不同病毒在SPF鸡胚与普通鸡胚繁殖性能的比较

利用HI和AGP方法检测普通种蛋中ND和IBD的卵黄抗体水平,利用HA和EID50检测方法比较多种病毒(如NDV、IBV、IBDV及AEV)在SPF鸡胚与普通鸡胚上繁殖性能的差异。研究结果表明:普通种蛋中ND及IBD的卵黄抗体水平普遍较高,在SPF鸡胚上新城疫LaSota病毒繁殖量是普通鸡胚的5～20倍,尿囊液血凝效价平均高2.0～2.5滴度。MA5毒株在SPF胚病毒液EID50为普通鸡胚的10倍以上熏且每次检测的结果比较接近。IBDV、AEV等病毒在普通鸡胚上几乎不能增殖。

垂花香薷挥发油鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的研究

用鸡胚培养法和血凝试验,测定了中药垂花香薷挥发油对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验结果表明:垂花香薷挥发油对鸡胚无毒性作用;垂花香薷挥发油与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

鸡传染性支气管炎病毒的RNA干扰

为探讨短的双链RNA(siRNA)对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)增殖的干扰作用,利用软件设计siRNA1280个,75%位于Pol基因内。通过同源比较和保守性分析,筛选到针对Pol、M、N基因的12个siRNA(每个基因3～4个)作为后选目的片段,分别在Vero细胞、9日龄SPF鸡胚上进行基因干扰试验。结果,来自Pol、N靶序列的2个siRNA在Vero细胞上及鸡胚上均对IBV增殖产生明显的干扰作用,并与siRNA剂量有一定相关性,依赖于与mRNA互补的负链siRNA存在。本研究首次证实IBV增殖过程中存在siRNA干扰现象,为利用RNA干扰(RNAi)技术控制IBV提供了新手段。

鸡胚中人工感染网状内皮增殖病病毒的检测

为了模仿禽网状内皮增生病毒(REV)垂直感染鸡胚,在1和3日龄的发育SPF鸡胚人工接种不同剂量的REV,并继续孵化至12日龄。在将发育鸡胚制成成纤维细胞单层后,再用抗REV单克隆抗体11B118作间接荧光抗体反应检测REV。结果表明,从所有人工感染REV的鸡胚12日龄制备的成纤维细胞中均能在培养48h检测出REV。该方法可用于检测生产弱毒疫苗的SPF鸡胚及其相应细胞有无REV的污染。

中药紫草注射液对鸡胚接种后抗新城疫病毒的研究

为研究紫草对新城疫病毒的抑制作用。用鸡胚培养法和血凝试验,测定了4组试验中药紫草对鸡新城疫病毒的作用效果。结果显示:第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药紫草混合液,HA滴度0;第Ⅱ组接种病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度4 log2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度8 log2;第Ⅳ组不接种病毒尿囊液、不给药、HA滴度0。第Ⅰ组与第Ⅲ组差异极显著(P<0.01),第Ⅱ组与第Ⅲ组差异显著(P<0.05)。试验表明,紫草对鸡胚无毒性作用;紫草与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

莪术油注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是由新城疫病毒（New castle disease virus,NDV）引起的急性高度传染性疾病。由于疫苗的广泛使用,使该病多以慢性或散发为特点。同时,由于饲养管理不完善、免疫程序不当,以及毒株的变异,使得疫苗预防效果减弱,临床上常表现为非典型新城疫,而对于水禽（鹅、鸭等）则表现为强毒感染,并出现高致死率[1-2]。

鸡胚接种虎杖醇提取液后对新城疫病毒的抑制作用

为研究虎仗对新城疫病毒的抑制作用,用鸡胚培养法和血凝试验测定中药虎仗醇提液对鸡新城疫病毒的作用效果。结果显示,Ⅰ组接种病毒尿囊液与虎杖醇提液,HA滴度0。Ⅱ组接种病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度5lg2。Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9lg2。Ⅳ组不接种病毒尿囊液、不给药、HA滴度0。Ⅰ组与Ⅲ组差异极显著(P<0.01),Ⅱ组与Ⅲ组差异显著(P<0.05)。可见,虎仗醇提液对鸡胚无毒性作用;虎仗醇提液与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

莪术油注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

[目的]探讨莪术油对新城疫病毒的抑制和杀灭作用。[方法]用鸡胚培养法和血凝试验,测定莪术油对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用。[结果]莪术油对鸡胚无毒性作用;莪术油与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。[结论]结果为莪术油在兽医临床上的应用提供了理论依据。

新城疫病毒(NDV)在免疫鸡胚中增殖条件的优化

新城疫病毒 ( NDV)在鸡胚中的增殖受母源抗体、接种日龄、培养时间、接种剂量、种毒及其稀释倍数、孵化温度、孵化湿度等因素的影响。通过对 NDV在免疫鸡胚中增殖条件的优化配置 ,得出如下结果 :1 0日龄的免疫鸡胚 ,在母源抗体较高的情况下 ( 7log2～ 9log2 ) ,接种种毒的稀释倍数为 1 0 0 0～ 50 0 0倍 ,经过一定孵育时段 。

温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响

为了在生产鸡传染性支气管炎活疫苗时,获得高效价的制苗用病毒液,该文从无特定病原体(SPF)鸡胚接种后的孵育温度方面进行探索,研究温度对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响。结果显示,在用SPF鸡胚增殖鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株时,以鸡胚液病毒含量指标衡量,接种后的鸡胚在35~37℃孵育为宜,在35.5~36.5℃孵育为佳,超过37℃或低于35℃孵育,不论接毒量大小或孵育时间长短,其鸡胚液的病毒含量均不达标,且37℃以上对鸡传染性支气管炎病毒的增殖更不利。鸡传染性支气管炎病毒对温度比较敏感,鸡胚增殖时,应尽量控制接种鸡胚在35.5~36.5℃孵育,不要超过37℃,为鸡传染性支气管炎鸡胚病毒液的高效生产提供了方法与指导。

新生牛血清的质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响

目的考察新生牛血清质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响。方法选择来源可追溯性、工艺质量稳定,且检定合格的新生牛血清样品配制细胞生长液,用于SPF鸡胚细胞和2BS细胞的培养。待细胞生长成致密成纤维单层细胞,记录细胞成单层的时间,用胰酶消化细胞,通过全自动细胞计数仪对细胞悬液进行测定,观察总细胞数、活细胞数,计算细胞存活率。根据活细胞数计算MOI,分别用腮腺炎及风疹病毒接种SPF鸡胚细胞和2BS细胞,检测收获病毒液的滴度。结果SPF鸡胚细胞总细胞数不低于3.5×10~6个/mL,活细胞数不低于2.1×10~6个/mL,细胞存活率不低于60%;2BS细胞总细胞数不低于7.0×10~5个/mL,活细胞数不低于4.2×10~5个/mL,细胞存活率不低于60%。腮腺炎病毒原液滴度在6.1～6.6 lgCCID_(50)/mL之间,平均值为6.28 lgCCID_(50)/mL,SD为0.11,生产过程加工能力指数(process capability index,Cpk)为1.51,批间质量趋于一致;风疹病毒原液滴度均在5.5～6.2 lgCCID_(50)/mL之间,平均值为5.8 lgCCID_(50)/mL,SD为0.17,Cpk值为1.40,批间质量趋于一致。结论新生牛血清的质量良好,用其培养SPF鸡胚细胞和2BS细胞的活细胞比率可控,收获的病毒液滴度较均一,差异性较小。