大鼠三叉神经感觉核簇内SP受体及三叉神经节内SP样阳性终末和SP受体分布的免疫组织化学研究

本文用免疫组织化学方法对三叉神经感觉核簇内的SP受体及三叉神经节内的SP样阳性终末和SP受体的分布状态进行了研究。三叉神经感觉主核内的SP受体样阳性胞体和树突主要见于其背侧部和腹侧部。三叉神经脊束核的各亚核内均可见到SP受体样阳性的结构:吻侧亚核的SP受体样阳性胞体和树突主要见于其中央部;极间亚核的周边部仅有少量SP受体样阳性的胞体和树突;尾侧亚核内SP受体样阳性的胞体和树突最密集,且主要位于Ⅰ、Ⅱ层。三叉神经节内可见SP样阳性终末呈丛状或环状包绕在阴性胞体周围,也可见到少量散在的SP受体样阳性的胞体。SP受体样免疫反应阳性产物位于阳性胞体和树突的膜上。

豚鼠耳蜗微血管SP受体阳性结构的观察

目的探讨ＳＰ（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ）调节耳蜗血流的作用机理。方法本研究采用免疫组织化学ＡＢＣ技术结合葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－镍染色法，观察豚鼠耳蜗微血管ＳＰ受体的分布状态。结果豚鼠耳蜗基底膜各圈均可见ＳＰ受体阳性的微血管，阳性结构主要位于血管内膜，呈密度增高的线状分布。结论作用于耳蜗微血管内膜ＳＰ受体的ＳＰ，主要来源于血液及内皮细胞自身。

大鼠腰骶髓后连合核SP受体免疫阳性神经元与SP免疫阳性终末的突触联系

应用免疫组织化学双重反应的方法研究了大鼠腰骶髓后连合核内ＳＰ受体免疫阳性神经元在光、电镜下的特征及其与ＳＰ免疫阳性终末的突触联系。结果证明，ＳＰ免疫阳性终末和ＳＰ受体阳性胞体及树突均密集分布于后连合核区。在光镜下双重免疫反应阳性结果显示二者重叠分布，且可见大量的ＳＰ样免疫阳性终扣与ＳＰ受体阳性胞体或树突紧密接触。电镜下证明ＳＰ受体免疫阳性产物不仅位于突触后部位而且分布于胞体和树突的非突触部位，有４２％的ＳＰ受体阳性树突与ＳＰ阳性终末形成突触连接。在此未发现ＳＰ受体免疫阳性终末。通过一系列实验证明：腰骶髓后连合核神经元接受由ＳＰ介导的外周伤害性信息的传入，且其主要为盆腔脏器内脏初级传入成分。

肺癌外周血中EGFR mRNA、SP-D mRNA、LUNX mRNA表达的临床意义

目的:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺癌患者肿瘤组织和外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达;检测40例肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例良性肺疾病患者和10名健康人外周血作为对照。结果:40例肺癌患者病理组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达率为77.5%(31/40)、100%(40/40)、100%(40/40),外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达阳性率分别为55.0%(22/40)、52.5%(21/40)和57.5%(23/40);对照组中15例肺良性病变患者病理组织中EGFRmRNA表达率为13.3%(2/15),无SP-DmRNA和LUNXmRNA表达,15例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达。结论:EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA作为检测肺癌组织及肺癌外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性;三者表达与肺癌TNM分期、组织学类型和癌细胞分化程度关系密切。

哮喘豚鼠肺内SP受体分布的免疫组织化学研究

为探讨哮喘豚鼠肺内 SP受体 (SPR)的表达及分布 ,将豚鼠分成哮喘组和对照组 ,利用 SPR特异性抗血清、免疫组织化学 ABC法、葡萄糖氧化酶 - DAB-镍染色和计算机图象分析技术。结果显示 :与对照组相比 ,哮喘豚鼠肺内支气管至终末细支气管 SPR免疫反应 (SPR- IR)阳性产物显著浓密 ,以平滑肌层和粘膜层为著。此外 ,在哮喘组豚鼠而不是对照组豚鼠的呼吸性细支气管壁也有 SPR- IR阳性分布。结果表明

针刺治疗偏头痛的机制研究进展

偏头痛是一种常见的失能性原发性头痛,严重影响患者的工作及生活。针刺对偏头痛预防性治疗及急性期治疗在临床上被证实确有疗效,诸多学者通过临床研究及动物实验对针刺治疗偏头痛的机制进行了不同角度的探索。得出针刺主要是调节三叉神经血管通路相关物质水平、改善脑血管血流速度、抑制c-fos基因及蛋白水平表、调节脑功能网络的异常连接等作用起到治疗偏头痛的结论。

Expression of substance P receptor gene in the brain and marginal division of rat striatum-oligonucleotide probes in situ hybridization study

Objective: To study the expression of substance P receptor gene in the brain and marginal division in rats. Methods:In situ hybridiztion was performed on sections of the rat brain using digoxingenin--labeled substance P receptor (SPR ) cDNA as probes. Results: The positive reactive neurons distributed unevenly in the central nervous system. There were numerous strong SPR positive neurons in the cerebral cortex, hippocampus, amygdaloid nucleus and marginal division of the rat striatum. These results suggest that the marginal division cells of the striatum contain SPR mRNA and express SP receptor. Conclusion: It is supposed that the expression of SPR in marginal division of the striatum may play an important role in the reception and regulation of the neurotransmitter substance P, and the modulation of cholinergic activity involved in learning and memory of the marginal division.

催产素受体在山羊结状神经节的分布

为研究山羊结状神经节(Nodose ganglion,NG)的神经细胞内是否具备接受催产素(Oxytocin,OT)调节的条件。选取成年山羊结状神经节,采用免疫组化SP法检测催产素受体(Oxytocin receptor,OTR)在结状神经节内各种结构上的分布特点,用Image-pro plus 6.0分析结状神经节神经细胞和非神经细胞结构的催产素受体表达差异性。结果表明,结状神经节内OTR免疫阳性产物分布广泛,神经细胞、过路神经纤维、血管内皮细胞、支持细胞和雪旺细胞均有不同程度的着色。神经细胞胞核和支持细胞着色最深,为棕褐色,OTR分布强阳性。大部分神经细胞胞质着色为黄褐色,OTR分布中等阳性,这部分神经细胞胞质约占神经细胞总数的78%。血管内皮细胞、细胞膜,以及一小部分神经细胞胞质着色较浅,为淡黄色,OTR分布弱阳性。神经细胞胞核的核仁呈圆形,着色极浅或不着色,OTR分布阴性。图像分析表明神经细胞胞体的相对表达量与其他非神经结构差异极显著。OTR免疫阳性产物在山羊NG中广泛表达,且主要分布在NG内脏感觉神经细胞内,提示催产素有可能作用于NG内脏感觉神经细胞,从而通过内脏反射弧传入神经纤维影响内脏器官活动,而NG可能成为OT对内脏器官进行内分泌调节和通过自主神经对内脏器官进行神经调节两者相互协调作用的节点。

高原鼢鼠睾丸雌激素受体免疫组化染色最适浓度抗体的筛选

【目的】筛选高原鼢鼠(Eospalax baileyi)睾丸雌激素受体(Estrogen receptor,ER)免疫组化染色的适宜抗体浓度。【方法】研究选取10只成年雄性高原鼢鼠的睾丸,采用免疫组织化学SP法(IHC-SP法)检测雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)在1∶150、1∶200和1∶250稀释浓度下的染色效果。【结果】ERα抗体稀释浓度1∶250的免疫组化平均光密度值显著高于1∶150和1∶200的抗体稀释浓度免疫组化平均光密度值(P<0.05),而ERβ抗体稀释浓度1∶200的平均光密度值最高(P<0.01),最适浓度结果均表现出阳性细胞染色强度高、背景清晰。【结论】高原鼢鼠睾丸中ERα和ERβ抗体稀释浓度分别为1∶250与1∶200的免疫组化染色效果最佳。

P物质受体在大鼠纹状体边缘区内的表达

我们以前的工作观察到纹状体边缘区内有密集的 P物质纤维及终末分布 ,本文用原位杂交和免疫组织化学方法研究了大鼠纹状体边缘区内 P物质受体 (SPR)的表达及分布。原位杂交结果发现 P物质 m RNA阳性杂交信号在纹状体内的分布不均匀 ,尾壳核内只有少量中等大小的阳性胞体 ,苍白球内只有少量较大的阳性胞体 ,而在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位则可见许多中等大小的梭形阳性神经元胞体 ,并呈现密集的带状分布。免疫组织化学结果观察到 P物质阳性神经元胞体在纹状体内的分布与原位杂交结果一致。推测大鼠纹体边缘区内可以合成 P物质受体 ,具有接受和整合 P物质神经递质的功能。推测边缘区内 SPR神经元可能对 SP递质的接受、调节有重要作用。

大鼠背根神经节同一分离神经元膜受体电生理学及细胞神经递质免疫组织化学检测方法

在新鲜分离的大鼠背根神经节（ＤＲＧ）神经元应用全细胞膜片钳技术记录并证实了膜受体的存在，然后将此同一细胞吸入一较大口径的微吸管，再转移至载玻片上，在倒置显微镜下完成细胞的固定、漂洗及免疚组织化学抗原－抗体反应和显色等步骤。应用这一方法成功地在单个ＤＲＧ神经元膜上确证了Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸及Ｐ物质自身受体的存在。

辛夷提取物对变应性鼻炎、P物质及其受体mRNA表达的影响

目的 :比较辛夷超临界萃取物 (XY SFE)和水蒸气蒸馏提取物 (XY WVD)对豚鼠变应性鼻炎 (AllergicRhinitis ,AR )模型的治疗作用和P物质 (SubstanceP ,SP)及其受体 (SubstancePReceptor ,SP R)mRNA表达的影响。 方法 :以卵白蛋白 (Ovalbu min ,OV)为致敏原 ,用豚鼠复制人类AR模型 ,观察症状及鼻粘膜病理状况以研究XY SFE对豚鼠AR的治疗作用 ;放免法测定鼻腔分泌物中SP浓度 ,逆转录 多聚酶链反应 (reversetranscriptivepolymerasechainreaction ,RT PCR)测定鼻粘膜中SP RmRNA含量以研究XY SFE对SP/SP R分泌及表达的影响。结果 :两种提取物均能有效改善豚鼠AR症状 ,减轻鼻粘膜病理性改变 ,调低SP/SP RmRNA分泌及表达。结论 :辛夷超临界萃取物和水蒸气蒸馏提取物对人类AR可能有类似的治疗作用 ,且其作用机制与调低SP/SP R分泌及表达有关。

大鼠纹状体边缘区P物质受体的免疫细胞化学研究

目的 研究大鼠纹状体边缘区的结构与功能.方法 用免疫细胞化学技术对大鼠脑切片内P物质受体的定位分布进行研究.结果 P物质受体阳性胞体和树突在中枢神经系统有不均匀分布.纹状体边缘区内有较强P物质受体阳性胞体和树突,典型的梭形细胞沿背腹方向行走.结论 边缘区内有P物质受体的分布.推测边缘区内P物质递质有接受、整合功能.

PTSD样大鼠海马MR和GR变化的研究

目的研究PTSD大鼠海马神经元核受体MR(mineralocorticoid receptor,盐皮质激素受体)和GR(glu-cocorticoid receptor糖皮质激素受体)表达的变化。方法采用国际认定的SPS方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,分别取SPS处理后24h、7d、14d大鼠脑组织;同时取正常脑组织(非SPS刺激)作为对照,应用免疫组化、Western Blot方法分别进行各组海马神经元GR和MR表达变化的观察及定量检测。结果(1)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元MR表达呈现随着24h、7d、14d逐渐下调的趋势;(2)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元GR表达于24h时下调,而7d、14d时呈现逐渐回升趋势。结论大鼠经SPS处理后,海马MR表现为持续下调状态;而GR表达为短暂下调,随后回调,揭示PTSD大鼠海马神经元核受体—MR和GR的表达变化可能是引发海马功能降低的重要因素之一。

眼针与体针对腹泻型肠易激综合征大鼠下丘脑及结肠组织P物质及神经激肽Ⅰ型受体表达的影响

目的观察比较眼针及体针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠下丘脑及结肠组织P物质(SP)及神经激肽Ⅰ型受体(NK-1)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、眼针组、体针组4组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。眼针组取下焦区、大肠区、肝区、脾区进行针刺,治疗7 d。用免疫组化方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP和NK-1蛋白的表达;用RT-PCR方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP m RNA的表达。结果与模型组比较,眼针组大鼠下丘脑和结肠组织SP和NK-1蛋白的表达以及SP m RNA的表达均明显减少(P<0.01)。结论眼针疗法优于体针,对D-IBS有治疗作用。

I─B4阳性纤维和终末及P物质受体在大鼠腰骶髓内的分布

为了探讨传递伤害性刺激信息的Ｃ纤维终末与ＳＰ受体（ＳＰＲ）阳性结构间的关系，用Ｉ－Ｂ４组织化学法和ＳＰＲ免疫组织化学法，光镜下观察了大鼠腰骶髓内Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末和ＳＰＲ阳性胞体及其树突的分布。结果显示：被Ｉ－Ｂ４特异标记的阳性纤维及其终末主要分布于腰骶髓后角Ｉ、ＩＩ层以及内、外侧束。另外，在腰骶髓的后连合核区（ＤＣＮ）也有相当数量的Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末分布。说明了伤害性刺激信息主要传递至腰骶髓内的后角Ｉ、ＩＩ层，同时也有相当一部分伤害性刺激信息传递至腰骶髓的ＤＣＮ区。传递至ＤＣＮ区的Ｉ－Ｂ４阳性纤维主要通过沿后角内侧缘走行的内侧束，从而为ＤＣＮ区参与内脏伤害性刺激信息传递及其调制机制提供了进一步的证据。ＳＰＲ阳性胞体和树突主要分布于腰骶髓的后角Ｉ层、Ｉ～Ⅳ层，后角侧缘的内、外侧束也有少量分布。此外，ＤＣＮ区也有大量的ＳＰＲ阳性树突和散在的阳性胞体。双重反应的结果显示两者在Ｉ、ＩＩ层及ＤＣＮ区的分布相互匹配。

孕激素受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为了研究孕激素对胃肠道的内分泌调节和自主神经对胃肠道的神经调节两种途经之间的相互关系,作者采用免疫组织化学SP法,观察孕激素受体(PR)在成年雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,雌山羊腹腔肠系膜前神经节中PR免疫阳性产物广泛存在,且主要分布于神经元中。神经元的细胞膜呈棕褐色,为强阳性,细胞质为强阳性或中等阳性。43.40%的神经元细胞核内核质呈黄褐色,核仁为清亮的空泡;56.60%的神经元核质不着色,核仁的PR为中等阳性。图像分析表明神经元的PR相对表达量与其他非神经结构相比差异性极显著(P<0.01)。结果表明,腹腔肠系膜前神经节的交感节后神经元是孕激素作用的靶细胞,提示腹腔肠系膜前神经节上的PR可能是孕激素对胃肠道内分泌调节和自主神经对胃肠道的神经调节之间达到相互协调作用的网络节点。

孕激素受体在雌性山羊结状神经节的表达

为了研究孕激素是否具备作用于结状神经节神经元的条件,从而可能通过影响内脏反射的初级传入神经元的功能参与调节胃肠的活动,采用免疫组织化学SP法,观察孕激素受体(PR)在成年雌性山羊结状神经节(NG)的分布特点。结果显示,PR免疫反应阳性产物在雌性山羊结状神经节中广泛分布,神经元、卫星细胞、施万细胞、神经纤维中均有不同程度的着色。其中神经元的细胞膜呈棕褐色,为强阳性,细胞质中的尼氏小体为中等阳性或弱阳性。在带核的神经细胞中,多数神经元细胞核内核质为强阳性,核仁为清亮的空泡。多数卫星细胞上的PR为强阳性,少数其胞核呈空泡状不着色。施万细胞和神经纤维的孕激素受体呈淡黄色,为弱阳性。图像分析表明与其他非神经成分相比,神经元胞体的PR相对表达量差异性极显著(P<0.01)。上述结果表明结状神经节中的内脏感觉神经元是孕激素作用的主要靶细胞之一,即孕激素有可能作用于结状神经节内脏感觉神经元,从而通过内脏反射弧的传入端影响胃肠的活动,而结状神经节上的PR可能为孕激素对胃肠道的内分泌调节和植物性神经系统对胃肠道的神经调节之间的网络节点。

催产素受体在雌性山羊颈动脉体的分布

研究催产素受体(OTR)在雌性山羊颈动脉体(CB)中是否存在及其分布特点,为催产素(OT)是否对CB起调节作用提供形态学基础。用免疫组织化学SP法对雌性山羊的CB进行OTR免疫组织化学染色,观察CB中OTR的分布特点。结果显示,在雌性山羊CB的实质细胞群和间质组织中均有不同程度的OTR阳性反应产物存在。OTR强阳性产物分布在Ⅰ型细胞、Ⅱ型细胞的细胞质和细胞膜,在Ⅰ型细胞的细胞核呈弱阳性表达,在Ⅱ型细胞的细胞核呈强阳性表达。在间质组织中,血管内皮细胞和神经纤维中有中等阳性反应产物存在,并且实质细胞群和间质组织的OTR相对表达量差异性极显著(P<0.01)。结果表明,OTR主要分布于CB的实质细胞群中,CB具备接受OT调控的条件。因此,催产素可以通过激活CB中的OTR来影响CB的功能活动。

5-HT及5-HT_(1A)受体在不同妊娠阶段大鼠子宫中的分布

【目的】研究5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及5-HT1A受体在SD大鼠妊娠期子宫中的分布情况和变化规律。【方法】选取均为正常妊娠的30只雌性SD大鼠分为妊娠3 d、妊娠5 d、妊娠7 d、妊娠13 d、妊娠19 d及产后第1天6组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP法染色后,进行观察分析。【结果】5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物广泛存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞、蜕膜细胞、免疫细胞及肌纤维中;5-HT在妊娠7 d和妊娠13 d着色最深,5-HT1A受体在妊娠13 d着色最深。5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物相对表达量的T检验表明,子宫内膜5-HT在妊娠7 d和妊娠13 d的表达较妊娠3 d、妊娠5 d和产后极显著的增加(P<0.01),较妊娠19 d显著增加(P<0.05);子宫肌层5-HT在妊娠19 d的表达较妊娠7 d显著减少(P<0.05),较妊娠13 d极显著的减少(P<0.01)。子宫内膜5-HT1A受体在妊娠13 d较妊娠3 d、妊娠5 d、妊娠19 d及产后极显著的增加(P<0.01),较妊娠7 d显著增加(P<0.05);子宫肌层5-HT1A受体在妊娠13 d较妊娠各个时期极显著增加(P<0.01)。5-HT和5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达,具有极显著的正相关性。【结论】5-HT和5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达具有一定规律,5-HT通过5-HT1A受体参与妊娠的调节。