毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞生长及凋亡的影响

目的建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型,探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌移植瘤生长及凋亡的影响。方法30只裸鼠(6~8周龄)适应性饲养一周后,将制备好的SPC-A1细胞悬液(浓度为5×105个/mL)经腋下皮下注射,拟建造SPC-A1肺腺癌细胞移植瘤模型;按照裸鼠的重量及瘤体的体积大小,随机分为模型组、毛蕊异黄酮组、顺铂组,每组6只;记录各组裸鼠实验前后的体质量、瘤重、瘤体横径和纵径,并分析各组裸鼠模型的肿瘤抑制率,测估SPC-A1裸鼠移植瘤的体积大小及生长状况;通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)测定法测定SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的凋亡状况;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组瘤体中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果顺利构建了肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的模型。与模型组比较,毛蕊异黄酮组裸鼠瘤的瘤重[(1.20±0.19)g vs(0.98±0.14)g]明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),且抑瘤率为18.33%,表明毛蕊异黄酮能有效抑制SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的生长;TUNEL法检测的各组裸鼠移植瘤细胞的凋亡结果分析表明,与模型组比较,毛蕊异黄酮组凋亡率[(10.00±0.82)%vs(32.43±1.99)%]明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),证实毛蕊异黄酮可有效诱导肺腺癌SPC-A1细胞的凋亡作用;Western blot结果显示,毛蕊异黄酮能明显上调促凋亡相关蛋白Bax的表达水平,同时能明显下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论毛蕊异黄酮能够明显抑制SPC-A1裸鼠移植瘤的生长并促进肺癌细胞的凋亡。

黄芪总皂苷对肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡能力及HIF-1α/VEGF信号通路蛋白表达的影响

目的探讨黄芪总皂苷对肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡能力的影响及其机制是否与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路有关。方法将肺腺癌A549细胞分为黄芪总皂苷高、中、低剂量组和对照组,分别加入浓度为200、100、50μmol/L的黄芪总皂苷和等体积的二甲基亚砜(DMSO),培养24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测HIF-1α、VEGF及表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达。结果黄芪总皂苷高、中、低剂量组和对照组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率依次降低,细胞迁移距离依次升高,组间两两比较P均<0.05。黄芪总皂苷高、中、低剂量组和对照组细胞HIF-1α、VEGF及EGFR蛋白相对表达量均依次升高,组间两两比较P均<0.05。结论黄芪总皂苷可降低肺腺癌细胞的增殖、迁移能力,并诱导其凋亡,且随浓度升高而更明显,其机制可能与抑制HIF-1α/VEGF信号通路有关。

体外探究脱落酸对肺腺癌细胞系Spc-A1自噬的影响

目的观察脱落酸(ABA)作用于肺腺癌细胞株Spc-A1引起自噬方面的变化,研究ABA对Spc-A1细胞自噬的影响。方法以人肺腺癌细胞系Spc-A1为研究对象,ABA给药浓度分别为0.8、20、100μmol/L,采用MTT法检测ABA作用后Spc-A1细胞的活力;激光共聚焦显微镜观察ABA作用于Spc-A1细胞后自噬现象;提取培养细胞mRNA及蛋白质,分别采用荧光实时定量PCR、蛋白印迹法检测自噬相关基因Beclin-1及LC3-Ⅱ的表达。结果 ABA作用后,肺腺癌细胞Spc-A1活力随着ABA浓度的增高而下降,各处理组之间差异具有统计学意义(P<0.001);ABA可诱导Spc-A1细胞自噬,自噬现象随药物浓度增高而增加;ABA处理后Bec-lin-1及LC3-Ⅱ的mRNA表达量随着ABA浓度的增加而增高,各处理组表达量差异具有统计学意义(P<0.05);蛋白表达结果显示ABA 100μmol/L处理组与对照组Beclin-1表达量差异具有显著性(P=0.04);ABA 100μmol/L处理组与对照组LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.005),ABA 0.8μmol/L组与ABA 100μmol/L组之间LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.039),余处理组表达量两两之间未见显著性差异。结论 ABA可通过调节自噬信号转导通路中相关基因的表达诱导肺腺癌细胞Spc-A1自噬,随着自噬的增加,可能抑制肿瘤的生长。

RAB5A基因表达改变对人肺腺癌细胞系GLC-82和SPC-a1的分化和侵袭特性影响

为探讨RAB5A基因对两种人肺腺癌细胞系GLC 82和SPC al分化及侵袭特性的影响 ,利用细胞转染技术将构建的RAB5A反义RNA重组质粒 (pcDNA3 AntiRAB5A)和RAB5A正义真核表达载体分别转染入低分化人肺腺癌细胞系GLC 82和低转移人肺腺癌细胞系SPC al中 ,在稳定筛选后 ,通过裸鼠体内实验和体外人工基底膜侵袭和细胞趋化运动实验 ,观察转染后细胞分化和转移特性的改变。观察转染前后细胞 ,发现转染后GLC 82细胞体外侵袭重组基底膜能力及趋化运动能力降低 (t检验P <0 .0 2 ) ;裸鼠体内成瘤实验 ,瘤块切片病理观察转染后GLC 82细胞出现腺腔样及基底模样结构 ,分化程度增高。转染后SPC al细胞体外趋化运动能力、侵袭重组基底膜能力均增强 (t检验P <0 .0 2 )。RAB5A基因通过影响细胞的体外趋化运动能力、侵袭重组基底膜能力等对GLC 82和SPC al细胞的侵袭转移表型形成及GLC 82细胞的分化性发挥重要作用。

CDA1在肺腺癌细胞株SPC-A1中表达的作用

目的观察CDA1在肺腺癌细胞株SPC-A1加入干扰素γ及喜树碱前后表达的变化,明确CDA1在肺腺癌发生发展中作用。方法人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞体外培养分为四组即对照组、喜树碱组、干扰素γ组和喜树碱及扰素γ联合组,采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖情况,运用real time RT-PCR及Western blot法测定CDA1、P53、P21、CyclinD1 mRNA及蛋白的表达,分析其相关性。结果 MTT比色法结果显示分别或共同加入喜树碱及干扰素γ24h后SPC-A1细胞增殖均不同程度地受到抑制,联合加入喜树碱和干扰素γ组细胞增殖抑制程度比单独加入干扰素γ及喜树碱组明显(P<0.05);real time RT-PCR和Western blot检测显示,SPC-A1细胞中单独加入喜树碱和干扰素γ24h后CDA1 mRNA及蛋白的表达均增加(P<0.05),同时P21、P53 mRNA及蛋白表达增加及CyclinD1蛋白表达减少(P<0.05),联合加入喜树碱和干扰素γ组比单独加入干扰素γ及喜树碱组明显(P<0.05);在SPC-A1细胞中加入干扰素γ及喜树碱,CDA1与P53、P21蛋白表达呈正相关(r分别为0.853,0.797),与CyclinD1蛋白表达呈负相关(r为-0.939)。结论 CDA1在肺腺癌SPC-A1细胞株中表达降低,当分别加入或联合加入干扰素γ及喜树碱后细胞增殖受到抑制同时CDA1出现高表达;在肺腺癌细胞株SPC-A1中,CDA1与P53、P21的表达呈正相关,与Cy-clinD1的表达呈负相关。由此推测CDA1在肺腺癌发生、发展可能有重要作用。

TM6SF1基因在肺腺癌细胞中的作用

目的:探讨TM6SF1基因在肺腺癌细胞中的作用。方法:通过GEPIA数据库分析TM6SF1基因在肺腺癌及正常组织中的表达情况;细胞增殖实验检测过表达TM6SF1后,A549细胞的增殖情况;细胞划痕实验检测过表达TM6SF1后,A549细胞伤口愈合情况;Transwell细胞实验检测过表达TM6SF1后,A549细胞侵袭和迁移情况。结果:通过GEPIA数据库分析得知,与正常组织相比,TM6SF1在肺腺癌中的表达降低,差异有统计学意义(^(*)P<0.05,^(**)P<0.01,^(***)P<0.001),且高表达TM6SF1组生存期更长。另外,TM6SF1与细胞增殖相关的核抗原Ki-67具有负相关性。过表达TM6SF1后,A549细胞的增殖,侵袭和迁移都受到抑制,差异有统计学意义(^(*)P<0.05,^(**)P<0.01,^(***)P<0.001),且下调细胞中信号(PI3K/Akt)通路相关激酶的表达。结论:TM6SF1基因在肺腺癌中可能作为抑癌因子。

内皮素-1对人肺腺癌细胞SPC-A1生长的影响

背景与目的内皮素-1（endothelin-1,ET-1）是强大的细胞促有丝分裂素,在一些肿瘤细胞生长和肿瘤血管新生中起重要作用。本研究的目的是探讨ET-1对人肺腺癌细胞SPC-A1生长的影响。方法采用细胞体外培养技术,四甲基偶氮唑盐[3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT]显色分光光度法测细胞增殖,流式细胞仪测细胞周期。结果ET-1（1×10^-15-1×10^-9mol/L）具有促进SPC-A1细胞增殖作用,作用呈浓度依赖性,在1×10-11mol/L时作用呈饱和状态;ET-1（1×10^-10mol/L）促SPC-A1细胞增殖作用可被内皮素受体A（endothelin receptor A,ETA）拮抗剂BQ123（1×10^-7mol/L）阻断,但不受内皮素受体B（endothelin receptor B,ETB）拮抗剂BQ788（1×10^-7mol/L）影响;用乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA）（0.4mmol/L）去除细胞外钙离子及电压依赖型Ca2＋通道阻滞剂硝苯地平（nifedipine,1μmol/L）能抑制ET-1诱导的肺腺癌细胞增殖。ET-1（1×10^-10mol/L）对SPC-A1细胞周期没有显著影响。结论ET-1为促SPC-A1细胞生长因子,ET-1促肺腺癌细胞生长的作用主要通过SPC-A1细胞表面ETA受体实现,细胞外钙离子通过电压依赖型Ca^2＋通道内流在ET-1促肺腺癌细胞生长中起重要作用。

纳米金对SPC-A1肺癌细胞体外放射增敏作用的研究

目的研究纳米金联合兆伏级射线对肺腺癌SPC-A1细胞的体外放射增敏作用,并从细胞周期、细胞凋亡角度探讨纳米金的放射增敏机制。方法选用肺腺癌SPC-A1细胞进行体外培养,采用CCK-8法检测不同浓度纳米金(0、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L)处理SPC-A1细胞24、48、72 h后的细胞毒性,确定纳米金溶液的实验浓度;经纳米金溶液培养的SPC-A1细胞株分别给予6 MV X线和4 Me V电子线照射0、1、2、4、6、8 Gy后,体外细胞培养克隆法研究纳米金的放射增敏作用,计算存活分数。使用单击多靶模型公式拟合,计算出Dq、D0等放射生物学参数和放射增敏比(SER);流式细胞仪检测纳米金处理SPC-A1细胞24 h后各组的细胞凋亡和细胞周期的变化。结果不同浓度纳米金处理不同时间后,对SPC-A1细胞的增殖无明显抑制,确定以纳米金溶液初始浓度(0.25 mmol/L)作为实验浓度。直径25 nm、0.25 mmol/L的纳米金粒子联合6 MV X线和4 Me V电子线照射SPC-A1细胞的SER分别是1.111和1.214。流式细胞仪检测显示,纳米金不增加细胞的凋亡,但能明显增加射线对细胞的凋亡作用。细胞周期显示纳米金能加速细胞的G0/G1期,使细胞周期阻滞在G2/M期。结论纳米金联合6 MV X线或4 Me V电子线对SPC-A1细胞有放射增敏作用,其机制可能与增加射线对细胞的凋亡和细胞周期同步化有关。

蛇毒复合酶对人肺腺癌细胞spc-A1的抑瘤研究

探讨蛇毒复合酶对人肺腺癌细胞 spc- A1体外生长的抑制作用。方法 :经体外细胞培养 ,采用台盼兰拒染法、细胞形态学观察和流式细胞术 ,检测人肺腺癌细胞的生长抑制率 ,以及细胞形态和细胞周期的变化。结果 :蛇毒复合酶对人肺腺癌细胞有明显的抑瘤作用 ,最大抑瘤率达87.5%。镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢。流式细胞术分析显示蛇毒复合酶主要杀伤 G2 / M期细胞 ,同时阻滞 G0 / G1期细胞进入 S期。结论 :蛇毒复合酶对人肺腺癌细胞具有一定体外抑瘤作用 ,其作用机理与破坏细胞膜和干扰细胞生长周期有关。

miRNA-181c对人肺腺癌细胞系SPC-A1增殖和侵袭的影响

目的探讨miRNA-181c(miR-181c)在人肺腺癌组织中的表达及其对人肺腺癌细胞系SPC-A1增殖和侵袭的影响。方法收集37例肺腺癌患者组织标本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺腺癌组织及相应癌旁组织中miR-181c的表达水平。脂质体法将miR-181c模拟物和miR-181c抑制剂分别转染至SPC-A1细胞中,CCK-8增殖实验检测转染后SPC-A1细胞的增殖能力,Transwell法检测转染后SPC-A1细胞的侵袭能力。结果肺腺癌组织中miR-181c的表达水平[3.259(1.637,4.920)×10-3]高于癌旁组织[2.008(1.200,3.292)×10-3],差异有统计学意义(U=-641.0,P<0.05)。miR-181c的表达水平与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。转染SPC-A1细胞120 h后,miR-181c模拟物转染组的细胞增殖能力高于于阴性对照组,差异有统计学意义(2.029±0.034 vs 1.476±0.071;t=7.044,P<0.01);而miR-181c抑制剂转染组细胞的增殖能力弱于阴性对照组,差异有统计学意义(0.998±0.050 vs 1.414±0.058;t=5.461,P<0.01)。Transwell结果显示,转染miR-181c模拟物后SPC-A1侵袭能力显著增强(432.00±12.22 vs 219.50±9.31;t=14.11,P<0.01),转染抑制剂后侵袭能力显著减弱(73.60±5.32 vs 227.30±11.27;t=11.52,P<0.01)。结论 miR-181c在肺腺癌组织中高表达,并能促进SPC-A1细胞的增殖与侵袭。

气功“外气”对人体肺腺癌细胞(SPC-A_1)的影响

气功,可以应用于肺癌的治疗。《气功“外气”对人体肺腺癌细胞(SPC-A_1)的影响》就是这方面的研究结果。

HDAC1在肺腺癌细胞株A549中的表达及TSA对细胞增殖、凋亡的影响

背景与目的:研究表明组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase,HDAC)在多种肿瘤细胞中高表达,组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)抑制剂制滴菌素A(trichostatinA,TSA)能抑制肿瘤细胞的生长。而缺氧是恶性肿瘤的重要特征,本实验拟研究HDAC1在低氧肺腺癌细胞株A549中的表达及TSA对细胞增殖、凋亡的影响。方法:实验设常氧组(对照组)及低氧组(实验组),实验组设A～F组,即低氧6h组(A组),低氧6h加TSA组(B组),低氧12h组(C组),低氧24h组(D组),低氧24h加TSA组(E组),低氧48h组(F组)。用蛋白印迹法(Westernblot)检测A549细胞在不同时间低氧条件下HDAC1的表达,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、免疫组化和流式细胞仪、原位凋亡(Tunel)法检测A549细胞在不同时间低氧条件下的增殖和凋亡率以及TSA对其的影响,用RT-PCR检测A549细胞在不同时间低氧条件下HDAC1mRNA的表达及TSA对其的作用。结果:对照组HDAC1蛋白质表达的A值为138±11,实验A、C、D、F组A值分别为78±4.0、86±5.0、124±3.0、120±9.0。对照组HDAC1mRNA的A值与β-actinmRNAA值的比值0.68±0.03,A、B、D、E组HDAC1mRNA的A值与β-actinmRNAA值的比值分别为0.46±0.03、0.45±0.02、0.70±0.03、0.33±0.02。对照组PCNA的A值0.13±0.03、A、B、D、E组PCNA的A值分别为0.10±0.02。

全反式维甲酸对肺腺癌细胞株SPCA-1增殖及粘附分子表达的影响

目的:研究全反式维甲酸alltransretinoicacid,ATRA对肺腺癌细胞株SPCA1细胞的增殖及其表面粘附分子表达的影响。方法:使用1×10-6mol/L、1×10-5mol/L和2×10-5mol/L的ATRA及IL8、TNFα处理SPCA1细胞并培养72h后,用MTT方法观察细胞的增殖,间接免疫荧光法和流式细胞仪分析SPCA1细胞表面粘附分子的表达。结果:3种不同浓度ATRA都能抑制SPCA1细胞的增殖,抑制率分别为12.1%、30.5%、62.5%,且在浓度为1×10-6mol/L和1×10-5mol/L时与IL8和TNFα具有协同作用。3种不同浓度ATRA还可抑制SPCA1细胞表面CD11α、CD62E和CD62L粘附分子的表达;在浓度为1×10-6mol/L时抑制作用最明显,抑制率分别为84.6%、60.5%、62.0%;但对CD18和CD54分子的表达无明显作用。结论:ATRA能抑制SPCA1细胞增殖,降低其粘附分子的表达,提示ATRA对肺腺癌细胞的生长及转移可能有抑制作用。

Ad-ING4联合放疗抑制肺腺癌SPC-A1细胞移植瘤的生长

目的:研究腺病毒介导的肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth family 4,ING4)联合放疗对肺腺癌SPC-A1细胞移植瘤生长的抑制作用。方法:制备SPC-A1细胞荷瘤小鼠模型,随机分为PBS组、Ad组、Ad-ING4组、放疗组、Ad-ING4+放疗组。测量各组荷瘤小鼠移植瘤的体积变化,治疗15 d后摘取瘤块,称质量并计算抑瘤率;H-E染色观察瘤体组织细胞的形态学变化,免疫组化法检测瘤体组织中Bax、caspase-3、Bcl-2、VEGF等因子的表达。结果:治疗后第15天SPC-A1移植瘤体积:Ad-ING4组为(1 136.03±151.58)mm3、单纯放疗组为(1 035.67±86.27)mm3、Ad-ING4+放疗组为(743.84±109.06)mm3,联合组可有效抑制肿瘤生长(P<0.01);此外,联合组抑瘤率也显著高于单纯Ad-ING4组或放疗组(69.62%vs 33.17%、35.41%,P<0.01),呈现放疗增敏协同作用(Q=1.22)。免疫组化结果显示,Ad-ING4及其联合放疗组能明显上调Bax、caspase-3等蛋白的表达,下调Bcl-2、VEGF等蛋白的表达,且Ad-ING4+放疗组对这些蛋白表达的调节作用强于Ad-ING4组、单纯放疗组(P<0.01)。结论:Ad-ING4联合放疗可有效抑制肺腺癌SPC-A1细胞移植瘤的生长。

CIK细胞联合多西紫杉醇对肺腺癌耐药细胞SPC-A1/DTX的体内外杀伤作用的实验研究

目的:探讨正常人细胞因子诱导的杀伤(Cytokine induced-killer,CIK)细胞联合多西紫杉醇对肺腺癌多西紫杉醇耐药细胞SPC-A1/DTX的体内外杀伤作用。方法:取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ、IL-2、抗CD3单抗联合诱导CIK细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定多西紫杉醇、CIK细胞及两者联合对耐药细胞SPC-A1/DTX体外的细胞毒活性。用肺腺癌耐药细胞SPC-A1/DTX建立裸鼠皮下移植瘤模型,2周后腹腔给予生理盐水(对照组)、多西紫杉醇(单纯化疗组)、CIK细胞和CIK细胞联合多西紫杉醇(联合治疗组),观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结果:体外实验表明,SPC-A1/DTX对多西紫杉醇的耐受性(IC50为110.5μg/ml)较亲代敏感株SPC-A1(IC50为8.5μg/ml)增加了13倍。CIK细胞对人肺腺癌多西紫杉醇耐药细胞SPC-A1/DTX的杀伤活性,明显高于其亲代敏感株SPC-A1(P<0.05)。经CIK细胞作用后的SPC-A1/DTX细胞,仅10μg/ml的DTX即可使CIK:SPC-A1/DTX效靶比为5:1组中的联合杀伤率比单纯加DTX(同等剂量)组增加6.1倍,比单纯加CIK(相同效靶比)细胞杀伤率增加1.4倍,联合杀伤率的大小随效靶细胞比值和DTX浓度的升高呈依赖性增加。体内实验表明,CIK细胞联合多西紫杉醇可明显抑制裸鼠皮下肺腺癌耐药细胞移植瘤的生长,联合治疗组肿瘤生长缓慢,肿瘤组织坏死、淋巴细胞浸润明显。结论:CIK细胞联合多西紫杉醇能够显著抑制体内外肺腺癌多药耐药细胞SPC-A1/DTX的生长,为临床上应用CIK细胞联合化疗治疗放、化疗等无效的中晚期耐药肺癌患者提供了实验依据。

RNA干扰HIF-1α对人肺腺癌细胞SPCA-1摄取^(18)F-FDG的影响

目的探讨RNA干扰乏氧诱导因子1α(HIF1α)对人肺腺癌细胞SPCA1摄取18F脱氧葡萄糖(FDG)的影响。方法构建干扰HIF-1α质粒pSUPERHIF-1α,采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Western印迹法观察有氧与乏氧状态下RNA干扰后HIF1α的变化,用γ计数仪检测其对SPCA1细胞摄取18F-FDG的影响。结果RNA干扰HIF-1α,在乏氧和常氧状态下致mRNA表达分别下降76%和64%,空载体对照组分别为5%和0%;在乏氧状态下,蛋白质的表达下降,SPCA-1细胞对18F-FDG的摄取明显降低(P<0.05)。结论在乏氧状态下,RNA干扰HIF-1α明显降低SPCA-1细胞对18F-FDG的摄取。

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及其诱导肺腺癌细胞A549凋亡的研究

通过RT-PCR的方法克隆H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并构建了真核表达载体pCMV-Myc/NS1。将此真核表达质粒转染肺腺癌细胞A549,48 h后,经Western印迹检测,NS1基因能在细胞中正确表达。经荧光显微镜、透射电镜观察和流式细胞仪检测,发现该株流感病毒的NS1蛋白可诱导肺腺癌细胞A549凋亡。

RNAi沉默ERCC1基因对肺腺癌细胞顺铂敏感性的影响

目的目的用包含切除修复交叉互补(ERCC1)基因特异RNA序列的慢病毒,将其转染入宣威肺腺癌细胞XWCL05中,沉默ERCC1基因表达,初步探讨其基因沉默效果及对顺铂敏感性的影响,为顺铂耐药逆转提供思路和依据。方法经293T细胞包装后构建ERCC1基因RNAi的慢病毒载体及阴性对照,分别使用XWCL05空白组(空白对照)、XWCL05-neg组(转染空载体)、XWCL05-RNAi组(转染ERCC1-RNAi慢病毒)。Western blot法检测转染前后XWCL05细胞中ERCC1蛋白的表达。12.5μg/mL顺铂作用48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测顺铂对各组XWCL05细胞增殖抑制率的影响;流式细胞术检测各组中XWCL05细胞的凋亡率。结果 (1)Western blot结果显示,XWCL05-RNAi组中ERCC1蛋白表达水平显著低于XWCL05-neg组(P<0.05),而XWCL05-neg和XWCL05空白组差异无统计学意义(P>0.05)。(2)MTT法检测显示相同浓度顺铂作用下,XWCL05-RNAi组的增殖抑制率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组(P<0.05),而XWCL05-neg组。(3)流式细胞术检测结果显示,XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组(P<0.05)。而顺铂作用后,各组凋亡率较前均显著升高(P<0.05),且XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于其余两组。结论 ERCC1基因RNAi的慢病毒能够有效地沉默宣威肺腺癌细胞XWCL05中ERCC1基因的表达,并增强XWCL05对顺铂的敏感性。