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SP94和CD47双修饰外泌体靶向递送PLK1siRNA治疗肝癌
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作者 贺维 刘梦梦 +8 位作者 张延琴 潘鹭翔 何磊 顾锦涛 高源 周月媛 张阔 张英起 郝强 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1421-1428,共8页
目的设计一种基于外泌体高效递送的方法,将治疗性核酸递送到肝癌组织治疗原发性肝癌。方法构建靶向肝癌的融合表达SP94和CD47的质粒,转染至HEK293T细胞后提取分离外泌体。通过透射电子显微镜及纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹法等方法对... 目的设计一种基于外泌体高效递送的方法,将治疗性核酸递送到肝癌组织治疗原发性肝癌。方法构建靶向肝癌的融合表达SP94和CD47的质粒,转染至HEK293T细胞后提取分离外泌体。通过透射电子显微镜及纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹法等方法对外泌体进行鉴定。小鼠经尾静脉分别注射200μg DiD标记的未修饰外泌体和SP94修饰的外泌体,采用小动物活体成像仪检测并分析外泌体对肝癌组织的靶向作用。将未修饰外泌体和CD47修饰的外泌体分别与巨噬细胞RAW264.7、小鼠肝癌细胞Hepa1-6共孵育,验证细胞对修饰后外泌体的吞噬情况。通过电穿孔法将Polo样激酶1(PLK1)siRNA加载到不同修饰的外泌体中,再与Hepa1-6细胞共孵育,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。原发性肝癌模型小鼠经尾静脉注射加载PLK1 siRNA的修饰外泌体,系统研究并分析其对原发性肝癌的治疗效果。结果SP94修饰增强了外泌体对肝癌组织的靶向作用,CD47修饰减少了外泌体被巨噬细胞吞噬。SP94和CD47双修饰外泌体递送PLK1 siRNA促进了肝癌细胞凋亡。在原发性肝癌模型小鼠中,SP94和CD47双修饰外泌体加载PLK1 siRNA能有效抑制小鼠肝癌结节的生长,延长小鼠生存期。结论SP94和CD47双修饰外泌体可以高效靶向肝癌递送治疗性核酸PLK1siRNA,有效抑制肝癌的生长。 展开更多
关键词 原发性肝癌 外泌体 靶向递送 sp94 CD47 POLO样激酶1 细胞凋亡
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蜂毒素-SP94杂合基因原核表达载体的构建及蛋白纯化 被引量:4
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作者 张红绪 曹静 +5 位作者 周庆峰 赵鹏 金白洁 王亚威 刘琦 李成伟 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期122-125,共4页
用可以特异结合到肝癌细胞膜上的小肽SP94,与蜂毒素连接,构建重组表达载体pET32a-蜂毒素-SP94.转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达结果,产物经Ni-NTA Agrosc亲和层析柱纯化后进行Tricine-SDS-PAGE检测.重组蛋白在大... 用可以特异结合到肝癌细胞膜上的小肽SP94,与蜂毒素连接,构建重组表达载体pET32a-蜂毒素-SP94.转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达结果,产物经Ni-NTA Agrosc亲和层析柱纯化后进行Tricine-SDS-PAGE检测.重组蛋白在大肠杆菌中高效表达,约占细胞总蛋白的30%,超声破碎后50%的目的蛋白以可溶性形式存在,纯化后获得高纯度蛋白.本实验为肝癌的靶向治疗研究与临床应用提供了新思路. 展开更多
关键词 肝癌 蜂毒素-sp94 载体构建 表达 纯化
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The use of cationic liposomes to co-deliver docetaxel and siRNA for targeted therapy of hepatocellular carcinoma 被引量:3
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作者 李井泉 仰浈臻 +1 位作者 孟婷婷 齐宪荣 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2014年第10期667-673,共7页
Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the major causes of death worldwide. Targeted delivery of drugs to tumor cells can be achieved by introduction of a targeting ligand onto the nanocarrier system. Simultaneous... Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the major causes of death worldwide. Targeted delivery of drugs to tumor cells can be achieved by introduction of a targeting ligand onto the nanocarrier system. Simultaneous delivery of a chemotherapeutic drug and siRNA in one nanocarrier system to the tumor is a promising strategy for cancer treatment. In this study, we prepared cationic liposomes to co-deliver docetaxel (DTX) and small interfering RNA (siRNA). The liposomes were modified by a hepatocellular carcinoma specific homing peptide, SP94. Serum stability assay demonstrated that liposomes can significantly protect the siRNA against enzymatic degradation in serum. The SP94 modified liposomes showed increased cellular uptake and stronger anti-tumor effect compared with the unmodified liposomes on human HCC cells. The data indicated that the SP94 modified liposomes which co-deliver DTX and siRNA could be used for the targeted therapy of hepatocellular carcinoma. 展开更多
关键词 sp94 Hepatocellular carcinoma Liposomes DOCETAXEL SIRNA
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多肽修饰雷公藤内酯醇纳米脂质体的制备及抗肿瘤作用 被引量:2
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作者 阙慧卿 吴彬 +3 位作者 李唯 钱丽萍 郭舜民 林绥 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期608-612,共5页
目的制备多肽SP94修饰的雷公藤内酯醇纳米脂质体(PTN),并评价其体外抗肿瘤的活性。方法以磷胆比、磷脂与DSPE-PEG-SP94的配比、高压乳匀时间为考察因素,以载药量、包封率、粒径和Zeta电位等综合评分为考察指标,用均匀设计法优选PTN的最... 目的制备多肽SP94修饰的雷公藤内酯醇纳米脂质体(PTN),并评价其体外抗肿瘤的活性。方法以磷胆比、磷脂与DSPE-PEG-SP94的配比、高压乳匀时间为考察因素,以载药量、包封率、粒径和Zeta电位等综合评分为考察指标,用均匀设计法优选PTN的最佳工艺,并评价PTN的体外抗癌作用。结果PTN最佳制备工艺条件为:大豆卵磷脂:胆固醇:mPEG-DSPE-SP94=10:1:1,高压乳匀10 min。制备得到PTN的载药量为1.078%,载药脂质体对人肝癌细胞HepG2、人前列腺癌细胞PC-3、人乳腺癌细胞MCF-7的半数抑制浓度(IC50)分别为53.91±4.11、117.10±7.35、183.40±11.60 nmol·L^(-1),且在1μmol·L^(-1)时对HepG2、PC-3、MCF-7细胞的增殖抑制率分别为80.53%±0.46%、73.63%±0.37%、77.28%±0.45%。结论通过均匀设计选择的PTN制备方法重复性好,简便可行,制备的PTN对HepG2、PC-3、MCF-7肿瘤细胞具有良好的抑制作用。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 DSPE-PEG-sp94 均匀设计 纳米脂质体 HEPG2 PC-3 MCF-7 半数抑制浓度 增值抑制率
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