钼杂多酸催化剂H3PW6Mo6O40/SiO2,该催化剂制备的适宜条件是:m(H3PW6Mo6O40)∶m(SiO2)=40%,煅烧温度150℃,活化时间3 h。以二氧化硅负载磷钨钼酸为催化剂,在无溶剂条件下由间苯二酚和乙酰乙酸乙酯为原料进行Pechmann反应合成7-羟基-4-甲基香豆素。考察了反应物间苯二酚与乙酰乙酸乙酯摩尔比,催化剂用量,反应温度,反应时间等因素对收率的影响,并对反应条件进行优化。结果表明,在间苯二酚与乙酰乙酸乙酯的摩尔比为1∶1.5(其中间苯二酚为0.1mol),反应时间为16 h,H3PW6Mo6O40/SiO2的用量为1.3 g,在油浴加热120℃左右的优化条件下,7-羟基-4-甲基香豆素的收率可达86.1%。

消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者腹腔化疗前后血清及腹水IL-6和sIL-6R水平变化的意义

目的:探讨腹腔化疗对癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平影响及其临床意义。方法:采用放免法测定病人腹腔化疗前、治疗后四周血清及腹水IL-6水平变化,用ELISA同时测定sIL-6R水平变化,并与正常对照组相对比。结果:消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者血清IL-6和sIL-6R水平较正常对照组明显升高,腹水IL-6和sIL-6R水平较血清IL-6和sIL-6R水平明显增高。腹腔化疗后血清IL-6和sIL-6R水平下降,腹水IL-6和sIL-6R水平变化与血清水平变化相平行。且血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化与腹腔化疗是否有效有密切关系。结论:监测癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化是判断及预测腹腔化疗是否有效的途径之一。

miR-143-3p靶向IL-6R/STAT3通路抑制IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞血管生成

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。然后使用miR-143-3p mimics过表达miR-143-3p,按照上述方法检测miR-143-3p对IL-6诱导的管腔形成数目、VEGF mRNA和蛋白表达的影响。此外,使用双荧光素酶报告基因检测法分析miR-143-3p和IL-6R的关系,Real-time PCR检测miR-143-3p过表达对IL-6R mRNA表达的影响,Western blot检测IL-6R、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平的变化。结果 IL-6能够增加管腔形成数目和VEGF的表达,降低miR-143-3p的表达。过表达miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的管腔形成、VEGF、IL-6R和p-STAT3的表达水平,但是不影响STAT3的表达。此外还发现IL-6R是miR-143-3p的一个靶基因。结论 miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的内皮细胞血管生成,这可能是通过抑制IL-6R/STAT3通路发挥作用的。

肾移植受者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平变化及临床意义

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)在肾移植术后急性排斥反应中的变化。方法:采用固相酶标记化学发光免疫分析技术动态监测36例患者肾移植前后血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平,并结合临床资料作全面分析。结果:肾移植受者术后第1天血清TNF-α、IL-6和sIL-2R均明显升高,其中移植稳定组血清IL-6和sIL-2R第1天出现峰值后开始下降,而TNF-α则在术后5天达峰值后开始下降,至第10天均接近术前水平。急性排斥组血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平与肾功能稳定组比较,差异有显著性(P<0.05),抗排斥治疗有效后迅速下降。而环孢素A中毒组与稳定组比较,差异无显著性(P<0.05)。结论:肾移植术后受者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平的检测,可在一定程度上反映肾移植受者的免疫反应状态,并为急性排斥反应的监测和诊断提供客观依据。