血清外泌体中lncRNA SOX21-AS1的表达在宫颈癌诊断中的临床价值

目的检测血清外泌体中SOX21-AS1的表达水平,评价其在宫颈癌中的诊断价值。方法选取130例宫颈癌患者作为观察组,包括宫颈鳞癌患者98例(高分化鳞癌30例,中分化鳞癌41例,低分化鳞癌27例)、宫颈腺癌26例、腺鳞癌6例。选取同期健康体检女性50例作为对照组。采用低温差速离心法提取外泌体,qRT-PCR法检测所有患者血清及血清外泌体SOX21-AS1的水平。结果宫颈癌患者血清中SOX21-AS1、外泌体中SOX21-AS1水平,均较健康对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌患者血清中与血清外泌体的SOX21-AS1水平,差异无统计学意义(P>0.05)。血清外泌体中SOX21-AS1水平的ROC预测AUC(0.9543),高于血清中SOX21-AS1水平的ROC预测AUC(0.9267),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清外泌体中的SOX21-AS1水平可以作为宫颈癌临床诊断的生物标志物。

荞麦七水提物通过调控LncRNA SOX21-AS1/miR-451a通路抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的机制

目的探索荞麦七水提物对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测胃癌组织长链非编码RNA(LncRNA)SOX21反义RNA1(SOX21-AS1)和miR-451a表达。用10 mg/ml、20 mg/ml、40 mg/ml荞麦七水提物处理胃癌细胞MKN45,qPCR检测LncRNA SOX21-AS1和miR-451a表达,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达。在MKN45细胞中转染si-SOX21-AS1,评估抑制SOX21-AS1表达在细胞增殖、迁移、侵袭中的作用。生物信息学结合双荧光素酶报告实验分析LncRNA SOX21-AS1与miR-451a的靶向关系。在细胞中转染pcDNA-SOX21-AS,并使用40 mg/ml荞麦七水提物处理,观察LncRNA SOX21-AS1过表达对荞麦七水提物诱导的胃癌MKN45细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中LncRNA SOX21-AS1表达明显上调,miR-451a表达显著下调(P<0.05)。荞麦七水提物明显降低LncRNA SOX21-AS1表达量、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白水平,显著提高miR-451a表达量、细胞生长的抑制率、p21、p27蛋白水平,且呈浓度依赖性(P<0.05)。抑制LncRNA SOX21-AS1表达明显增加MKN45细胞抑制率、p21蛋白表达量,显著减少迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量(P<0.05)。LncRNA SOX21-AS1靶向调控miR-451a的表达。LncRNA SOX21-AS1过表达逆转了荞麦七水提物对胃癌MKN45细胞SOX21-AS1表达、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用及对miR-451a表达、抑制率、p21蛋白表达的促进作用。结论荞麦七水提物通过调控LncRNA SOX21-AS1/miR-451a通路抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭。

长链非编码RNA SOX21-AS1启动子区甲基化水平对宫颈癌的诊断价值

目的探讨宫颈癌患者癌细胞中长链非编码RNA(lncRNA)SOX21-AS1基因启动子区甲基化水平变化及其对宫颈癌的诊断价值。方法选择2016年8月至2018年8月在郑州大学第三附属医院接受宫颈液基细胞学检查的患者43例为研究对象。根据检查结果将患者分为癌症组(细胞学和组织学同时诊断为宫颈鳞状细胞癌,n=23)和非癌症组(细胞学诊断正常且人乳头癌病毒检测为阴性,n=20)。采用焦磷酸测序技术检测宫颈癌细胞中lncRNA SOX21-AS1基因启动子区甲基化水平,并应用受试者工作特征曲线评估其对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌患者的年龄、肿瘤直径、组织学分级、淋巴结转移及肌层浸润深度与lncRNA SOX21-AS1基因甲基化水平均无关(P>0.05),患者的国际妇产科联盟分期与lncRNA SOX21-AS1基因甲基化水平有关(P<0.05)。宫颈癌组患者lncRNA SOX21-AS1基因启动子区甲基化水平显著低于非癌症组(P<0.05)。宫颈癌患者lncRNA SOX21-AS1基因启动子区甲基化水平与宫颈癌的发生呈负相关(r=-0.528,P<0.05)。lncRNA SOX21-AS1基因启动子区低甲基化诊断宫颈癌的曲线下面积为0.846,敏感度为100.0%,特异度为69.2%。结论lncRNA SOX21-AS1基因启动子区低甲基化对宫颈癌具有良好的诊断价值。

LncRNA SOX21-AS1靶向调控miR-202-5p影响结直肠癌细胞生物学行为的实验研究

背景:长链非编码RNA(lncRNA)可通过调控miRNA的表达来参与肿瘤发生、发展过程,但lncRNA在结直肠癌发展和转移中的分子机制尚未阐明。目的:探讨lncRNA SOX21-AS1通过调控微小RNA-202-5p(miR-202-5p)的表达影响结直肠癌细胞生物学过程的分子机制。方法:以SOX21-AS1小分子干扰RNA(si-SOX21-AS1)、miR-202-5p模拟物及其抑制剂转染结直肠癌HCT116、SW480细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株SOX21-AS1、miR-202-5p mRNA表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况,双萤光素酶报告实验检测SOX21-AS1与miR-202-5p的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白1(cyclin D1)、MMP-2、cleaved caspase-3蛋白表达。结果:结直肠癌细胞中SOX21-AS1 mRNA表达显著高于人正常结肠黏膜上皮细胞(P<0.05),miR-202-5p mRNA表达显著降低(P<0.05)。沉默SOX21-AS1或上调miR-202-5p表达可显著抑制HCT116、SW480细胞增殖、迁移和侵袭,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),并可抑制cyclin D1、MMP-2蛋白表达(P<0.05),促进cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。SOX21-AS1可靶向结合miR-202-5p,并可负向调控miR-202-5p的表达和活性;抑制miR-202-5p表达可逆转沉默SOX21-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结论:沉默SOX21-AS1表达可通过上调miR-202-5p的表达从而抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,并可诱导细胞凋亡。

lncRNA SOX21-AS1的表达对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及机制研究

目的 探讨长链非编码RNA SRY-box转录因子21反义RNA 1(lncRNA SOX21-AS1)对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及其作用机制。方法 选取卵巢癌组织和其邻近的癌旁组织各75例,另选取卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、OVCR3和人卵巢正常上皮细胞HOSE作为实验对象,实时荧光定量PCR法检测lncRNA SOX21-AS1在组织和细胞中的表达。根据是否干扰lncRNA SOX21-AS1表达将细胞分为si-NC组和si-SOX21-AS1组。MTS实验和平板克隆实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞转移能力,TOP/FOP荧光素酶实验和Western blot实验检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性和相关蛋白表达水平。结果 与癌旁组织相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织中的表达上调(P<0.05)。与卵巢正常上皮细胞HOSE相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌细胞中的表达上调,SKOV3中最高(P<0.05)。与FIGO分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移的患者相比,FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移患者lncRNA SOX21-AS1相对表达水平升高(P<0.05)。干扰lncRNA SOX21-AS1表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力、抑制Wnt/β-catenin信号通路活性并降低Wnt/β-catenin信号通路各蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织和细胞中高表达,干扰lncRNA SOX21-AS1的表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力。

LncRNA SOX21-AS1在宫颈癌中的表达及临床诊断价值

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)SOX21-AS1在宫颈癌中的表达及其临床诊断价值。方法收集宫颈脱落细胞学标本共43例,其中正常23例,宫颈癌20例。采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)法检测所有标本中LncRNA SOX21-AS1的表达水平,分析LncRNA SOX21-AS1的表达与宫颈癌患者各项临床病理特征的关系及其对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌组LncRNA SOX21-AS1的表达水平显著高于正常组,差异有统计学意义(P=0.000)。随患者年龄增大、肿瘤直径增加、FIGO分期增高、浸润深度增加及出现淋巴结转移,LncRNA SOX21-AS1表达量呈增高趋势,其中按淋巴结是否转移及FIGO分期分组,LncRNA SOX21-AS1表达量组间差异具有显著性(P=0.001;P=0.025);与之相反,随组织学分级增高,LncRNA SOX21-AS1表达下降,组间差异有统计学意义(P=0.008)。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析LncRNA SOX21-AS1表达对宫颈癌的诊断价值结果显示,ROC曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.911(95%CI:0.826~0.996,P=0.000),当约登指数取最大值时,LncRNA SOX21-AS1表达水平诊断宫颈癌的敏感性为70%,特异性为100%。结论 LncRNA SOX21-AS1在宫颈癌中显著高表达,具有较高的临床诊断价值,有望成为宫颈癌诊疗新的生物标志物。

lncRNA FOXD3-AS1靶向miR-128-3p调控缺氧复氧肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的分子机制研究

目的:探讨lncRNA FOXD3-AS1靶向miR-128-3p调控缺氧复氧肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的分子机制研究。方法:将人正常结直肠黏膜上皮细胞系FHC分为NC组、缺氧/复氧(H/R)组、si-NC+H/R组、si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组、pcDNA组、pcDNA-lncRNA FOXD3-AS1组、miR-NC+H/R组、miR-128-3p+H/R组、anti-miR-NC+si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组、anti-miR-128-3p+si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞lncRNA FOXD3-AS1和miR-128-3p表达水平。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力。流式细胞术检测细胞凋亡。试剂盒分别检测细胞中活性氧(ROS)活性、丙二醛(MDA)含量和3-硝基酪氨酸(3-NT)水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、Bax蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD3-AS1和miR-128-3p靶向关系。结果:与NC组比较,H/R组FHC细胞中lncRNA FOXD3-AS1表达水平显著提高,miR-128-3p表达水平显著降低(P<0.05),而且H/R处理使细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高,氧化应激水平显著升高(P<0.05);与si-NC+H/R组比较,si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组FHC细胞中lncRNA FOXD3-AS1表达水平显著降低,细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低,氧化应激水平显著降低(P<0.05)。与miR-NC+H/R组比较,miR-128-3p+H/R组FHC细胞中miR-128-3p表达水平显著降低,细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低,氧化应激水平显著降低(P<0.05)。与anti-miR-NC+si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组比较,anti-miR-128-3p+si-lncRNA FOXD3-AS1+H/R组FHC细胞中miR-128-3p表达水平显著降低,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高,氧化应激水平显著升高(P<0.05)。结论:抑制lncRNA FOXD3-AS1表达水平可通过上调miR-128-3p抑制H/R肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤。