淡水养殖鱼类主要细菌性传染病快速诊断的研究——鱼病诊断箱的应用试验

应用以葡萄球菌Ａ蛋白协同凝集试验（ＳＰＡ－ＣＯＡ）为主要检测手段的鱼病诊断箱，于１９９５～１９９７年在吉林、辽宁等７省进行现场检测试验。结果，６１个渔场１１个品种的５１６尾病鱼有菌生长的为２８５尾，经ＳＰＡ－ＣＯＡ鉴定阳性数为２３９尾，占有菌生长的８３．８６％；１２个渔场５个品种１２１６尾假定健康鱼有菌生长的为２８尾，经ＳＰＡ－ＣＯＡ鉴定阳性数为２２尾，占有菌生长的７８．５７％。认为本诊断箱适用于基层渔场。能用ＳＰＡ－ＣＯＡ法鉴定１６株病原菌等工作。

SPA协同凝集试验快速诊断鸡马立克氏病的研究

应用鸡胚成纤维细胞(CEF)培养MDV-814株,经反复冻融、超声波处理、差速离心法纯化病毒,制成油乳剂灭活抗原;皮内多点注射法免疫健康家兔,获得高效价的免疫血清,经56℃、30min灭能,用硫酸铵沉降3次后,再用透析袋透洗,以除去部分NH4+和SO42-,最后用DEAE离子交换柱提取IgG。用IgG 2次标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)制成致敏的SPA菌悬液,用SPA协同凝集试验检测病鸡羽毛囊中MD特异性抗原。试验证明,上述方法的灵敏度是AGPT的48倍。整个试验只需几分钟即可完成,不需要复杂的仪器设备,具有操作简便,检测速度快,结果准确和便于现场应用等优点。

SPA协同凝集快速检测华支睾吸虫感染方法研究

目的:研究用更加简便、快速、敏感、经济有效的SPA协同凝集实验替代镜检法检测华支睾吸虫。方法:用待检血清致敏SPA菌株,用华支睾吸虫囊蚴感染动物,获取虫体抗原进行反向协同凝集试验。结果:10份镜检华支睾吸虫虫卵阳性血和5份感染华支睾吸虫囊蚴的鼠血SPA协同凝集试验均为阳性;10份华支睾吸虫便检阴性和5份未感染华支睾吸虫囊蚴的大白鼠血均为阴性;便检华支睾吸虫卵阴性,回虫、蛲虫、鞭虫等虫卵阳性的血液10份血,结果均为阴性;Cowan l菌株无自凝。结论:该试验作为华支睾吸虫临床及流行病学调查的一种检测方法优于传统的镜检法,特别是流行病学调查更为实用。

鸡新城疫快速诊断试剂的研究

用特异的鸡新城疫（ＮＤＶ）高免血清与金黄葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）致敏，经协同凝集方法（ＣｏＡ）制备鸡新城疫快速诊断试剂，确定了制备工艺、标准操作程序，该制剂特异性强，不与健康禽的组织及其它几种病毒病（鸡传染性法氏囊炎、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性支气管炎、鸡马立克氏病等）发生交叉凝集反应。同时具有灵敏度高、微量、操作简便，易掌握、省时、快速等特点。可在３－５ｍｉｎ获得诊断结果。制剂最后经冷冻干燥成型，便于保存、运输，适于兽医临床及养殖户应用。

应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验快速检测3株鱼类致病菌

本试验用富含葡萄球菌Ａ蛋白的国际标准菌株ｃｏｗａｎⅠ分别标记３株引起鱼类致病的荧光假单胞菌、鳗弧菌和鲁克氏耶尔森菌的特异高免血清制成ＳＰＡ诊断液，建立了检测这３株病原菌的协同凝集试验。将待检病料培养１６—１８ｈ，用该法检测３ｍｉｎ可判定结果，比常规玻片法敏感２５—５０倍；经交叉试验和重复性试验，表明特异性强，敏感性高，可重复性好，且具有简便快速经济等特点。适用于基层鱼场，可用于淡水鱼类病原菌的快速鉴定、疫情预报和流行病学调查。

SPA协同凝集试验快速诊断流脑的研究

本文报告了用A群脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清包被在含有丰富A蛋白的CowanⅡ株金黄色葡萄球菌上,制成SPA-血清试剂检测流脑病人脑脊髓液(CSF)、血液、尿液中的多糖抗原,而且用细菌培养及双份血清间接血凝试验作为平行对比试验。作者于1984～1986年流脑流行期采集流脑病人(包括20例培养分离出A群脑膜炎双球菌患者)的188份CSF、血清、尿液和非流脑病人的64份CSF、血清、尿液三种标本进行SPA协同凝集试验(简称SPA-COA试验)。结果证明该方法简便,不需要特殊设备,具有对流脑病人标本(CSF、血清、尿液)中的脑膜炎双球菌抗原的检测达到敏感、特异、快速实验诊断的目的。

貂、貉、犬病毒性肠炎快速诊断试剂的研究

用金黄葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）协同凝集方法（ＣｏＡ）对貂、貉、犬病毒性肠炎快速诊断的试剂进行了制备，确定了制备。艺及该制剂的标准操作程序。本制剂特异性强，不与健康动物的组织及其他几种病毒病（犬瘟热、犬传染性肝炎、狂犬病等）发生交叉凝集反应，灵敏度高，通过该制剂ＣｏＡ法与ＨＡ－ＨＩ法比较结果比现行的貂、貉、犬病毒性肠炎ＨＡ－ＨＩ诊断方法检出率高出３０％，同时具有微量、操作简便、易掌握、快速等特点，可在３～５ｍｉｎ获得诊断结果。

犬瘟热快速诊断试剂的研究

用特异的犬瘟热高免血清与金黄葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）致敏，经协同凝集方法（ＣＯＡ）制备犬瘟热快速诊断试剂，确定了制备工艺及标准操作程序。该制剂特异性强，与不健康动物的组织及其它几种病毒病（犬细小病毒肠炎、犬传染性肝炎、狂犬病等）发生交叉凝集反应，同时具有灵敏度高、微量，操作简便、易掌握省时，快速等特点，可在３～５ｍｉｎ获得诊断结果。制剂最后经冷冻干燥成型，便于保存、运输，适于兽医临床及养殖户应用。

血吸虫病流行病学调查中三种检测方法的比较研究

应用粪便检查、环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）、金黄色葡萄球菌Ａ蛋白协同凝集试验（ＳＰＡ一ＣｏＡ）３种方法检测血吸虫病流行区居民３６２例，粪检、ＣＯＰＴ和ＳＰＡ一ＣｏＡ阳性率分别为８．８４％，３４．２５％和１６．３０％。ＣＯＰＴ与粪检阳性符合率９０．６２％，ＳＰＡ一ＣｏＡ与粪检阳性符合率９３．７５％；ＣＯＰＴ与粪检阴性符合率７１．２１％，ＳＰＡ一ＣｏＡ与粪检阴性符合率８６．３０％。正常人血清９５例，ＣＯＰＴ均阴性，ＳＰＡ一ＣｏＡ阳性率３．１６％。调查结果表明，ＳＰＡ一ＣｏＡ方法有较高的敏感性，在血吸虫病流行病学调查中，是一种较好的方法。