EFFECTS OF DIFFERENT COMBINATIONS OF CRYOPROTECTANTS ON SPERMATOZOON VITALITY OF CHINESE SCALLOP,CHLAMYS FARRERI,DURING LOW TEMPERATURE EQUILIBRIUM

The effects of membrane penetrating anti-freezing agents(MPAAs), DMSO(dimethyl sulfoxide),glycerol,EG(ethylene glycol) and methanol in combination with different cryoprotective additives suchas carbohydrates,macromolecules and inorganic compounds on the spermatozoon vitality of Chinesescallop,Chlamys farreri,during 1 h 0℃ equilibrium were investigated.When only MPAAs existed,the detrimental effects of different MPAAs ranked in the following order:DMSO【methanol【EG【glycerol.When carbohydrates were added into MPAAs solution,5% glucose caused larger decrease ofspermatozoon vitality than 2.4% lactose.5% glucose or 2.4% lactose in 7.5% glycerol caused com-plete damage.10% yolk was best in maintaining the spermatozoon vitality except when used incombination with 10% methanol.10% milk significantly decreased spermatozoon vitality in EG andmethanol and enhanced its vitality in glycerol,but did not significantly influence it in DMSO.Glycinewas apparently detrimental to spermatozoon vitality.The average

睾丸味觉受体细胞及其苦味感知

味觉是人和其他哺乳动物最基本的生理感觉之一,通过味觉来识别食物的性质,可避免有毒有害物质的摄入。越来越多的研究表明味觉受体不仅存在于味蕾细胞中,同样存在于睾丸和成熟精子中。近年来,研究者以分子和蛋白水平,从舌到睾丸味觉的相关功能研究取得了突破性成果,如雄性生殖细胞可利用苦味受体来感知影响精子行为和受精的化学物质。主要介绍味觉受体家族和信号分子,睾丸味觉受体的分布及其信号转导,以及苦味受体介导的睾丸苦味感知等研究进展。以期对精子发生过程的化学感知机制引起关注,同时为研究精卵相互作用的调控机理,以及睾丸的生殖毒理方向研究提供新的突破口。

西施舌精子发生过程的超微结构观察

利用透射电镜研究西施舌精子的发生和结构 ,揭示了从精原细胞逐渐发育为精子过程中细胞形态结构的变化和细胞器的演变规律。精细胞的分化分为 6期 ,主要包括 :核形态由扁圆到圆再到椭圆形 ;核染色质以颗粒状形式凝集 ;高尔基体分泌的前顶体颗粒聚合发育为前顶体囊 ,参与顶体的形成 ;线粒体逐渐融合与发达 ;中心体的移动及鞭毛的形成 ;胞质的逐步减少。成熟精子为原生型 ,由头部、中段和尾部组成。顶体圆锥状 ,高密度的顶体物质集中分布于基部四周 ,呈灯罩状 ;亚顶体腔呈尖锥状 ,内含密度较低的均匀物。细胞核近椭圆形。中段由 4个椭圆形的线粒体和 2个相互垂直的中心粒组成。尾部鞭毛为典型的“9+2”型结构。

泥蚶精子的超微结构

报道了泥蚶成熟精子在SEM和TEM下的超微结构观察结果。描述了其外部形态和内部构造 ,扫描电镜观察的泥蚶精子呈具有细长鞭毛的蝌蚪状 ,分头部和尾部 ,精子全长约 5 2～ 5 8μm ,头部长约 2 .7～ 2 .9μm。在透射显微镜下 ,根据其结构泥蚶的精子可分为头部、中段和末段。头部顶体明显突出呈倒V字形 ,V字形顶端膨大形成圆球形结构 ;细胞核近似卵圆形 ,是整个精子电子密度最高的部分 ,在细胞核区域内有囊泡存在 ,且在不同的切片样品中囊泡所处的位置完全不同。中段由相互垂直的近、远端中心粒和围绕在其周围的 5个卵圆形线粒体组成 ,中心粒为中空的圆柱形 ;具有卫星体结构。尾部为典型的“9+ 2”结构。

可口革囊星虫的精子发生及精子结构

为了探究可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)精子发生过程及结构上的特殊性,用显微及亚显微技术研究了可口革囊星虫的精子发生和精子结构。可口革囊星虫的精巢位于收吻肌基部,为一曲折的带状组织。成熟精巢内可观察到精原细胞、精母细胞以及精细胞等各阶段的生精细胞。在精子形成早期,很多精细胞脱离精巢,以精细胞团的形式掉落到体腔中。精细胞团内的精细胞同步发育为精子后,脱离精子团进入肾管。成熟精子由头部和尾部组成。头部由钟形顶体与鼓形细胞核构成。顶体后段下包于精核的前端。顶体分内、中、外三层,外层有横隔;顶体下腔内有颗粒状物质不均匀分布,中央有一束丝状纤维组成的顶体棒。核物质电子密度高,核内含空泡。无核前窝,具浅的核后窝。尾部分中段和末段,中段由6个(偶见5个或7个)线粒体围绕近、远端中心粒构成;末段细长鞭状,由轴丝及包绕轴丝的质膜组成,轴丝为典型的"9+2"结构。分析认为:可口革囊星虫精子发生过程以及超微结构上存在特殊的结构与机制:①精细胞团保证了精子形成的同步性;②顶体后段下包于精核的前端使精子头部小而灵巧,利于快速运动;③顶体的横隔使精子顶体的牢固性增强,确保受精时顶体反应的正常进行;④中段较多的线粒体使精子具有更强的环境适应性,有利于有效的受精。

中国淡水蛏精子发生的超微结构研究

利用透射电镜观察了中国淡水蛏的精子发生和精子结构。描述了精子发生过程中各细胞形态结构的变化 ;揭示了细胞核、线粒体和顶体等的演变过程。中国淡水蛏的精子经过精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞 ,最终发育为成熟的精子。精子为典型的原生型 ,由头部、中段和尾部构成。顶体复合体位于精子头部前端 ,呈“⊥”形 ,精核近圆形 ;中段包括 2个中心粒和 4或 5个紧密排列的椭圆形线粒体 ;尾部鞭毛断面为典型的“9+2”

圆斑星鲽精子的超微结构及核前区特殊结构(英文)

分别以扫描电镜和透射电镜方法研究了圆斑星鲽 (Veraspervariegates)精子的超微结构。头部呈圆形、中段不发达 ,具有多个未分化的圆形小线粒体、鞭毛结构极简单 ,具有 9+2型的轴丝等特征 ,均表示圆斑星鲽的精子属于简单的原始类型 ,与多数其它高等鱼类精子结构相似。但是 ,圆斑星鲽精子核前部的凹陷 ,即不含染色质的电子透明区 ,以及核前区的囊泡结构却未见在其它新鳍鱼类精子中报道。圆斑星鲽精子核前凹陷开口于核前端稍偏处 ,凹陷呈不规则状 ,可深入到核的中央。凹陷处与染色质区无界膜分隔。凹陷区的前部及其开口处常有多个小的具单层界膜的囊泡 ,有时可见在凹陷区的开口处汇集成一个大泡。在某些处理过程中 ,例如在冷冻 -解冻过程中 ,囊泡可能丢失 ,而在精子顶端留下一个凹坑。尽管顶体在现存最早的新鳍鱼类 ,如雀鳝鱼及弓鳍鱼中已经完全消失 ,但考虑甚至在某些纯真骨鱼 ,如鲑形目中的螈鱼精子上 ,顶体仍然存在 ,而在其它一些纯真骨鱼精子或精子细胞中也存在顶体或顶体遗迹等事实。我们推测在圆斑星鲽精子中的上述特殊结构也是顶体的一种遗迹 。

索氏六须鲶精子的超微结构

索氏六须鲶精子由头部、中段和尾部组成。头部呈球形或椭圆球形。核前端无顶体 ,后端有植入窝 ,核中染色质致密 ,有核泡。中段包括中心粒和袖套。近端中心粒由两个半圆形中心粒单体相对组成一个空心球体 ,空心处有一核样致密物质 ;远端中心粒呈钟罩形 ,顶端与近端中心粒相连 ,底部开口处与精子尾部轴丝端相连。袖套与细胞核后端相连 ,含有丰富的线粒体和囊泡。尾部主要结构是轴丝 ,为典型的“9+ 2”结构。尾部内没有囊泡及其它细胞器 ,尾部外表面光滑 ,没有鳍样结构。

哲罗鱼精子的超微结构

应用透射电镜观察了乌苏里江哲罗鱼(Hucho taimen)精子的超微结构。哲罗鱼的精子由头部、中段和尾部组成。头部呈卵圆形,主要结构是细胞核。核前端无顶体,后端有植入窝,核中染色质致密,存在着不规则的网络状间隙。中段包括中心粒复合体和袖套。近端中心粒为9组三联微管结构,与远端中心粒相互垂直。袖套与细胞核后端相连,含有丰富的线粒体和囊泡,部分线粒体彼此融合,形成复合线粒体。尾部细长,主要结构是轴丝,为典型的"9+2"微管结构。尾部的近核段有许多囊泡包围着轴丝,远核段则无此结构。尾部有对称排列的波纹状侧鳍。

日本蟳精子超低温冷冻保存技术的研究

以精子存活率作为评价指标,采用两步降温法研究了稀释剂、抗冻保护剂和预冷时间对日本蟳精子超低温冷冻保存效果的影响。结果表明:以采用稀释剂II、15%二甲基亚砜(DMSO)作为抗冻保护剂的保存效果最佳。在液氮中保存24 h后,精子存活率可达83.76%,保存一年后可达73.81%。精液的第一次预冷时间以25 min为宜。

沟纹巴非蛤精子发生过程的超微结构观察

利用透射电镜观察沟纹巴非蛤（Paphia exarata Philippi）精子的发生和精子的超微结构，揭示了从精原细胞逐渐发育成精子过程中超微结构的变化：其过程主要包括棱逐步拉长、染色质浓缩、顶体形成、线粒体逐渐融合、胞质减少以及中心粒演变为轴丝等。精细胞的分化可分为五个时期。成熟精子属原生型，由头部、中段和尾部三部分组成。头部顶体呈圆锥状，其中的顶体物质分布不均匀，基部密度较其他区域高；亚顶体腔呈倒V字型，内含均匀的低密度物质。细胞棱卵圆形。中段由4～5个椭圆形线粒体和2个相互垂直的中心粒组成。尾部为典型的“9＋2”型结构。

大鲵成熟精、卵的形态学观察及受精卵孵化中的形态变化

本文通过连续９年观察中国大鲵成熟精子，连续１０年观察中国大鲵成熟卵子的形态后加以概括描述。正常精子呈尖椒状，全长约１９０μｍ，头部约占全长的２５％，头尾部之间无明显颈部。中国大鲵产出的卵为念珠状长链型带形卵，卵球含三层膜，卵有单胞卵也有多胞卵，卵的形态多样。受精卵孵化过程吸水增大，第五天吸足平衡，吸水率达１８５％；胶带也吸水增大，第四天基本吸足，吸水率达１５０％。

近江蛏精子超微形态结构观察及与缢蛏精子的比较

利用扫描电镜和透射电镜分别观察了近江蛏和缢蛏成熟精子的超微形态结构。发现近江蛏精子与缢蛏精子在超微形态结构上差异很大。近江蛏精子为典型的原生型,成熟精子由头部、中段和尾部组成,头部包括顶体和细胞核。近江蛏精子与缢蛏精子顶体均为保龄球状,但近江蛏精子顶体全长比缢蛏短。近江蛏精子细胞核略扁圆形,外缘具8～9个圆弧形凸起;缢蛏精子细胞核则呈圆球状。近江蛏精子中段由线粒体和中心粒复合体构成,线粒体一般5个,个别4～6个;缢蛏线粒体5个或6个。近江蛏精子尾部为细长的鞭毛,轴丝为"9+2"结构,与缢蛏的相同。从近江蛏与缢蛏的精子形态差异看,两者应属于种间差异。

不育症精子乳酸脱氢酶同功酶LDHx活性测定及其定位研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染色、光密度扫描、分光光度法以及电镜酶细胞化学等方法 ,对 12例生育男性(生育组 )和 14例不育男性 (不育组 )精子 L DHx进行了研究。结果显示 L DHx电泳区带位于 L DH3和 L DH4之间 ,生育组精子 L DHx绝对活性和相对活性均高于不育组 (P<0 .0 5 )。相关分析表明精子密度与 L DHx绝对活性和相对活性均具有相关性 ,在生育组呈正相关 (r=0 .8和 0 .75 ,P<0 .0 5 ) ,在不育组呈负相关 (r=- 0 .76和 - 0 .78,P<0 .0 5 )。 L DHx酶细胞化学定位分析显示 L DHx酶反应颗粒主要分布于精子型线粒体 (STM)和胞质内 ,少量分布于顶体及质膜表面。生育组精子各部位酶反应颗粒多于不育组 ,且不育组精子多有畸形并伴有超微结构改变。上述研究分析提示 ,精子 L DHx活性测定与定位分析可作为检查不育症精子质量的可靠指标 。

中国圆田螺典型精子及其发生的超微结构研究

运用光镜和电镜以及细胞化学方法 ,对中国圆田螺Cipangopaludinachinensis典型精子及其发生的超微结构进行了研究。根据染色质和细胞形态的变化 ,可将其典型精子发生分为五个时期 :精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和成熟精子。精子发生过程中 ,线粒体逐渐增大 ,并随着轴的增生而不断发展为螺旋化线粒体系 ;染色质逐渐凝聚 ,经过颗粒化和纤维化而终呈均质 ;随着染色质的变化 ,细胞核先变小再拉长并螺旋化。精细胞期细胞核基部发生内陷 ,伴随有中心粒的移入 ,并向后方形成“9+ 2”式的轴。成熟典型精子单鞭毛 ,全长约 40 μm ,包括头、中、尾三段 :头段螺旋状 ,主要由细胞核构成 ,旋束单股 ;中段螺旋状 ,主要由线粒体和轴丝构成 ,旋束四股 ;尾段非螺旋状 。

黄腹角雉精子超微结构的研究

透射电镜研究表明，黄腹角雉精子的结构与家鸡的相似，圆锥形的顶体位于精核前部，与精核的前端有少许重叠。顶体刺位于顶体下腔里，其部分区域的电子密度较低。核前窝内容纳着顶体刺的基部，远端的植入窝则为中心粒复合体和无条纹连接体所占据，后者构成了精子短的颈部。尾部中段的横切面上有几个线粒体呈螺旋状环绕于轴丝复合体的外面。轴丝为典型的（９＋２）结构。没有终环结构，中段与主段是以套接式嵌合连接的。在末段，轴丝结构排列变得不规则。在一些切面上观察到核内大小不等的空泡，以及多核、多尾和不成熟的精子等。

蛇鮈精子结构研究

通过光学显微镜和透射电子显微镜研究蛇鮈精子的形态学结构。结果表明,在光学显微镜下,蛇鮈精子主要分为头部和尾部,头长为(3.15±0.44)μm,尾长为(37.34±2.24)μm,尾长约为头长的12倍。在透射电子显微镜下可观察到蛇鮈精子由头部、中片和尾部3部分组成,头部无顶体,细胞核呈椭圆形,核内为致密物质,内有较大的核空隙。细胞膜与核膜之间几乎无空隙,后端具有较浅的植入窝,深度约占细胞核体积的1/6,植入窝内包含有中心粒复合体,其近端中心粒与远端中心粒呈"L"型。尾部可见轴丝为典型的"9+2"结构。尾部周围具有侧鳍,近核端具有囊泡鞘结构。研究认为,蛇鮈精子的结构符合体外受精鱼类对精子结构的要求,具有硬骨鱼类精子结构的普遍特点,但又具有一定的特异性。

玫瑰无须鲃精子的超微结构(英文)

透射和扫描电镜研究显示玫瑰无须鲃(Puntius conchonius)的精子由头、中片和尾三部分组成。头部无顶体,呈球形或卵圆形,主要由细胞核组成,核内染色质致密。核前端几乎无细胞质存在,核膜紧密靠近细胞质膜,而在核的后端有少量细胞质存在。在核后端偏于一侧处有一个浅的核后凹,中心粒复合体部分地镶嵌于其中,中心粒复合体由近端中心粒和远端中心粒组成,二者呈钝角形排列,鞭毛从远端中心粒的末端发出。中片由前边的主要部分———领和后边细薄的袖套构成。领内含有数个不规则分布的线粒体包埋于细胞质中,袖套的长短、粗细差别较大,有的精子没有袖套。由于与鞭毛的不对称连接,使得头部及中片均呈不对称型。尾是一根细长的鞭毛,尾丝具有典型的“9+2”微管结构,尾部两侧均无侧鳍。与鲤科其它鱼精子相比,该鱼精子的主要特征是具有长短不一的袖套,领内有不同数量的液泡,且有些空泡向外界开口呈孔状。袖套的长短与领内液泡化水平似有某种相互联系,这也许与精子的老化程度有关[动物学报51(5):892-897,2005]。

菲律宾蛤仔的精子发生和精子超微结构

用透射电镜研究了菲律宾蛤仔 (Ruditapesphilippinarum)精子结构和精子发生过程中细胞形态结构的变化及细胞器的演变规律。菲律宾蛤仔雄性生殖细胞的形态由椭圆形渐变为辣椒状 ,细胞核的形态由椭圆形逐渐拉长 ,渐变为锥形。染色质的凝集经历 :小颗粒团块状→较大颗粒均匀状→粗颗粒均匀状的过程。线粒体在演化过程中数量先增多后逐渐减少 ,嵴数逐渐增多 ,电子密度和体积逐渐增大。高尔基体在初级精母细胞期已经发育 ,随后的各期中发育良好 ,分泌旺盛。精细胞Ⅱ期 ,高尔基体分泌的潴泡开始融合 ,形成前顶体囊。精细胞Ⅲ期 ,高尔基体的分泌物仍不断融合。精细胞分化的后期 ,前顶体囊逐渐发育形成顶体。菲律宾蛤仔成熟精子呈长辣椒状 ,为原生型 ,由头部、中段和尾部构成。头部的顶体为细长柱形 ,末端渐细 ,电子密度较小 ;细胞核为锥形 ;中段线粒体 4个 ,尾部鞭毛为典型的“9+2”型结构。此外在成熟精子线粒体环横切面有一特殊“风车状”