免疫组织化学 SP 法测定原发性结直肠癌组织中 ESA和 CD44蛋白表达的关系及临床病理意义分析

目的：分析免疫组织化学 SP 法测定原发性结直肠癌组织中人上皮特异性抗原（ESA）和 CD44蛋白表达的关系及临床病理意义。方法随机抽取2014年1月至2015年1月收治并确诊的结直肠癌患者42例作为研究对象，另选取同期收治的正常结直肠黏膜组织患者12例及伴不典型增生的结直肠腺瘤患者16例作为对照，采用免疫组织化学 SP 法检测患者的 ESA 和 CD44蛋白表达水平，分析其相关性。结果在结直肠癌中 ESA 和CD44的蛋白表达明显较正常黏膜组织高，较伴不典型增生的结直肠腺瘤高，差异有统计学意义（P〈0.05）；在结直肠癌组织中，CD44与病理分级、淋巴结转移及 Dukes 分期有关（P〈0.05）；ESA 与年龄、病理分级、肿瘤浸润深度及Dukes 分期有关（P〈0.05）；在结直肠癌中 ESA 与 CD44的蛋白表达呈正相关（r =0.553，P〈0.05）。结论结直肠癌组织中 ESA 和 CD44蛋白均表达。

高原鼢鼠睾丸雌激素受体免疫组化染色最适浓度抗体的筛选

【目的】筛选高原鼢鼠(Eospalax baileyi)睾丸雌激素受体(Estrogen receptor,ER)免疫组化染色的适宜抗体浓度。【方法】研究选取10只成年雄性高原鼢鼠的睾丸,采用免疫组织化学SP法(IHC-SP法)检测雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)在1∶150、1∶200和1∶250稀释浓度下的染色效果。【结果】ERα抗体稀释浓度1∶250的免疫组化平均光密度值显著高于1∶150和1∶200的抗体稀释浓度免疫组化平均光密度值(P<0.05),而ERβ抗体稀释浓度1∶200的平均光密度值最高(P<0.01),最适浓度结果均表现出阳性细胞染色强度高、背景清晰。【结论】高原鼢鼠睾丸中ERα和ERβ抗体稀释浓度分别为1∶250与1∶200的免疫组化染色效果最佳。

Fas、FasL在Sjgren综合征涎腺组织中的表达及意义

目的 观察Sj gren综合征 (Sj gren’ssyndrome,SS)涎腺组织和正常涎腺组织中凋亡相关蛋白Fas、FasL的表达情况 ,探讨SS涎腺组织中细胞凋亡的途径。方法 采用SP免疫组织化学法 ,检测 2 3例SS涎腺组织和 16例正常涎腺组织中Fas、FasL的表达情况。结果 在SS腺泡上皮细胞中 ,Fas、FasL的表达均高于正常组 ,有显著性差异 (P <0 .0 0 5 ) ;两组导管上皮细胞中 ,Fas、FasL的表达均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 在SS涎腺组织中Fas、FasL的表达升高。SS涎腺上皮细胞在Fas/FasL介导下过度凋亡 。

大肠癌组织中hMLH1的表达及其临床意义

目的 了解错配修复蛋白hMLH1在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌发生、组织分化、淋巴结转移及临床分期的关系。方法 应用SP免疫组织化学法对 65例大肠癌组织病理切片进行免疫组化分析。结果 大肠癌旁正常组织hMLH1的表达阳性率为 80 % ,明显高于癌组织hMLH1的表达阳性率 49.2 % ( 0 .0 1<P <0 .0 5 ) ;高分化腺癌、中分化腺癌和低分化腺癌组织中hMLH1的表达率分别为 68.2 %、44 .1%和 2 2 .2 % ,高分化腺癌与低分化腺癌之间hMLH1的表达存在显著性差异 ( 0 .0 1<P <0 .0 5 ) ,但高分化腺癌与中分化腺癌、中分化腺癌与低分化腺癌之间hMLH1的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。伴有淋巴结转移者大肠癌组织中hMLH1表达的阳性率 ( 2 3 .5 % )低于无淋巴结转移者 ( 5 8.3 % ) ( 0 .0 1<P <0 .0 5 ) ;临床Ⅲ～Ⅳ期大肠癌组织中hMLH1表达的阳性率 ( 2 6.3 % )低于临床Ⅰ～Ⅱ期 ( 5 8.7% ) ( 0 .0 1<P <0 .0 5 )。结论 hMLH1表达水平与大肠癌的发生、组织分化。

ERα免疫反应产物在山羊卵巢中的分布

为了研究不同生殖周期山羊卵巢中雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)的表达,本试验应用高灵敏度的免疫组织化学SP法检测了ERα免疫反应产物在不同生殖周期山羊卵巢中的分布。结果显示,ERα免疫反应产物主要存在于成熟卵泡的颗粒细胞、发情期和妊娠期生长卵泡的部分颗粒细胞、原始卵泡卵母细胞胞质、粒黄体细胞胞质及膜黄体细胞胞核、卵泡膜细胞和类固醇细胞胞质;间情期生长卵泡的颗粒细胞中的ERα免疫反应产物较少,主要存在于细胞膜上;卵母细胞中ERα免疫反应产物在初级卵泡阶段含量较少,从次级卵泡开始其含量很丰富。以上结果提示,ERα以激活不同信号途径的方式参与了对卵泡生长、排卵及妊娠维持的调控,这为研究雌激素及雌激素受体α在卵巢中的作用及其生殖调控机理提供了形态学资料。

重组人内抑素对兔耳创面瘢痕组织血管内皮生长因子、转化生长因子-β_1和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的观察重组人内抑素(rh Endostatin)对兔耳创面瘢痕增生及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响,探讨rh Endostatin抑制瘢痕增生的分子机制。方法健康新西兰大耳白兔20只,均分为正常对照组、模型组、生理盐水(NS)对照组、rh Endostatin(5 g/L)治疗组和醋酸曲安奈德(TA,40 g/L)对照组;除正常对照组外其余各组均进行增生性瘢痕动物模型的复制,在兔耳腹侧面制作1cm×1cm大小创面。术后第28天,rh Endostatin治疗组瘢痕皮内注射相应浓度rh Endostatin(100μl),NS对照组注射等量生理盐水,隔日1次,共6次;TA对照组瘢痕块内注入相应浓度曲安奈德(100μl),每周1次,共2次;模型组术后不接受处理。术后第47天摄片并收集瘢痕及正常皮肤标本,应用免疫组织化学方法检测VEGF、TGF-β1和b FGF的表达。结果形态学观察结果显示,术后第47天rh Endostatin治疗组瘢痕皮肤色泽变浅,变软变平,体积减小,与模型组和NS对照组比较有明显差异;免疫组织化学检测结果可见,与模型组和NS对照组相比,rh Endostatin治疗组VEGF和TGF-β1蛋白表达减少,b FGF表达增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 rh Endostatin能有效抑制兔耳创面瘢痕增生,其机制可能与rh Endostatin影响VEGF、TGF-β1和b FGF蛋白的表达有关。

宫颈癌组织中survivin基因的表达及其临床意义

目的 :探讨宫颈癌组织中survivin基因表达的特征及其临床意义。方法 :应用免疫组织化学方法 (SP法 )检测survivin基因在 41例宫颈癌组织、17例CIN宫颈组织及 10例正常宫颈组织中的表达 ,分析其与临床病理特征的相关性及其与预后的关系。结果 :宫颈癌组织中survivin的阳性表达率较正常组织及CIN均明显升高 (P <0 0 5 ) ;宫颈癌患者中survivin阳性表达的中位生存期明显小于阴性表达者 (P <0 0 5 )。Survivin的表达与宫颈癌的临床分期、病理分级及组织类型无关。结论 :survivin的阳性表达增高与宫颈癌的发生密切相关 ,预示预后不良。

益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达的影响

目的观察益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达的影响。方法取2015年1月~2016年7月医院进行实验的BALB/c小鼠60只,建立BALB/c小鼠胃癌抑制瘤模型,根据处理方法不同分为对照1组、对照2组和观察组,每组20只。对照1组不进行任何处理,对照2组给予5-氟尿嘧啶注射液,观察组给予益气复生方。14 d后处死小鼠,采用免疫组织化学Envision法检测3组小鼠胃癌组织中STAT3的表达水平,免疫组织化学SP法检测3组小鼠胃癌组织中HIF-1的表达水平;对肿瘤组织进行HE染色,分析益气复生方对胃癌组织中STAT3及HIF-1表达水平的影响。结果观察组小鼠胃癌组织中STAT3及HIF-1的表达水平显著低于对照2组和对照1组(P<0.05);对照2组小鼠胃癌组织中STAT3及HIF-1的表达水平显著低于对照1组(P<0.05)。观察组小鼠STAT3及HIF-1的表达阳性率显著高于对照2组和对照1组(P<0.05);对照2组小鼠STAT3及HIF-1的表达阳性率显著高于对照1组(P<0.05)。免疫组化结果显示,3组小鼠均存在STAT3的阳性表达,表达量从低到高依次为观察组、对照2组、对照1组;观察组与对照2组HIF-1表达的差异无统计学意义(P>0.05),对照1组HIF-1表达相对较高。观察组肠黏膜绒毛轻度破坏,排列相对整齐,治疗后有所恢复;对照1组和对照2组肠黏膜绒毛完整性被破坏,部分绒毛坏死脱落、稀疏,排列紊乱。结论益气复生方可降低胃癌组织中STAT3的表达水平,抑制HIF-1的表达。

肾癌组织中基质金属蛋白酶的表达与肿瘤预后的关系

为探讨基质金属蛋白酶 (MMP2 、MMP9)在肾癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移和预后的关系 ,选择 3 6例肾细胞癌及 6例正常肾组织 ,采用免疫组化技术 (SP法 )对MMP2 及MMP9进行检测 ,并结合临床资料进行统计、分析。结果显示 ,MMP2 、MMP9在肾癌中的阳性表达分别为 44 4%和 5 2 8% ,二者均阳性者占 3 3 3 %。MMP2 和MMP9在高级、高期肾癌中表达的阳性率明显高于低级、低期患者 (P <0 0 5 ) ,但与肾癌的细胞类型无关。预后调查分析显示 ,MMP2 和MMP9阳性表达者术后 5年存活率均明显低于阴性表达者 (P <0 0 5 )。研究表明 ,MMP2 和MMP9在肾癌组织中可以高度表达 ,并与肾癌的侵袭和转移有关 ,其检测对临床判断肾癌预后有指导意义。

喉鳞癌组织中PTTG1、bFGF的表达与临床病理特征的相关性

0引言喉癌（laryngeal cell carcinoma）是头颈部最常见的恶性肿瘤,主要病理类型为鳞状细胞癌,在我国北方省份特别是东北地区高发,其发生发展机制尚未完全阐明。垂体肿瘤转化基因（PTTG1）是从垂体瘤组织中分离出的原癌基因,其高表达在促进细胞增殖转化以及体内肿瘤形成具有重要作用。

芳香化酶P450在子宫内膜增殖及癌变组织中的表达及意义

目的探讨芳香化酶P450在子宫内膜增殖、非典型增殖及癌变组织中的表达。方法应用免疫组织化学SP法对子宫内膜增殖、非典型增殖及癌变子宫内膜(观察组)148例芳香化酶P450的表达进行研究,并设正常增殖期子宫内膜37名为对照组。结果对照组无芳香化酶P450表达,观察组芳香化酶P450呈阳性表达,表达率分别为45%、72%、75%,两组差异有统计学意义;非典型组与癌变组阳性表达率差异无统计学意义,但表达的阳性细胞数差异有统计学意义。结论芳香化酶P450的异常表达与子宫内膜增殖癌变的发生、发展有关,组织学异型性与阳性表达率增高有关;提示芳香化酶P450可能是促使子宫内膜细胞增殖及恶变的促进因素之一。

鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元

应用免疫组织化学SP法 ,对 5只产蛋高峰期鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元的分布特征进行了研究。结果发现 :从内侧隔核至Meynert基底核 ,ChAT样免疫反应神经元呈连续性分布 ,且各区神经元的密度、大小及着色强度不均。MS、NDBV/H及旧纹体膨大部的阳性细胞分布密集 ,且突起较明显 ;原始旧纹体部阳性细胞分布稀疏 ,突起明显。结果表明 ,在鸡的基底前脑胆碱能皮质投射神经元区广泛分布着ChAT样免疫反应神经元 ,这为鸡的基底前脑—海马投射系统积累了资料 ,表明该区在鸡的学习、记忆中起着重要的调节作用。

高原地区成年藏绵羊和小尾寒羊附睾组织中eNOS差异表达研究

采用免疫组化SP法结合IPP统计分析法,比较高原地区成年藏绵羊和小尾寒羊附睾组织中eNOS的定位及分布特征。平均光密度数据统计表明,eNOS的平均光密度值在藏绵羊附睾尾部显著高于附睾头和附睾体(P<0.05),藏绵羊附睾头和附睾体之间无显著差异(P>0.05),但在小尾寒羊附睾体显著高于附睾头(P<0.05)。小尾寒羊附睾体的平均光密度值显著高于藏绵羊(P<0.05),附睾头和附睾尾之间无显著差异(P>0.05)。结果表明,eNOS的活性在附睾尾部最高,提示NO与精子运输相关,对于高原地区不同品种绵羊附睾中eNOS分布较大差异的原因尚需深入研究。

芳香化酶P450在子宫内膜增殖及非典型增殖组织中的表达

目的探讨芳香化酶P450在子宫内膜增殖和非典型增殖中的诊断和治疗价值。方法应用免疫组织化学SP法对子宫内膜单纯性增殖30例、复杂性增殖32例及非典型增殖54例中的芳香化酶P450、雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)的表达进行检测,并结合临床过程进行分析。结果在正常增生期子宫内膜组织中无芳香化酶P450的表达,子宫内膜增殖(单纯性增殖、复杂性增殖、非典型增殖)组织中芳香化酶P450呈阳性表达,阳性表达率分别为41.1%、46.1%、73.2%,阳性表达率差异有统计学意义(χ2=46.69,P<0.01);ER及PR的表达与子宫内膜组织细胞的异型性程度无关;芳香化酶P450与ER、PR在子宫内膜增殖组织中(单纯性增殖、复杂性增殖、非典型增殖)的表达不存在相关性。结论芳香化酶P450可能是子宫内膜细胞增殖及恶变的促进因素之一,并可能成为子宫内膜早期癌变的生物学标记物。ER的阳性表达说明子宫内膜增殖的发生与子宫内膜局部雌激素的刺激作用有关。PR的阳性表达可以作为子宫内膜增殖保守治疗中估计预后的有效指标。

胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的探讨胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达情况。方法分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对40例胃癌组织、22例癌旁不典型增生组织及40例正常胃黏膜组织进行KiSS-1 mRNA和蛋白的检测。结果胃癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率分别为57.5%(23/40)、77.3%(17/22)、97.5%(39/40),依次升高(X2=18.323,P<0.01);KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为52.5%(21/40)、81.8%(18/22)、95.0%(38/40),依次增高(X2=20.131,P<0.01);胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白表达与胃癌分化程度无关(P>0.05),与浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05);胃癌组织中KiSS-1 mRNA与蛋白的表达呈正相关(rs=0.702,P<0.05)。结论 KiSS-1表达缺失与胃癌的发生、转移有关;KiSS-1有望成为胃癌早期诊断和判断预后的辅助指标。

根除幽门螺杆菌对慢性萎缩性胃炎组织中生长抑素及其受体的蛋白和mRNA表达的影响

目的:分析幽门螺杆(Hpylori)感染及根除对慢性萎缩性胃炎(CAG)组织中的生长抑素及其受体蛋白和mRNA表达的影响,探讨Hpylori的致病机制及其在胃癌发生中的作用. 方法:采用快速尿素酶试验、Giemsa染色及Warthin—Starry 银染色检测Hpylori;应用免疫组织化学SP法和RT—PCR技术检测56例萎缩性胃炎组织中的生长抑素(somatostatin, SS)及其受体hSSTR2、hSSTR5蛋白和mRNA表达情况, 以及Hpylori根除前后慢性萎缩性胃炎组织中的生长抑素蛋白和mRNA表达的变化. 结果:H pylori阳性组慢性萎缩性胃炎组织中的SS蛋白和mRNA表达均显著低于Hpylori阴性组(16.00±1.50 vs 21.38±1.38,0.30±0.05 vs 0.57±0.13,P<0.001),而H pylori 阳性组萎缩性胃炎组织中的hSSTR2 mRNA和hSSTR5 mRNA表达与H pylori阴性组比较无明显变化.经三联治疗根除H Pylori后,慢性萎缩性胃炎组织中的SS蛋白和mRNA表达较治疗前显著增加(23.16±2.74 vs 17.30±1.67, 0.54±0.11 vs 0.31±0.09,P<0.001),而Hpylori仍为阳性者,慢性萎缩性胃炎组织中的SS蛋白和mRNA表达与治疗前比较则无明显变化. 结论:Hpylori感染可以抑制慢性萎缩性胃炎组织中的生长抑素蛋白和mRNA表达,及早根除H pylori,可以纠正生长抑素基因的异常表达,这可能是Hpylori感染导致慢性胃炎的重要机制之一.

犬小肠缺血再灌注后氧自由基改变及脾脏免疫细胞凋亡基因的表达

目的研究犬小肠缺血再灌注后血中一氧化氮(NO)浓度、超氧化物岐化酶(SOD)活性的改变和脾脏中凋亡相关基因表达和意义。方法通过阻断肠系膜上动脉,建立缺血再灌注模型,检测血中NO和SOD活性的改变。用免疫组织化学SP法观察C FOS、BAXP53和BCL2在脾脏组织中的表达。结果再灌注30min后,NO浓度无明显下降(46.1±4.0),至第4天达最低水平(25.9±5.0),而至第7天又明显回升(42.5±5.0)。从血管阻断30min至第7天,SOD活性持续升高(98.4±8.0),但各时点之间差别不明显。再灌注30、60min,1、4和7d后,C FOS、BAX和P53的表达明显增加,C FOS阳性细胞率分别为:35%、45%、50%、56%和80%,BAX阳性细胞率分别为:50%、61%、60%、65%和75%,P53的阳性细胞率分别为:30%、42%、45%、48%和50%,BCL2阳性细胞率仅为5%至10%。C FOS和BAX阳性细胞率明显高于BCL2。结论小肠缺血再灌注后可造成血中氧自由基、脾脏免疫细胞的凋亡基因表达改变及远隔器官的次级损伤。

不同前列腺组织中NKX3.1表达的实验研究

目的:探讨同源框基因NKX3.1的产物在不同前列腺组织中的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测13例正常前列腺,19例良性前列腺增生,32例前列腺癌标本中NKX3.1的表达。结果:64例前列腺组织中63例表达NKX3.1,阳性率98.4%。正常前列腺和良性前列腺增生的NKX3.1表达无显著差异(P<0.05),前列腺癌组织的NKX3.1表达较前两者高(P<0.05),其中低分化腺癌的表达高于中高分化腺癌(P<0.05)。结论:NKX3.1在各种前列腺组织中均有较高的表达率。在前列腺癌中其表达与分级相关。