用Helena SPIFE琼脂糖凝胶电泳系统进行血清蛋白电泳

目的 :评价HelenaSPIFE琼脂糖凝胶电泳 (AGE )系统进行血清蛋白电泳的方法。方法 :用HelenaSPIFE全自动快速电泳系统进行血清蛋白电泳 ,确立了该法的参考值范围 ,分析了该法的精密度和干扰因素 ,同时将该法与传统的醋酸薄膜电泳方法 (CAE)进行了比较。结果 :AGE测定了 72例正常人血清中白蛋白 ,α1球蛋白 ,α2球蛋白 ,β球蛋白 ,γ球蛋白的浓度 ,确立其参考值范围分别为 3 3 2～ 49 8g/L ,1 8～ 3 8g/L ,4 6～ 9 3g/L ,7 3～12 3g/L ,9 5～ 19 4g/L。批内、批间精密度在 1 2 1%～ 2 77%和 3 70 %～ 5 5 7%之间。基本不受黄疸、血脂和溶血的干扰。与CAE比较 ,5个蛋白区带中 ,除肾病综合征的 β球蛋白、急性时相反应的α2 球蛋白外 (相关系数r分别为 0 788和 0 769) ,其他区带的相关性好 ,r值在 0 82 3和 0 975之间。结论 :电泳法 (AGE)测定值与传统法基本一致 ,AGE且自动化 ,操作简便 ,精密度高 。

一种基于琼脂糖凝胶电泳法检测SARS-CoV-2的新方法

鉴于琼脂糖凝胶电泳分析方法的准确、快速、简便等特性,优化后可以做为检出COVID-19病原的新方法。在不影响结果判读的情况下,通过对扩增时间及检测样本浓度进行优化,以达到预期目的。结果表明,检测SARS-CoV-2的最优反应程序为94℃预变性3 min;94℃变性时间、56℃退火时间及72℃延伸时间均降至5 s,且进行35个循环;最后72℃孵育5 min,最优模板用量比例(初始值设为4 ng)下限调整在(1:1000)^(1:5000)范围内。阳性样本测试结果符合预期。建立了一种简便、省时,适用于检测低载量病毒样本的新方法,为临床提供诊断参考。

全自动琼脂糖凝胶电泳系统检测血红蛋白A_2诊断β-地中海贫血

目的:分析全自动琼脂糖凝胶电泳系统检测血红蛋白A2(HbA2)在β-地中海贫血(β-地贫)筛查和诊断中的应用价值。方法:使用SH-2020全自动琼脂糖电泳系统对5 208例标本进行Hb电泳分析,测定Hb A、Hb F、Hb A2和异常Hb含量,并对可疑病例进行基因检测。结果:5 208例中检出β-地贫177例,Hb H病12例,β-地贫合并Hb E病10例,Hb G 5例,Hb D 2例,Hb CS 1例。结论:全自动琼脂糖凝胶电泳分辨率较高,能准确分析出Hb A、Hb F、Hb A2、Hb E、HbG、Hb D、Hb H和Hb CS,能较好地诊断地中海贫血(地贫),特别是对β-地贫筛查有很好的诊断价值。

全自动琼脂糖凝胶电泳系统在孕妇和新生儿Hb病检查中的应用

目的探讨全自动琼脂糖凝胶电泳系统在检测产前孕妇和新生儿地中海贫血(简称地贫)筛查中的应用价值,并对3919例测定结果进行分析。方法应用法国Sebia全自动琼脂糖凝胶蛋白电泳系统进行血红蛋白电泳,用其配套的Hyrys扫描系统对HbA、HbA2、HbF、HbH、HbBart's、HbCS及各种异常Hb区带进行扫描,得出各种血红蛋白含量。结果共检测产前孕妇及新生儿3919例,其中新生儿2648例,产前孕妇共检出地中海贫血和异常血红蛋白病患者205例,占16.13%(205/1271);新生儿共检出地中海贫血和异常血红蛋白病患者500例,占18.88%(500/2648)。结论全自动琼脂糖凝胶电泳系统用于产前孕妇和新生儿地中海贫血的筛查简单、方便、快捷、准确,对降低新生儿出生缺陷率取得了良好的效果。

用分子探针杂交法观测多次献血对造血系统的影响

目的建立非同位素标记的探针杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度的方法,借此探讨无偿献血对献血者造血系统的影响。方法酚/氯仿提取基因组DNA,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳,非同位素标记的探针Southern印迹杂交,化学发光X线片曝光显示杂交谱带,积分光密度扫描计算TRF值。结果所测样本获得了较好的低背景杂交谱带,测得35～40岁无偿献血组TRF值平均为11.73kb,相应无献血史对照组平均为11.78kb。结论建立了非同位素标记的探针检测端粒DNA的方法,用上述方法初步显示了固定的长期无偿献血并未对献血者的造血系统产生负面影响。

DNA梯度化分析软件系统在细胞凋亡定量检测中的应用

目的:检验我们设计的DNA梯度化分析软件在细胞凋亡定量检测中的应用价值 方法:用Camptothesin(CAM)诱导U937细胞株凋亡,通过该系统计算DNA琼脂糖凝胶电泳后DNA的梯度值,并与凋亡细胞胞浆寡聚核小体的Elisa检测值进行相关性分析.结果:随着CAM浓度的增加,DNA琼脂糖凝胶电泳后梯度化程度越明显,测出的梯度值也越大,而且与胞浆寡聚核小体的Elisa检测值呈正相关(r=0.989,p<0.01)结论:利用DNA梯度化分析系统可对琼脂糖凝胶电泳后的凋亡细胞DNA片段,进行定量分析,提供简便直接的方法.

Agilent2100 Bioanalyzer在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的探讨Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(简称Bioanalyzer)在人乳头瘤病毒(HPV)的PCR检测和分型中的应用。方法先分别进行通用引物介导PCR(GP-PCR)和型特异性引物介导PCR,扩增HPV高保守区(L1区)的共同序列和各型(包括HPV6、11、16和18型)的特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖凝胶电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度。结果Bioanalyzer在确定片段长度时的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,前者的准确度在95%以上,后者仅为85%;Bioanalyzer的检测灵敏度比琼脂糖凝胶电泳高100倍。结论Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对HPV进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和型别鉴定,具有重要的推广价值。

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。