SOX 17基因对胰腺癌细胞表型的影响

目的通过RNA干扰技术研究SOX 17基因对胰腺癌细胞表型的影响。方法将商品化的胰腺癌细胞Panc-1分为3组,即Si组、Nc组和Mock组。Si组加入转染试剂和SOX 17基因的siRNA,Nc组加入转染试剂和阴性对照的siRNA,Mock组只加入转染试剂、不加siRNA。采用RT-PCR和Western-blot检测干扰效率。随后通过划痕实验、Transwell小室实验和流式细胞术检测SOX 17表达下调对Panc-1细胞迁移、侵袭、周期和凋亡的影响。结果与Nc组和Mock组比较,Si组Panc-1细胞在SOX 17表达下调后迁移能力显著下降,而Nc组和Mock组间的差别无统计学意义。与Nc组和Mock组比较,Si组Panc-1细胞的侵袭、周期和凋亡并未发生显著变化。结论SOX 17基因下调可以减弱Panc-1细胞的迁移能力,但对细胞侵袭、细胞周期和细胞凋亡并无显著影响。

5-Aza-CdR对胃癌中SOX17基因表达的影响

目的检测胃癌中SOX17的表达情况,探讨5-Aza-CdR对胃癌细胞SOX17表达的影响。方法采用免疫组织化学染色(immunohistochmeistry,IHC)法检测胃癌组织及癌旁组织中SOX17蛋白的表达情况,分析其表达与患者临床病理参数的关系。实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测胃癌细胞株MGC-803、MKN-45、AGS及正常胃黏膜细胞株GES-1中SOX17基因mRNA和蛋白的表达情况。甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测胃癌细胞系SOX17基因启动子区甲基化情况。CCK-8法和流式细胞仪分别检测5-Aza-CdR对AGS细胞增殖和细胞周期的影响。结果与癌旁组织相比,胃癌组织SOX17蛋白阳性表达率明显降低(癌旁组织80.48%vs.胃癌组织19.51%,P<0.001),与胃癌患者性别、年龄、临床分期、分化程度、是否伴脉管癌栓无关。SOX17基因mRNA和蛋白在各胃癌细胞系表达明显降低(P<0.05),且在AGS细胞中表达最低。SOX17基因启动子区在AGS和MKN45细胞中均完全甲基化,MGC-803细胞部分甲基化,GES-1细胞完全非甲基化。去甲基化药物5-Aza-CdR可下调甲基转移酶的表达,逆转SOX17基因甲基化,使其mRNA和蛋白表达上调。5-Aza-CdR还可抑制AGS细胞的增殖并使细胞阻滞于G0/G1期。结论5-Aza-CdR可逆转胃癌细胞SOX17基因甲基化,上调其mRNA和蛋白表达,从而抑制胃癌的发生发展。

乳腺癌患者血浆循环DNA中Sox17基因甲基化检测的临床意义

背景与目的:在乳腺癌发生、发展过程中,甲基化异常是导致抑癌基因失活的重要机制,是一种可用于肿瘤诊断及预后判断、有价值的生物标志物。本研究旨在通过检测乳腺癌组织及其相应的血浆循环DNA中Sox17基因的甲基化状况,探讨其在乳腺癌早期诊断和预后判断方面的应用价值。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific-PCR,MSP)法,对86例乳腺癌组织、36例乳腺良性肿瘤的癌旁正常组织及其配对的血浆循环DNA中Sox17基因启动子甲基化进行检测,并结合乳腺癌的主要临床病理特性进行分析。结果:86例乳腺癌组织中Sox17基因启动子的甲基化率为77.9%(67/86),与其相应血浆循环DNA中Sox17基因启动子的甲基化率为61.6%(53/86),36例癌旁正常乳腺组织及血浆中均未检测到Sox17基因异常甲基化。患者血浆循环DNA中Sox17基因启动子的甲基化与肿瘤组织中该基因的甲基化显著相关(r=0.502,P=0.000)。在乳腺癌组织标本中Sox17基因甲基化率与患者肿瘤分期(χ2=6.18,P=0.041)、淋巴结转移(χ2=13.54,P=0.001)显著相关,在血浆标本中,Sox17基因甲基化率与患者肿瘤分期(χ2=27.06,P=0.000)、肿瘤大小(χ2=9.65,P=0.007)及淋巴结转移(χ2=20.80,P=0.000)显著相关,与患者年龄、组织学分级及ER、PR、HER-2/neu等指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Sox17基因启动子甲基化在乳腺癌的发生、发展中起着重要作用,可能与乳腺癌的预后相关。血浆中Sox17基因甲基化,是一个有潜在应用价值的生物标志物。

Sox17基因甲基化状态与贲门腺癌发生发展关系研究

目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织中Wnt通路相关因子Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况,探讨其与贲门腺癌发生的关系。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)及RT-PCR的方法检测126例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况。结果:在126例贲门腺癌组织中,Sox17基因的甲基率为86.5%(109/126),明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.001);癌组织中Sox17基因的甲基化率与贲门腺癌的TNM分期及淋巴结转移均无关;癌组织中该基因mRNA的阳性表达率为58.7%(74/126),明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.001)。其mRNA阳性表达率与该基因的甲基化状态呈明显负相关(P<0.01)。结论:Sox17基因在贲门腺癌中呈高甲基化状态。

肝癌细胞内Sox17基因表达水平与细胞迁移、侵袭力的相关性研究

目的:从基因表达水平上探讨肝肿瘤细胞内Sox17的mRNA表达量与细胞迁移、侵袭力的相关性。方法:收集4种肝肿瘤细胞HepG2、MHCC-97L、LM3、SK-Hep-1及一种非肿瘤肝上皮细胞QSG7701,Real-Time PCR法检测细胞内Sox17、CTTN基因的mRNA表达水平,细胞划痕和Transwell小室侵袭实验检测肝肿瘤细胞迁移、侵袭力。对Sox17基因的表达水平与CTTN的表达量及细胞划痕、Transwell小室侵袭的实验结果进行秩相关检验。结果:与非肿瘤细胞相比,肿瘤细胞内Sox17表达水平普遍较低,CTTN的表达水平较高;在4种肝肿瘤细胞中,Sox17基因的表达水平与CTTN的mRNA的表达水平及细胞划痕区域细胞生长速度、Transwell小室穿膜细胞数的统计结果呈负相关,秩相关系数rs=-1。结论:肝肿瘤细胞内Sox17基因的表达水平的高低与细胞的迁移、侵袭力呈负相关。

贲门腺癌中Sox17蛋白表达及其与β-catenin、cyclin D1蛋白相关性研究

目的:检测贲门腺癌中Sox17蛋白表达及其与β-catenin和cyclin D1蛋白的相关性,探讨三者的表达状态与贲门腺癌发生发展的关系。方法:应用免疫组织化学法检测78例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中Sox17、β-catenin及cyclin D1蛋白的表达情况及其与临床病理指标的关系。结果:在贲门腺癌组织中,Sox17、β-catenin和cyclin D1的阳性表达率分别为47.4%(37/78)、83.3%(65/78)和70.5%(55/78);在癌旁非肿瘤组织中,三者的阳性表达率分别为69.2%(54/78)、62.8%(49/78)和44.9%(35/78),差异均有统计学意义(P<0.01)。Sox17蛋白的阳性表达率与β-catenin和cyclin D1的阳性表达率均呈负相关(r=-0.264,P<0.05;r=-0.287,P<0.05);β-catenin与cyclin D1的阳性表达率呈显著正相关(r=0.913,P<0.05)。Sox17在Ⅰ、Ⅱ期的阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin、cyclin D1的阳性表达率与淋巴结转移状态有关(P<0.05)。结论:Sox17蛋白在贲门腺癌中低表达,其可能通过异常活化Wnt/β-catenin信号转导通路,上调β-catenin蛋白及其下游靶蛋白cyclin D1的表达水平参与了贲门腺癌的发生发展。

USP39、EZH2及Sox17在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨USP39、EZH2和Sox17在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法选取90例乳腺癌患者根据临床病理特征不同,分为原位癌34例、早期浸润癌41例和浸润癌15例。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定3组患者的肿瘤组织中USP39、EZH2和Sox17,microRNA自噬基因表达差异。结果浸润癌组患者的的肿瘤组织中USP39、EZH2信使核糖核酸(mRNA)表达量高于原位癌组及早期浸润癌组患者,Sox17 mRNA表达量低于原位癌组及早期浸润癌组患者;miR-29a、miR-149表达量高于原位癌组及早期浸润癌组患者,miR-125b、miR-21和miRNA-26a表达量低于原位癌组及早期浸润癌组患者;自噬基因LC3mRNA表达量高于原位癌组及早期浸润癌组患者,Beclin1、ATG2B和ATG4G mRNA表达量低于原位癌组及早期浸润癌组患者。乳腺癌患者肿瘤组织USP39、EZH2和Sox17 mRNA表达量与相关microRNA表达量、自噬基因表达量存在直接相关关系。结论乳腺癌组织中USP39、EZH2表达升高,Sox17表达量降低且与乳腺癌细胞的增殖、凋亡有关。

西伯利亚鲟Sox17基因cDNA全长的克隆及其表达分析

采用RACE技术获得西伯利亚鲟(Acipenser baerii)Sox17基因cDNA全长,序列分析表明,西伯利亚鲟Sox17基因cDNA全长2 671 bp,包括588 bp的5'端非翻译区,901 bp的3'端非翻译区和编码393个氨基酸残基的1 183 bp开放阅读框。氨基酸序列比对显示,该基因具较高的保守性,与塞内加尔多鳍鱼(Polypterus senegalus)的相似度最高为72%。系统进化分析表明,西伯利亚鲟与塞内加尔多鳍鱼聚为一支,且支持率为95%。以延伸因子efla(elongation factor 1-alpha)作为内参基因,对Sox17基因在西伯利亚鲟各组织的相对表达量进行分析,发现Sox17基因在不同组织中均有表达,但表达具有明显的组织差异性。在脑中表达量最高,而在肾、血液、眼、肠和胸鳍5个组织中表达量均较低。同时,Sox17基因在西伯利亚鲟不同发育时期均有表达,但表达具有一定的时间差异性。在宽神经板期的表达量高,相当于表达量最低点11日龄仔鱼的167倍。本研究为量化西伯利亚鲟胚胎发育分化过程中相关基因提供了参照工具,同时可为今后深入研究西伯利亚鲟Sox17在胚胎发育过程中的作用提供基础参考资料。

SOX17基因多态性和中国汉族人群颅内动脉瘤的相关性研究

目的探讨分析SOX17基因多态性和中国汉族人群颅内动脉瘤(IA)的相关性。方法选择2018年1月至2019年8月台州市立医院收治的颅内动脉瘤患者161例作为IA组,选择同期在台州市立医院健康体检的健康志愿者150名作为对照组。采集两组受试者外周静脉血,通过PCR-荧光探针法检测SOX17基因各位点基因型,分析SOX17基因各位点基因多态性与颅内动脉瘤的相关性。结果两组受试者rs9298506、rs1072737位点基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)。IA患者破裂组与未破裂组患者SOX17基因rs9298506位点基因型、rs1072737位点基因型及等位基因分布差异有统计学意义(P<0.001),其中破裂组患者A等位基因分布显著低于未破裂组,G等位基因分布显著高于未破裂组(P<0.05)。结论SOX17基因rs9298506及rs1072737位点多态性与中国汉族人群颅内动脉瘤发生及动脉瘤的破裂有关,其中rs9298506位点A基因是汉族人群颅内动脉瘤的保护性因素,而rs1072737位点G等位基因是汉族人群颅内动脉瘤的危险因素。

基于调节Notch信号通路的Jagged1、 Sox17与脑缺血后血管新生的研究进展

缺血性脑血管疾病的预后与血管新生关系密切。尖端细胞和茎细胞的动态平衡是保证血流灌注的关键。 Jag-ged1和Sox17介导的Nocth通路调节脑缺血后的功能性血管生成。本文将其近年研究进展做一综述。

食管鳞状细胞癌中SOX17、MACC1、c-Met的表达及其临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中SOX17、MACC1和c-Met的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测232例ESCC及癌旁正常黏膜组织中SOX17、MACC1、c-Met的表达,分析三者表达与ESCC临床病理特征的相关性及对患者预后的影响。结果SOX17在ESCC中的阳性率为18.1%(42/232),低于正常食管黏膜中的阳性率73.3%(170/232);SOX17表达与ESCC脉管侵犯(P=0.017)和神经侵犯(P=0.014)相关。MACC1在ESCC中的阳性率为57.3%(133/232);MACC1表达与ESCC肿瘤直径≥3 cm(P=0.039)和AJCC分期高(P=0.020)相关。c-Met在ESCC中的阳性率为54.3%(126/232);c-Met表达与ESCC发生远处转移相关(P=0.045)。MACC1表达与c-Met表达呈正相关(P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析发现,c-Met表达(P=0.021)与ESCC患者的总生存期相关,c-Met高表达的患者预后不良。结论在ESCC中,SOX17可能抑制肿瘤侵袭,MACC1可通过调控c-Met表达促进肿瘤进展,且c-Met有望成为ESCC潜在的预后标志物。

慢性髓系白血病SOX17基因表达及甲基化的临床研究

目的:分析慢性髓系白血病(CML)患者SOX17基因表达、启动子甲基化及其临床的相关性。方法:使用RQ-PCR和RQ-MSP技术分别检测SOX17转录本及启动子甲基化水平。结果:34例CML患者中SOX17转录本含量明显低于30例对照(P=0.001);接收者操作特征曲线显示SOX17表达的CML曲线下面积为0.748(P=0.001);SOX17和bcr/abl转录本水平呈正相关趋势(r=0.439,P=0.068)。3例(4%)CML患者出现SOX17启动子高甲基化改变,与32例对照无统计学差异。SOX17表达与启动子甲基化程度无相关性。结论:SOX17表达下调是CML的一个常见分子事件、对CML疾病诊断具有辅助价值;SOX17表达下调不是启动子甲基化所致。

转录因子SOX17在子宫内膜相关疾病中的作用

转录因子SRY-box containing gene 17(SOX17)隶属于SOX基因家族F亚族,定位于人8号染色体q11.23,已知SOX17在胚胎发育过程中内胚层形成、干细胞分化、神经突胶质细胞发展及血管生成等方面起着十分重要的作用。大量证据表明SOX17作为一个新的抑癌基因与许多细胞的癌变过程密切有关,SOX17基因启动子序列的甲基化导致了SOX17基因表达含量的下降和WNT/β-catenin信号通路的持续激活,并进而诱导细胞周期因子和致癌基因的表达。最新研究发现SOX17在子宫内膜的表达与其生理功能有关,SOX17表达水平的减少不仅与女性的不孕有关,与许多常见的妇科相关疾病如宫颈上皮内瘤变、宫颈癌、子宫内膜癌、子宫内膜异位症、子宫腺肌病存在着密切的关系。阐明SOX17在子宫内膜中的表达调控机理和作用有可能为诊断、治疗内膜相关疾病提供新的诊断标志物与治疗靶点。

SOX17在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中SOX17的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测2014年1月至2016年12月经手术切除的35例NSCLC组织及10例对应癌旁组织中SOX17 mRNA的水平;免疫组化法检测2001年1月至2006年4月有随访资料的98例NSCLC组织中SOX17蛋白的表达情况,分析SOX17表达与NSCLC临床病理特征和总生存期(OS)的关系;提取癌症基因组图集(TCGA)数据库中SOX17在NSCLC组织中表达的相关数据进行整合,采用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析SOX17表达与OS的关系。结果 QPCR结果显示,SOX17 mRNA在NSCLC组织中的表达量为0. 87±0. 38,低于癌旁组织的1. 90±0. 40(P<0. 01)。TCGA中肺癌队列的高通量RNA测序结果显示,SOX17 mRNA在NSCLC组织中的表达量为4. 85±1. 13,低于癌旁组织的7. 96±1. 01(P<0. 01)。免疫组化检测显示,98例NSCLC组织中SOX17蛋白高表达28例(28. 6%),低表达70例(71. 4%),差异有统计学意义(P<0. 05)。SOX17表达与临床分期和肿瘤大小有关(P<0. 05),而与性别、年龄、淋巴结转移和病理类型无关(P> 0. 05)。生存分析显示,98例患者中SOX17高表达患者的中位OS大于96. 0个月,高于低表达者的67. 0个月(P<0. 05); 77例腺癌患者中SOX17高表达者的中位OS大于96. 0个月,高于低表达者的57. 0个月(P<0. 05),而21例鳞癌患者中SOX17高表达和低表达患者的中位OS分别为54. 0个月和57. 0个月(P>0. 05)。公共数据库生存分析显示,SOX17高表达患者的中位OS为131. 0个月,高于低表达患者的54. 0个月(P<0. 01); 673例肺腺癌患者中SOX17高表达者的中位OS为162. 0个月,高于低表达者的71. 0个月(P<0. 01); 271例肺鳞癌患者中SOX17高表达者和低表达者的中位OS分别为59. 0个月和53. 0个月(P>0. 05)。结论在NSCLC组织中SOX17的mRNA和蛋白呈低表达状态,SOX17表达与临床分期和肿瘤大小有关,SOX17高表达者的预后较好。

特发性肺动脉高压相关SOX17基因新突变分析

目的:寻找特发性肺动脉高压相关SOX17基因新突变。方法:收集58例特发性肺动脉高压患儿和200名健康对照者的临床资料及血标本,纯化基因组DNA。测序分析研究对象的SOX17基因以发现致特发性肺动脉高压突变。利用在线计算机程序分析突变氨基酸在物种进化上的保守性及其致病性。结果:在2例特发性肺动脉高压患儿中各发现1种SOX17基因新突变,分别为c.232T>A和c.281A>T突变,即p.Trp78Arg和p.His94Leu突变。该突变不存在于200名健康对照者。数据分析表明突变氨基酸在多物种进化上完全保守且均具有致病性。结论:特发性肺动脉高压相关SOX17基因新突变对特发性肺动脉高压患者的遗传咨询及精准防治具有潜在的临床意义。

Sox17和MBP在未成熟大鼠感染性脑损伤中的表达

目的:了解感染所引起的新生大鼠感染性脑组织中Sox17和(髓鞘碱性磷酸酶)MBP的表达。方法:将64只2日龄SD大鼠随机分为对照组、实验组。实验组生后第2~6 d持续腹腔注射脂多糖(LPS)每日0.6 mg/kg(0.01 rnl/g)。对照组则按照相同的注射方式及注射剂量,给予生理盐水,建立新生大鼠脑白质损伤模型。注射后按观察时间点不同分为1 d、3 d、7 d、15 d,4个亚组(n=8)。处死大鼠取出脑白质,HE染色观察脑白质区病理变化,Western Blot法测定各组脑组织中Sox17和MBP蛋白的表达,RT-RCR法检测Sox17和MBPmRNA的表达变化。结果:实验组大鼠生长发育缓慢,HE染色显示脑白质区出现组织水肿,部分核固缩、核碎裂。PCR和Western Blotting结果发现Sox17在生后1 d开始表达,7 d达高峰,随后下降,各时间点实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。MBP在实验组的表达显著下降,各时间点实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:生后感染可导致新生大鼠脑白质损伤,MBP表达减少,Sox17表达明显升高,提示Sox17剂量的升高对感染后新生大鼠脑组织可能具有保护性修复作用。

尼莫司汀对三四期宫颈癌患者肿瘤组织中P53及SOX17表达的影响

目的探究尼莫司汀对三四期宫颈癌患者肿瘤组织中P53及SOX17表达影响。方法锦州医科大学附属第三医院肿瘤科收治的三四期宫颈癌患者74例,根据随机对照表分为对照组和治疗组,其中治疗组37例,对照组37例,2组患者入院后均进行常规入院检查,实施常规治疗;对照组基于每周期第1天吉西他滨1000 mg/m2静脉滴注、顺铂75 mg/m2静脉滴注,第8天给予吉西他滨1000 mg/m2静脉滴注;试验组在对照组的基础上于第1、3、5周期的第1天给予注射用盐酸尼莫司汀2-3 mg/kg。2组均以21 d为1个周期,重复6个周期。治疗结束后对比分析2组临床疗效、肿瘤组织P53及SOX17表达情况、不良反应发生率以及随访复发率和死亡率。结果试验组总有效率为89.19%,显著高于对照组的64.86%（P〈0.05）,治疗后与对照组相比,试验组P53以及SOX17阳性表达率较高（P〈0.05）。2组不良反应发率相比,差异无统计学意义;1年后随访试验组复发率13.51%,死亡率5.41%;对照组复发率35.14%,死亡率21.62%,与对照组相比,试验组复发率以及死亡率较低（P〈0.05）。结论尼莫司汀对三四期宫颈癌患者组织中P53及SOX17的基因表达具有调控作用,能够抑制癌细胞的浸润和转移,改善临床疗效与预后,延长患者生存时间。

SOX6与SOX17在口腔鳞状细胞癌的表达及临床意义

目的应用生物信息分析和实验验证探讨转录因子性别决定区Y-box 6(SOX6)与转录因子性别决定区Y-box 17(SOX17)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及意义。方法获取癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载的OSCC组织及相应的癌旁非瘤组织的转录组数据,分析SOX6、SOX17的表达水平与OSCC发生发展及其预后的相关性。收集口腔鳞状细胞癌组织及相应的癌旁非瘤组织标本,应用免疫组化SP法分析SOX6与SOX17在OSCC中的表达及其相关性。利用蛋白-蛋白互作(PPI)网络、基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析探讨与SOX6相关的基因、富集通路及其对OSCC发生发展的影响。结果生物信息分析显示,在OSCC组织中SOX6、SOX17的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),SOX6、SOX17在OSCC中有较高的诊断价值(曲线下面积(AUC)分别为0.972、0.731),且其高表达与患者的良好预后相关,Cox回归分析显示,TNM分期、SOX6、SOX17表达水平是OS的独立预后因素(P<0.05)。免疫组化分析显示,SOX6在OSCC组织中含量与肿瘤浸润深度密切相关(P<0.05),Spearman分析显示,SOX6、SOX17表达水平呈正相关(r=0.297,P<0.05)。通过PPI网络获得互作蛋白,GO与KEGG结果显示SOX6可能与FAK信号通路、Notch信号通路和肿瘤细胞的增殖迁移等关系密切。结论SOX6、SOX17在OSCC组织中呈低表达,是OSCC潜在的诊断及预后标记物。

完全性肺静脉异位引流潜在致病基因PDX1突变对其基因功能的影响

目的·采用全外显子测序技术筛查完全性肺静脉异位引流(total anomalous pulmonary venous connection,TAPVC)的可能致病基因,并对其功能进行验证。方法·选择2014—2019年在上海交通大学医学院附属新华医院及上海儿童医学中心确诊的100例TAPVC患儿(患儿组)以及120例健康儿童(对照组)为研究对象。收集2组儿童的血液样本,抽提全血基因组DNA并行外显子测序,以筛查TAPVC的潜在致病基因。通过Mutation Taster、SIFT、PolyPhen-2网站筛选致病基因的有害突变位点,并行Sanger测序。构建PDX1野生型(野生组)及突变型(突变组)质粒,转染入HUVEC细胞后,分别采用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测突变对PDX1的mRNA和蛋白水平的影响。采用STRING数据库进行蛋白与蛋白之间的相互作用分析,并采用qPCR研究PDX1调节的下游基因的表达。结果·在TAPVC患儿中发现致病基因为PDX1, Sanger测序显示该基因存在2个新发突变,即c.C237A(P33T)和c.C237G(P33A)。与野生组相比,2个突变组(CA组、CG组)的PDX1 mRNA水平没有显著变化,但蛋白相对表达量有明显增加,即分别是野生组的2.9倍和3.4倍(P=0.000,P=0.001)。蛋白质相互作用分析的结果显示,PDX1与SOX17相关联;且qPCR结果显示,PDX1过表达可下调HUVEC细胞中SOX17的表达。结论·PDX1的2个新发错义突变可影响其转录后翻译,且PDX1可能是通过调控SOX17来参与TAPVC的发生与发展。

乳腺癌中Sox17、β-连环蛋白和细胞周期蛋白D1的表达及其临床意义

目的 探讨Sox17蛋白、β-连环蛋白（β-catenin）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）在浸润性乳腺癌与良性乳腺增生组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学技术分别检测92例浸润性乳腺癌与60例良性乳腺增生组织中Sox17、β-catenin和Cyclin D1蛋白的表达,分析三者表达间的相关性及其与乳腺癌临床病理参数之间的关系.结果 乳腺癌组织中Sox17、β-catenin及Cyclin D1的阳性表达率分别为38.0％ （35/92）、70.7％ （65/92）、68.5％ （63/92）,与良性乳腺增生组织中的75.0％ （45/60）、35.0％ （21/60）和26.7％ （16/60）间差异均有统计学意义（P＜0.01）;且Sox17的阳性表达与β-catenin和Cyclin D1的异常表达呈负相关（r=-0.675,P＜0.01和r=-0.673,P＜0.01）,β-catenin与Cyclin D1间的异常表达呈正相关（r=0.693,P＜0.01）;Sox17表达阴性与肿瘤分期、淋巴结转移及组织学分级显著相关（P＜0.01）;β-catenin和Cyclin D1的异常表达均与肿瘤分期、淋巴结转移、雌激素受体（ER）及孕激素受体（PR）阳性显著相关（P＜0.05）.结论 Sox17在乳腺癌中表达降低与β-catenin和Cyclin D1表达增加显著相关,并且三者的表达与某些乳腺癌重要临床病理参数显著相关,提示三者在乳腺癌发生、发展过程中发挥重要作用.