SPA-ELISA检测弓形虫感染鼠尿中的循环抗原

[目的 ]探索弓形虫感染早期诊断的简便方法。 [方法 ]用SPA ELISA检测轻度、中度和重度感染弓形虫鼠尿中弓形虫循环抗原 (TCA)。 [结果 ]轻度、中度和重度感染弓形虫 3组鼠尿中均检出TCA ,上述 3组分别于弓形虫感染后d6 、d3和d4显示阳性斑点。 [结论 ]SPA ELISA能检出弓形虫感染鼠尿中的弓形虫循环抗原 ,可用于弓形虫感染的早期诊断。

SPA-ELISA 一步法检测囊虫病患者血清特异性抗体的研究

用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ一步法检测了囊虫病患者血清特异性抗体，并与快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ进行对比。两法同时检测了５９例囊虫病患者，３６例非囊虫病病人和３０例正常人血清。结果表明：ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ一步法和快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ的阳性率分别为９４．９１％和９８．３１％，几何平均滴度（ＧＭＰ）分别为１∶４２５．８９和１∶５６５．７２，均无显著性差异。对１例肝吸虫病人和１例包虫病人血清均起交叉反应。说明ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ一步法具有与快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ相同敏感性和特异性，并且快速、方便、花费少。

HRP-SPA ELISA检测猪日本乙型脑炎病毒抗体的研究

将盐析法提纯的、用Hela细胞系增殖的猪日本乙型脑炎病毒JapaneseBencephalitis(JEV)抗原包被酶标板,以HRP-SPA作为第二抗体,建立了检测JEV抗体的ELISA试验方法。结果表明,抗原的最适包被浓度为1∶800,待检血清最适稀释度为1∶50,HRP-SPA最佳工作浓度为1∶1000,各步反应时间确定为5min。交叉试验、阻断试验、重复性试验、敏感性试验证明本实验特异性强,重复性好,敏感性高。包被的病毒抗原经甲醛固定15min即可进行正式试验。确定其测定标准为:S/N≥14.81为阳性,S/N<12.53为阴性,12.53≤S/N<14.81为可疑。

SPA-ELISA监测猪传染性胃肠炎病毒血清抗体水平的研究

建立了SPA -ELISA监测猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)血清抗体水平的方法 ,与免疫荧光试验 (IFA)符合率高达90.9%。试验表明 :病毒抗原最适包被浓度为4μg/ml;血清工作浓度为1∶200;最佳包被液采用0.05M pH9.6的碳酸缓冲液 ;封闭液选用2 %的脱脂奶 ;并确定了抗原抗体最佳反应时间和最适反应温度及底物溶液的显色时间。特异性试验表明所组装的SAP -ELISA试剂盒特异性较好 ,可用于TGE的流行病学调查。

SPA-ELISA检测卡氏肺孢子虫抗原的研究

目的 探讨SPAK-ELISA检测卡氏肺孢子虫抗原对诊断卡氏肺孢子虫肺炎的价值。 方法 采用SPA-ELISA检测免疫抑制大鼠模型在不同时期肺泡灌洗液(BALF)和血清中肺孢子虫(PC)抗原,以及造血干细胞移植并发肺炎患者痰液和血清抗原,并与病原学检查结果比较。 结果 感染大鼠于用药后第4周,BALF中PC抗原,以及肺组织印片和BALF涂片包囊检查开始出现阳性,但前者阳性率(60％)高于后者(20％和40％),而且全部阳性达到的时间(8周)也早于后者(10周)。第10周有2只鼠血清抗原阳性,但此后又转阴。30例肺炎患者痰液抗原阳性8例,阳性率为26.67％,8例抗原阳性患者中只有3例发现包囊,符合率为37.5％。血清抗原检测全部阴性。 结论 SPA-ELISA检测痰液和肺泡灌洗液抗原比病原学检查敏感性高,而检测血清抗原不适用于诊断卡氏肺孢子虫肺炎。

用SPA-ELISA检测牛结核乳清抗体的研究

从用牛ＰＰＤ皮试阳性奶牛中采取１８头份牛乳，不稀释，做ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测，进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ条件优选工作，建立了检测牛乳清中结核抗体的ＥＬＩＳＡ工作程序。检测结果表明：１８份ＰＰＤ皮试阳性牛乳，经ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测阳性为１５份，阴性为３份，结果附合率为８３３３％。

SPA-ELISA检测弓形虫感染者血清特异性抗体和循环抗原研究

目的 :检测弓形虫感染者血清中特异性抗和循环抗原 (CAg)。方法 :应用SPA ELISA检测血清标本 ,结果 :SPA ELISA检测特异性抗体和CAg的敏感性和特异性与常规ELISA相似 (P >0 .0 5 ) ,结论

SPA-ELISA检测弓形虫抗体诊断试剂盒的研制

目的 :制备 SPA- ELISA弓形虫抗体诊断试剂盒供临床使用。方法 :优选最佳的实验条件 ,包括反应时间、SPA- HRP浓度及待测血清标本浓度。观察了封闭对实验结果的影响及酶保护剂对 SPA- HRP活性的影响 ,并对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及破坏性进行了实验研究。结果 :本试剂盒敏感性高 ,特异性强 ,重复性好 ,可 4℃保存 3个月 ,- 2 0℃保存 6个月 ,其活性不变。结论 :本试剂盒方法简便快捷 ,结果可靠 。

免疫诊断技术用于姜片虫病流行病学调查的研究──Ⅱ.快速SPA-ELISA用于实验诊断及疗效考核

用姜片虫成虫纯化抗原（ＰＡＡ，１μｇ／ｍｌ）预包被的ＰＳ微量反应板作快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ。以本法与常规ＥＬＩＳＡ平行检测姜片虫病人滤纸干滴血４０份，前者的阳性率为９５．０％，后者为９２．５％，二者无显著性差异（Ｐ＞０．１）。以本法检测流行区献血员及非流行区健康检查者血清各４０份，假阳性率分别为１０％（４／４０）和５％（２／４０）；与日本血吸虫病和长膜壳绦虫病患者血清的交叉反应率分别为１２．５％（５／４０）和２５．０％（１／４）；与肺吸虫病和肝吸虫病患者血清之间未出现交叉反应。检测８１例姜片虫病患者治疗前后不同时间血清抗体的变化，提示驱虫后血清特异性抗体下降较快：在治疗后３个月，阳性反应阴转率为８６．６７％（６５／７５）；半年后的阴转率高达９６．００％（７２／７５）。研究结果表明：快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ不仅敏感性高、特异性较强，而且具有考核疗效的价值。同常规ＥＬＩＳＡ相比，本法反应快速，整个试验过程仅需１小时左右。

SPA菌体协同ELISA及其在检测血清抗HCV·IgM中的初步应用

采用HCV_1合成抗原多肽,SPA 菌体及酶标记抗人IgM 等建立血清抗HCV.IgM 检测SPA菌体协同ELISA(SPA-ELISA)。以多重替代试验、阻断试验及其2-巯基乙醇破坏试验证实其方法的特异性.将其用于一组临床标本的检测,并对该法检测血清抗HCV-IgM 的优点进行了探讨。

SPA-ELISA评价三种不同纯度牛源细粒棘球蚴囊液抗原在包虫病免疫诊断中的价值

本文采用SPA-ELISA法评价了三种不同纯度牛源细粒棘球蚴囊液抗原在包虫病免疫诊断中的价值,用三种抗原检测了41例包虫病患者血清中特异IgG抗体的水平,它们的阳性率分别为:牛源细粒棘球蚴液粗抗原86.0％,半饱和硫酸铵法纯化抗原91.4％,氯化镁—磷钨酸法纯化抗原92.3％,两种纯化抗原与粗抗原的阳性检出率相比,经统计学处理具有显著差异,认为西北地区牦牛体内寄生的细粒棘球蚴囊液抗原不乏抗原活性;氯化镁—磷钨酸法和半饱和硫酸铵法是两种简便易行,纯化效果理想的抗原纯化方法,宜于在基层推广应用。

PCR、SPA-ELISA、GDT3种方法检测猪伪狂犬病毒的效果比较

为了比较临床中常用的猪伪狂犬病诊断方法的检测效果,试验采用常规方法对猪伪狂犬病毒进行不同浓度梯度的稀释,分别通过聚合酶链式反应(PCR)、葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)、琼脂扩散试验(GDT)3种方法对猪伪狂犬病毒进行检测,并对各种方法的敏感性、可重复性、经济性、简便性进行综合分析。结果表明:SPA-ELISA法和PCR法的灵敏度都远远高于GDT法,并且二者的敏感性相当;PCR法和SPA-ELISA法适用于实验室对PRV的确诊;GDT法所耗费的材料较少、经济、操作简便,适合于临床大规模的检测和初次检测猪伪狂犬病毒的存在。

SPA-ELISA检测肺螨病患者血清螨特异性IgG

应用SPA-ELISA方法,对32例肺螨病患者血清螨特异性IgG进行了检测,并同30名疥疮患者和30名蠕形螨感染者以及32名健康人进行了比较。结果32例肺螨病患者滤纸血片标本的血清反应液呈鲜明的黄色、深黄色,31例疥疮患者和30例蠕形螨感染者以及32名健康人的滤纸血片标本的血清反应液呈微黄色或无色。对比之下有目测可辨的显著差异,与健康人无交叉反应,说明此方法具有高度的特异性和敏感性,对于检测肺螨类的感染或肺螨类变应原引起的变态反应性疾病具有一定的诊断价值,是肺螨病流行病学调查中一种较为理想的免疫血清学方法。

二种滤纸血滴片SPA-ELISA诊断囊虫病的应用

用快速SPA－ELISA和SPA－ELISA一步法检测囊虫病人的滤纸血滴片和血清，前者阳性率分别为83．05％和86.44％．后者分别为96．67％和94.91％，均无统计学差异（P＞0．05）；两法的假阳性率均为3．33％。实验条件的研究表明：血滤纸4℃浸泡过夜和室温浸泡2h的阳性率为83．05％和84．38％，直径1．2cm和0．6cm阳性率为83．05％和85．29％，亦均无显著性差异（P＞0．05）。说明滤纸血滴片可以代替血清样本，具有敏感、安全、简便以及非常实用等优点，血滴片SPA－ELISA在囊虫病的诊断及流行病学调查中有较好的应用价值。

应用SPA—ELISA检测鸡ILT

鸡传染性喉气管炎(ILT)的感染早期及非急性病例与其它呼吸道病难於区别。曾有学者通过检测病鸡气管中包涵体的方法及应用荧光抗体技术进行诊断,但都因需要昂贵的设备及操作技术难度大而未能推广。广东省兽医研究所用SPA—ELISA方法检测病鸡喉头拭子所采集的鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒抗原。对室内人工发病三群共52只病鸡。

ABC-ELISA法诊断肠螨病的研究

目的 探讨生物素 -亲和素酶联免疫吸附试验 (ABC -ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值。方法 采集 4 8例肠螨病患者血清 ,用ABC -ELISA法检测血清中螨特异性抗体IgG ,并与葡萄球菌A -蛋白酶联免疫吸附试验 (SPA -ELISA)进行比较。结果 用ABC -ELISA法和SPA -ELISA法检测 4 8例肠螨病患者血清中的螨特异性抗体IgG阳性率分别为89 5 8% (43/ 4 8)和 5 6 2 5 % (2 7/ 4 8) ,两者比较 ,差异具显著性 (χ2 =13 5 0 ,P <0 0 1)。结论 ABC

ABC-ELISA法诊断肠螨病的研究

目的:探讨生物素-亲和素酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值。方法:采集48例肠螨病患者血清,用ABC-ELISA法检测血清螨特异性抗体IgG,并与葡萄球菌A-蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)进行比较。结果:用ABC-ELISA法和SPA-ELISA法检测48例肠螨病患者血清螨特异性抗体IgG阳性率分别为89.58%(43/48)和56.25%(27/48),两者比较,差异具显著性(2χ=13.50,P<0.01)。结论:ABC-ELISA法比SPA-ELISA法更有效诊断肠螨病。

快速ELISA法诊断犬内脏利什曼病及应用价值的研究

本研究建立了一种用PVC薄膜作载体、将前鞭毛体可溶性抗原包被在PVC凹板上,采用HRP-SPA作第二抗体及无毒的TMB作底物的快速ELISA方法,该法简便、经济、实用。与经典ELISA平行对照检测24份骨髓穿刺证实的内脏利什曼病犬血清,结果:快速ELISA法阳性符合率为100％(24/24),而经典ELISA法为95.83％(23/24);对47份采自非流行区的正常犬血清,两法均仅有1例呈假阳性反应,占2.13％;用快速ELISA法检测实验感染了旋毛虫、肺吸虫、钩虫、弓形虫等犬血清共26份,均未见交叉反应。用该法又调查了四川汶川县黑热病重流行区的124份犬血清,同时进行骨髓涂片检查,结果快速ELISA查出阳性犬39只,占31.45％(39/124),骨髓涂片查见利什曼原虫者有24只,占19.35％(24/124),这24只犬血清对快速ELISA法均呈阳性反应。

二种快速ELISA用于检测囊虫病患者血清特异性抗体的实验观察

用快速ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ和快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测囊虫病人血清抗体，其阳性率分别为９０．００％和９４．２９％，两虫之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。两法假阴性率分别为１．４３％和２．８６％，对包虫病人血清出现较强交叉反应，对肝吸虫、肺吸虫病人血清出现一定程度的交叉反应，而对血吸虫病人、绦虫病人血清未出现交叉反应。若两种方法同时使用可提高敏感性。两种方法均较简便，在包虫病非流行区可作为较好的流行病学调查筛检方法。

E-coli和Yeast菌体蛋白ELISA定量测定方法的建立

目的:提高酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的灵敏度。方法:将聚苯乙烯微孔板(PS)经过紫外线(UV)辐照后,用葡萄球菌A蛋白(SPA)预包被,再应用生物素-链霉亲和素(BSA)反应建立双抗体夹心ELISA。结果:检测低限为1.95ng/ml,方法的批内变异分别为7.96%和8.63%。结论:为菌体蛋白的测定提供了一种新的方法。