目的:探讨富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白类似物1(secreted protein acidic and rich in cysteines-like 1,SPARCL1)基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响。方法:将肝癌SMMC-7721细胞随机分为5组,即空白对照组,p IRES2-Zs Green组,pI...目的:探讨富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白类似物1(secreted protein acidic and rich in cysteines-like 1,SPARCL1)基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响。方法:将肝癌SMMC-7721细胞随机分为5组,即空白对照组,p IRES2-Zs Green组,pIRES2-Zs Green-SPARCL1组,阴性siRNA组和SPARCL1 siRNA组,空白对照组不转染,其余4组分别转染p IRES2-Zs Green空质粒、pIRES2-Zs Green-SPARCL1、阴性siRNA及SPARCL1 siRNA;蛋白质印迹法检测SPARCL1蛋白表达,同时联合荧光显微镜检测转染效果;MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:蛋白质印迹和荧光镜结果同时证实转染效果良好。MTT结果显示5组细胞抑制率差异有统计学意义(F=55.45,P<0.01),p IRES2-Zs Green-SPARCL1组增殖抑制率明显高于其余4组(P<0.05);SPARCL1 siRNA组细胞增殖抑制率低于其余4组(P<0.05)。流式细胞结果显示pIRES2-Zs Green-SPARCL1组凋亡率明显高于其余4组(P<0.05);SPARCL1 siRNA组凋亡率明显低于其余4组(P<0.05)。结论:过表达SPARCL1抑制肝癌细胞SMMC-7721生长和促进凋亡,沉默SPARCL1则反之。展开更多
背景与目的:SPARC类似蛋白1(SPARC-like 1,SPARCL1)是细胞外基质蛋白SPARC相关家族成员,在多种肿瘤细胞中低表达,有肿瘤抑制作用。本研究探讨其在胆管癌中的表达及与预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学技术检测胆管癌和部分...背景与目的:SPARC类似蛋白1(SPARC-like 1,SPARCL1)是细胞外基质蛋白SPARC相关家族成员,在多种肿瘤细胞中低表达,有肿瘤抑制作用。本研究探讨其在胆管癌中的表达及与预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学技术检测胆管癌和部分癌旁非肿瘤组织中SPARCL1蛋白的表达,并分析其与各项临床病理参数及患者预后的关系。结果:免疫组化结果显示,SPARCL1在胆管癌中的表达率为47.9%(23/48),在癌旁胆管上皮中均有表达。SPARCL1的表达与区域淋巴结转移和神经侵犯呈负相关,生存期分析显示SPARCL1阳性患者预后明显优于阴性患者(37.3 vs 12.8个月,P<0.001)。结论:SPARCL1在胆管癌的发生发展过程中起着重要作用,是影响胆管癌患者预后的重要因素。展开更多
为了探究小尾寒羊富含半胱氨酸酸性分泌蛋白类似物1(secreted protein acidic and rich in cysteine like 1,SPARCL 1)基因结构及其各组织间表达差异,试验提取小尾寒羊肝脏组织总RNA,根据GenBank中公布的绵羊SPARCL 1基因序列设计引物,...为了探究小尾寒羊富含半胱氨酸酸性分泌蛋白类似物1(secreted protein acidic and rich in cysteine like 1,SPARCL 1)基因结构及其各组织间表达差异,试验提取小尾寒羊肝脏组织总RNA,根据GenBank中公布的绵羊SPARCL 1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增SPARCL 1基因编码区(CDS)。将扩增产物连接到pMD18-T载体进行测序,获得小尾寒羊SPARCL 1基因完整CDS区序列信息,应用生物信息学软件分析序列及蛋白结构。以小尾寒羊心脏、肝脏、肌肉、胃、十二指肠、小肠组织mRNA为模板,通过实时定量荧光PCR技术检测SPARCL 1基因在小尾寒羊各组织间的表达差异。结果显示,试验成功获得小尾寒羊SPARCL 1基因CDS 1962 bp,编码653个氨基酸;分子质量为74.39 ku,理论等电点为4.64,为亲水性蛋白质;SPARCL 1基因具有信息肽切割位点,为分泌蛋白;小尾寒羊SPARCL 1基因序列与NCBI中绵羊序列同源性为99.80%,SPARCL 1基因CDS区出现4处突变位点,但未引起氨基酸改变;SPARCL1蛋白存在77个蛋白磷酸化位点和3个糖基化位点;SPARCL1蛋白表达预测主要定位在细胞质;SPARCL1蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲分别占31.9%、6.4%、28.7%和33.0%,三级结构预测结果与其一致。SPARCL 1基因在小尾寒羊皮下脂肪组织中相对表达量明显高于其他组织。本研究成功克隆获得小尾寒羊SPARCL 1基因CDS区完整序列,并对其序列、蛋白理化特性、结构及各组织间表达差异进行了详细分析,为研究小尾寒羊SPARCL 1基因功能,探究其在小尾寒羊脂肪代谢过程中可能发挥的作用提供参考依据。展开更多
AIM: To investigate the expression of markers that are correlated with the prognosis of colorectal cancer (CRC) patients. METHODS: One hundred and fifty-six CRC patientswere followed up for more than 3 years after rad...AIM: To investigate the expression of markers that are correlated with the prognosis of colorectal cancer (CRC) patients. METHODS: One hundred and fifty-six CRC patientswere followed up for more than 3 years after radical surgery. Immunohistochemical (IHC) analysis was performed to detect the expression of 14 pathway-related markers (p53, APC, p21ras, E-cadherin, endothelin-B receptor, Shp2, ADCY-2, SPARCL1, neuroligin1, hsp27, mmp-9, MAPK, MSH2 and rho) in specimens from these patients. Bioinformatics analysis involving a Support Vector Machine (SVM) was used to determine the best prognostic model from combinations of these markers. RESULTS: Seven markers (SPARCL1, Shp2, MSH2, E-cadherin, p53, ADCY-2 and MAPK) were significantly related to the prognosis and clinical pathological features of the CRC patients (P < 0.05). Prognostic models were established through SVM from combinations of these 7 markers and proved able to differentiate patients with dissimilar survival, especially in stage Ⅱ/Ⅲ patients. According to the best prognostic model, the p53/SPARCL1 model, patients having high p53 and low SPARCL1 expression had about 50% lower 3-year survival than others (P < 0.001). CONCLUSION: SPARCL1, Shp2, MSH2, E-cadherin, p53, ADCY-2 and MAPK are potential prognostic markers in CRC. A p53/SPARCL1 bioinformatics model may be used as a supplement to tumor-nodes-metastasis staging.展开更多
目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手...目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手术治疗的84例NSCLC患者癌组织与相应癌旁组织,实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定并比较各组织以及正常肺上皮细胞HBEpiC、NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292中SPARCL1信使RNA(m RNA)表达水平,选取A549、HCC827培养并分组,分为对照组、NC si RNA组、SPARCL1 si RNA组、U0126组(MEK/ERK特异性抑制剂)、SPARCL1 si RNA加U0126组,细胞计数法(CCK8)以及平板克隆法测定A549、HCC827细胞增殖,流式细胞仪测定A549、HCC827细胞凋亡,Transwell小室法测定A549、HCC827细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(western blot)检测SPARCL1、p-MEK、MEK、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达。结果:SPARCL1在NSCLC组织中m RNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05);与HBEpiC细胞相比,NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292细胞中SPARCL1 m RNA表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,SPARCL1 si RNA组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率降低(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05);与SPARCL1 si RNA组相比,SPARCL1 si RNA加U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:SPARCL1可能通过调控MEK/ERK通路影响NSCLC A549、HCC827细胞增殖、侵袭与凋亡。展开更多
本实验旨在利用生物信息方法寻找与绵羊脂代谢相关的候选基因并通过实时荧光定量以及Western Blot方法进行验证。利用NCBI网站中的公共测序数据找到3个与脂代谢相关的测序数据,每个测序数据取前250个差异表达基因作为备选结果,然后将3...本实验旨在利用生物信息方法寻找与绵羊脂代谢相关的候选基因并通过实时荧光定量以及Western Blot方法进行验证。利用NCBI网站中的公共测序数据找到3个与脂代谢相关的测序数据,每个测序数据取前250个差异表达基因作为备选结果,然后将3组数据中共有的差异表达基因作为研究对象,实时荧光定量PCR检测此基因在不同绵羊个体脂肪组织中的表达差异以及在同一只绵羊不同组织中的表达趋势,并检测基因在脂肪细胞分化过程中的表达规律。结果显示:3组脂代谢相关的公共数据有1个共有基因,即富含半胱氨酸酸性分泌蛋白类似物1(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine Like 1, SPARCL1)。SPARCL1基因在绵羊脂肪组织中显著表达,在不同个体脂肪组织中的表达量存在显著差异,在绵羊脂肪细胞分化前后SPARCL1基因出现差异表达。综上,SPARCL1基因可能是参与绵羊脂肪代谢的重要基因,其具体功能及作用机制需要进一步探究。展开更多
文摘背景与目的:SPARC类似蛋白1(SPARC-like 1,SPARCL1)是细胞外基质蛋白SPARC相关家族成员,在多种肿瘤细胞中低表达,有肿瘤抑制作用。本研究探讨其在胆管癌中的表达及与预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学技术检测胆管癌和部分癌旁非肿瘤组织中SPARCL1蛋白的表达,并分析其与各项临床病理参数及患者预后的关系。结果:免疫组化结果显示,SPARCL1在胆管癌中的表达率为47.9%(23/48),在癌旁胆管上皮中均有表达。SPARCL1的表达与区域淋巴结转移和神经侵犯呈负相关,生存期分析显示SPARCL1阳性患者预后明显优于阴性患者(37.3 vs 12.8个月,P<0.001)。结论:SPARCL1在胆管癌的发生发展过程中起着重要作用,是影响胆管癌患者预后的重要因素。
基金Supported by Grants from the Major State Basic Research Development Program of China, 973 Program No. 2004CB518707the Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of China,No. R2090353the Fundamental Research Funds for the Central Universities, No. KYJD09007
文摘AIM: To investigate the expression of markers that are correlated with the prognosis of colorectal cancer (CRC) patients. METHODS: One hundred and fifty-six CRC patientswere followed up for more than 3 years after radical surgery. Immunohistochemical (IHC) analysis was performed to detect the expression of 14 pathway-related markers (p53, APC, p21ras, E-cadherin, endothelin-B receptor, Shp2, ADCY-2, SPARCL1, neuroligin1, hsp27, mmp-9, MAPK, MSH2 and rho) in specimens from these patients. Bioinformatics analysis involving a Support Vector Machine (SVM) was used to determine the best prognostic model from combinations of these markers. RESULTS: Seven markers (SPARCL1, Shp2, MSH2, E-cadherin, p53, ADCY-2 and MAPK) were significantly related to the prognosis and clinical pathological features of the CRC patients (P < 0.05). Prognostic models were established through SVM from combinations of these 7 markers and proved able to differentiate patients with dissimilar survival, especially in stage Ⅱ/Ⅲ patients. According to the best prognostic model, the p53/SPARCL1 model, patients having high p53 and low SPARCL1 expression had about 50% lower 3-year survival than others (P < 0.001). CONCLUSION: SPARCL1, Shp2, MSH2, E-cadherin, p53, ADCY-2 and MAPK are potential prognostic markers in CRC. A p53/SPARCL1 bioinformatics model may be used as a supplement to tumor-nodes-metastasis staging.
文摘目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手术治疗的84例NSCLC患者癌组织与相应癌旁组织,实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定并比较各组织以及正常肺上皮细胞HBEpiC、NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292中SPARCL1信使RNA(m RNA)表达水平,选取A549、HCC827培养并分组,分为对照组、NC si RNA组、SPARCL1 si RNA组、U0126组(MEK/ERK特异性抑制剂)、SPARCL1 si RNA加U0126组,细胞计数法(CCK8)以及平板克隆法测定A549、HCC827细胞增殖,流式细胞仪测定A549、HCC827细胞凋亡,Transwell小室法测定A549、HCC827细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(western blot)检测SPARCL1、p-MEK、MEK、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达。结果:SPARCL1在NSCLC组织中m RNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05);与HBEpiC细胞相比,NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292细胞中SPARCL1 m RNA表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,SPARCL1 si RNA组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率降低(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05);与SPARCL1 si RNA组相比,SPARCL1 si RNA加U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:SPARCL1可能通过调控MEK/ERK通路影响NSCLC A549、HCC827细胞增殖、侵袭与凋亡。
文摘本实验旨在利用生物信息方法寻找与绵羊脂代谢相关的候选基因并通过实时荧光定量以及Western Blot方法进行验证。利用NCBI网站中的公共测序数据找到3个与脂代谢相关的测序数据,每个测序数据取前250个差异表达基因作为备选结果,然后将3组数据中共有的差异表达基因作为研究对象,实时荧光定量PCR检测此基因在不同绵羊个体脂肪组织中的表达差异以及在同一只绵羊不同组织中的表达趋势,并检测基因在脂肪细胞分化过程中的表达规律。结果显示:3组脂代谢相关的公共数据有1个共有基因,即富含半胱氨酸酸性分泌蛋白类似物1(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine Like 1, SPARCL1)。SPARCL1基因在绵羊脂肪组织中显著表达,在不同个体脂肪组织中的表达量存在显著差异,在绵羊脂肪细胞分化前后SPARCL1基因出现差异表达。综上,SPARCL1基因可能是参与绵羊脂肪代谢的重要基因,其具体功能及作用机制需要进一步探究。
