利用SOS显色反应评价长寿老人源乳酸菌对4-NQO基因毒性的抑制作用

详细报道了应用SOS显色反应评价巴马长寿老人源乳杆菌和双歧杆菌抑制基因毒性物质4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)的方法。4-NQO(0.1mmol/L)与待测乳酸菌(108～109CFU/ml)37℃共培养180min,6株唾液乳杆菌和2双歧杆菌培养上清液均可抑制4-NQO的基因毒性作用,不同菌株之间在抑制能力上存在菌株差异性。其中以分离自长寿老人粪便的Lactobacillus salivarius subsp.salivarius24DB、2JC、BCHONG和Bifidobacterium animalis subsp.lactis BBMN BBMN1、BBMN2的基因毒性清除率分别为92.91%、88.55%、89.81%、80.86%和83.54%,初步讨论了益生菌对4-NQO的抑制机理。

过氧化氢对SOS显色反应的诱导——一种吸烟致癌机制的探讨

本试验用大肠杆菌(Escherichia coli)PQ37为测试系统,测试过氧化氢(H_2O_2)对 SOS 显色反应的诱导作用:并结合不同的分析对照试验推断出:H_2O_2可以进入细胞内与细胞内固有的超氧负离子自由基(O_2^(?)),在细胞内铁离子的存在下,通过 Haber-Weiss 反应,生成氢氧根自由基(OH~·),OH~·最终伤害 DNA.由于卷烟烟雾可在溶液中产生H_2O_2和 O_2^(?),所以上述机制可能是吸烟致癌的一种机制.

HPLC和SOS显色反应检测不同微生物脱除4-NQO基因毒性能力

应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和SOS显色反应测定36株益生菌脱除4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)基因毒性的能力,同时用HPLC对它们的图谱进行比较分析。研究发现,基因毒性清除率高的菌株有1株植物乳杆菌、5株双歧杆菌、干酪乳杆菌代田株、3株芽孢杆菌、2株酵母菌、7株唾液乳杆菌和一株保加利亚乳杆菌。同属于一个菌属的各个菌株基因毒性清除率之间差异不显著。图谱分析发现,只有唾液乳杆菌才产生P1,即益生菌脱除4-NQO基因毒性具有菌株特异性。研究还发现益生菌转化4-NQO为4-HAQO的能力是决定益生菌脱除4-NQO基因毒性能力大小的关键。

应用SOS显色法检测五种化学物质的遗传毒性

SOS显色反应检测法是一种新的遗传毒物细菌检测系统,选用它对杀鼠剂除鼠磷(206),二羟基乙二肟(DHG),异氟尔酮二异氰酸酯(IPDI)、铁矿尘及农药双效灵进行检测。206、DHG、IPDI、铁矿尘诱导比率(R)为0.90～1.67,<2,未达到阳性标准,说明它们在本实验条件下没有明显诱变活性,而双效灵R值为4.35(剂量为0.26～26mg/ml),提示其具有诱导TA1535/PSK1002菌株的致突变活性。

一种改良的DNA损伤检测技术——SOS微量显色法

本文介绍一种改良的SOS显色法即SOS微量显色法。它是在Quillardet标准操作程序的基础上通过引入微量板、酶标仪、改变显色剂、调整试验条件等一系列变动而完成的。并用它对十二种化学物进行了测定,从可靠性、敏感性、稳定性等方面与标准法进行了比较,发现SOS微量法不仅保留了原法的全部优点而且更为简便、快速、敏感。

AFB_(1)降解菌的分离鉴定、降解条件优化及降解产物毒性评估

【目的】从土壤样品中筛选能降解黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的菌株,并研究其对AFB_(1)的降解性质及抑制黄曲霉菌能力,评估其作为微生物降解AFB_(1)制剂的潜力,为进一步开发AFB_(1)脱毒剂提供参考依据。【方法】以香豆素为唯一碳源,筛选出1株高效的AFB_(1)降解菌,通过16S rRNA基因测序得知菌株所属种属,并利用高效液相色谱确定菌株降解AFB_(1)的特性,通过单因素试验优化该菌株降解AFB_(1)的效率,共培养分析其对黄曲霉菌的抑制作用,最后利用SOS显色反应评估菌株对AFB_(1)的脱毒效果。【结果】通过液相色谱检测,获得1株菌株GDAAS003对AFB_(1)的降解率相对较高,其16s rRNA基因序列与链霉菌Streptomyces cerasinus SR3-134(LC128347.1)的相似性高达100%,菌株降解AFB_(1)的活性物质主要存在于上清液中,可能为胞外酶。GDAAS003上清液降解AFB_(1)的最佳pH为8.0的磷酸盐缓冲液,最适反应温度为30℃。经优化,菌株GDAAS003上清液对50 ng/mL AFB_(1)96 h的降解率可达90.50%,对100 ng/mL AFB_(1)96 h的降解率为75.68%。对降解产物的遗传毒性进行检测,结果表明菌株GDAAS003降解AFB_(1)的产物未表现出毒性,同时GDAAS003能抑制玉米中黄曲霉菌合成AFB_(1)。【结论】链霉菌GDAAS003既能以较高的降解效率降解AFB_(1),又能抑制黄曲霉菌的生长,其在食品和饲料行业中有较大的商业应用前景。

植物乳杆菌H18抑制4-NQO基因毒性功能的研究

旨在评价植物乳杆菌H18对4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)基因毒性的抑制作用。利用SOS显色反应对指示菌E.coli PQ37进行验证,确定其产生β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的性能;通过测定植物乳杆菌H18与4-NQO共培养体系中β-半乳糖苷酶的活性,评价植物乳杆菌H18抑制4-NQO基因毒性的能力。结果显示,一定浓度的4-NQO能够诱导E.coli PQ37表达β-半乳糖苷酶和组成型碱性磷酸酶;当4-NQO的浓度范围在0~333.33 ng/m L时,E.coli PQ37的组成型碱性磷酸酶活性保持稳定状态(11.95~14.40 U),表明选取的4-NQO浓度范围合适,可以开展后续试验;植物乳杆菌H18与3个浓度的4-NQO共培养后,均降低了共培养体系中E.coli PQ37的β-半乳糖苷酶活性,其中植物乳杆菌H18对83.33 ng/m L的4-NQO基因毒性的抑制率在3个4-NQO设定浓度中最高,为42.87%,不属于高抗突变菌株。综上表明,植物乳杆菌H18能够降低4-NQO的基因毒性。

饮用水中非挥发性有机物的遗传毒性及脂质过氧化作用

用ＳＯＳ显色法研究了３种不同水源自来水中非挥发性有机物的遗传毒性，以大鼠肝微粒体系统为模型研究了自来水非挥发性有机物的脂质过氧化作用。结果表明，以Ｄ湖水为水源的自水来中非挥发性有机物具有遗传毒性，且能使大鼠肝微粒体的脂质过氧化作用显著增强。