Netherton综合征1例

患者女,54岁,全身红斑鳞屑、毛发异常出生即有。皮肤科情况:躯干四肢呈红皮病样外观、多环状、匍行性红斑,特异性“双边”鳞屑,干燥、纤细的鱼鳞病样鳞屑,毛发异常表现为:毛发短、脆、无光泽,眉毛、睫毛稀疏。皮损组织病理示:角化过度,角化不全,表皮不规则增厚,细胞间内水肿,真皮内胶原断裂、卷曲、缺失,红细胞外渗,少量炎细胞浸润,部分皮下脂肪变性。基因测序:行全外显子基因检查可检测到SPINK5基因存在一个纯合错义变异c.2423C>T:p.T808I。根据皮肤损害及基因检查,诊断考虑Netherton综合征。治疗上给予丙酸氟替卡松软膏、维A酸乳膏及维生素E乳,比例1∶1混合外用。鉴别诊断:本病需与特应性皮炎、高IgE综合征、红皮病及omenn综合征等鉴别。

小鼠SPINK5基因重组过表达腺病毒载体构建及其对特应性皮炎小鼠模型皮损疗效的研究

目的构建表达小鼠SPINK5基因的重组腺病毒载体,观察其对特应性皮炎小鼠模型的治疗效果。方法采用DNA重组技术,将携带小鼠SPINK5基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染HEK293细胞,产生重组腺病毒。采用卵清蛋白,通过腹腔,皮下注射系统致敏结合皮肤局部外涂局部致敏Balb/c小鼠,建立特应性皮炎小鼠模型。将携带SPINK5基因的腺病毒载体注射至特应性皮炎小鼠模型皮损内,观测其对特应性皮炎小鼠模型的治疗效应。结果成功构建了表达小鼠SPINK5基因的重组腺病毒载体及小鼠特应性皮炎模型,该病毒载体注射于特应性皮炎小鼠模型皮损内,治疗2周可明显减轻皮损处潮红,水肿及炎性反应。皮损处病理检测显示,与模型对照相比较,皮损厚度,炎性细胞浸润明显改善。结论SPINK5基因治疗对特应性皮炎小鼠模型具有明显的治疗效果。SPINK5基因产物局部外用有望用于特应性皮炎的治疗。

两个Netherton综合征家系SPINK5基因突变及产物活性的检测

目的研究两个Netherton综合征家系的SPINK5基因突变及产物活性情况。方法采用免疫组化法检测SPINK5基因编码的LEKTI在表皮中的活性,用聚合酶链反应-DNA直接测序法检测基因突变。结果患者均有LEKTI的活性降低。一个家系先证者有SPINK5基因1430+2 T>G的纯合性突变。其母亲为该突变的杂合子,表型正常。另一个家系未发现突变。结论两个家系患者均有LEKTI的活性降低,第一个家系的先证者存在SPINK5基因1430+2 T>G纯合性的剪切突变。

新生儿Netherton综合征1例

患儿,男,6 d,因生后呼吸困难伴全身脱屑样皮疹入院。患儿主要表现为生后红斑伴脱屑样皮疹、呼吸衰竭、反复感染、慢性腹泻、高渗性脱水、生长发育迟缓,予抗感染、静脉注射免疫球蛋白、皮肤护理等综合治疗后皮疹好转,但仍存在反复感染。二代测序检测示患儿存在SPINK5基因纯合变异,系Netherton综合征的致病变异。家属放弃治疗,患儿出院后于2月龄时死亡。该文报道1例新生儿期起病的SPINK5基因变异所致的Netherton综合征病例,以及对该疾病的多学科诊疗。

不伴套叠性脆发的2例Netherton综合征致病基因突变检测

目的:通过基因检测的方法,确诊2例不伴有套叠性脆发表现的Netherton综合征患者。方法:采集患者临床资料,进行皮损组织病理检查及毛发镜检,提取患者及其相关亲属外周血DNA,采用PCR扩增相应可疑致病基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序。结果:2例患者毛发均未见明显形态学异常。基因检测发现例1及其受累的妹妹SPINK5基因发生c.2260A>T纯合突变,导致氨基酸出现p.Lys754*改变,未受累的父母及兄长为该突变的杂合携带者;例2的SPINK5基因发生c.1432C>T及c.1693-2del A复合杂合突变,导致氨基酸出现p.Gln478*及剪切位点改变,突变分别来自其健康父母。200例健康正常对照者均未见相同突变。患者CDSN、KRT1、KRT10、KRT2及DSG1基因均未见致病性突变。结论:通过基因检测确诊2例Netherton综合征患者,基因检测为确诊临床表现不典型Netherton综合征的重要方法。

皮肤屏障相关基因突变与特应性疾病关系的研究进展

皮肤屏障结构主要是由表皮角质层与颗粒层紧密连接结构共同构成的,其主要功能是防止水分丢失和外界各种病原体及过敏原的入侵。研究发现,中间丝相关蛋白(filaggrin,FLG)、紧密连接蛋白1(claudin-1,CLDN1)、角质层糜蛋白酶(human tissue kallikreins 7,KLK7)、肥大细胞糜蛋白酶(mast cell chymase,CMA1/MCC)、SPINK5和胱胺蛋白(cystatin A,CSTA)等皮肤屏障相关基因的突变,均可导致皮肤屏障功能缺陷,从而导致特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)、哮喘等特应性疾病的发生。上述遗传基因的发现,将为特应性疾病的发病机制提供重要的遗传学依据,对疾病预警、临床诊断及新药开发具有重大科学价值。

全外显子测序诊断不典型Netherton综合征伴水疱

报告1例Netherton综合征(NS)。患儿女,14岁。出生后即无诱因进行性头颈、躯干红斑、水疱,环形双边状红斑鳞屑,反复发作14年伴全身干燥。全外显子高通量测序SPINK5基因染色体chr5:147470777发生c.652C>T(E8)截断性杂合突变,氨基酸改变p.218,R>X(877),其无义突变可能会导致蛋白翻译提前终止和染色体chr5:147503528位点发生IVS27+5G>A剪切位点杂合突变,其mRNA剪接可能会受影响。皮损组织病理改变类似银屑病样表现。免疫组化法检测LEKTI蛋白的表达与正常对照无显著差异。扫描电镜下未见特异性结节性(套叠性)脆发。患儿COL17A1、ITGB4、PLEC、CDSN、KRT1、KRT10、KRT2及DSG1基因均未见致病性突变。通过一代基因检测验证该患儿诊断为NS,基因检测是不典型NS的主要诊断方法。

Netherton综合征研究进展

Netherton综合征(NS)是由SPINK5基因突变引起的一种罕见隐性遗传性鱼鳞病,其特征是鱼鳞病样红皮病(CIE)和/或迂回线状鱼鳞病(ILC)、毛干异常和IgE水平升高三联症。因三联征并不总是完全存在,NS患者常常面临误诊、治疗延迟,甚至治疗无效的难题。本文全面回顾了NS的发病机制进展、临床特征、组织病理学和免疫组织化学、诊断和鉴别诊断以及治疗进展,以达到早期识别、有效干预NS的目的。

Netherton综合征一例SPINK5基因突变研究

目的 检测Netherton综合征患者SPINK5基因的突变情况.方法 收集患者临床资料,提取患者及其相关亲属外周血DNA,用PCR扩增SPINK5基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序.结果 直接测序发现患者SPINK5基因的第13号外显子中的第1111位碱基发生C→T杂合突变（c.1111C＞ T）,导致其编码第371位氨基酸变为终止密码子（p.R371X）;第32号外显子中的第3121位碱基发生C→T杂合突变（c.3121C＞ T）,导致其编码第1041位氨基酸发生错义突变（p.R1041C）,其健康父母为相应突变的杂合携带者,200例健康对照未见该突变.结论 SPINK5基因的p.R371X及p.R1041C复合杂合突变可能是引起该患者临床表现的病因之一.

Spink5基因条件性敲除小鼠模型的构建及表型分析

目的构建Spink5基因条件性敲除小鼠模型并鉴定其表型。方法采用CRISPR/Cas9技术构建基因型为Mb1^(cre/+)Spink5^(floxp/floxp)的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠(敲除组),以基因型为Mb1^(+/+)Spink5^(floxp/floxp)的小鼠为对照组。提取小鼠脾脏单个核细胞并经流式细胞荧光技术分选B淋巴细胞及非B淋巴细胞,然后分别进行基因型鉴定及淋巴上皮Kazal型抑制物(LEKTI)蛋白表达的测定。切取小鼠皮肤行HE染色,测量表皮厚度,免疫荧光染色测定小鼠皮肤LEKTI蛋白荧光强度。组间比较采用配对t检验或两独立样本t检验。结果基因型鉴定结果表明,成功构建稳定的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型。Western印迹显示,条件性敲除小鼠B淋巴细胞中LEKTI蛋白相对表达量为0.01±0.02,显著低于非B淋巴细胞(0.66±0.11,t=9.99,P<0.001)及对照组小鼠B淋巴细胞(1.08±0.13,t=13.78,P<0.001)。39只敲除组小鼠中,4只出现皮肤干燥、散在鳞屑性肥厚型斑丘疹。敲除组皮损部位表皮厚度为(90.42±21.31)μm,显著高于其非皮损部位[(29.71±3.63)μm,t=5.05,P=0.002]及对照组表皮[(12.42±2.21)μm,t=6.74,P<0.001]。免疫荧光检测显示,敲除组皮损处LEKTI蛋白荧光强度为46.21±1.21,非皮损处为46.62±2.13,与对照组(47.69±1.71)差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建了B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型,为进一步探究Netherton综合征皮肤屏障缺陷伴免疫功能异常的机制提供研究基础。

不伴竹节发的不典型迟发Netherton综合征一例

患者女,24岁,因躯干、四肢反复起环状红斑、鳞屑伴瘙痒9年就诊。皮损组织病理:角化过度伴灶性角化不全,角层内中性粒细胞聚集,角层下水疱,真皮浅中层血管周围淋巴细胞伴少量嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润。直接免疫荧光:IgG、IgM、IgA、C3均为阴性。全外显子测序SPINK5基因显示,第25号外显子发生c.2423C>T(p.T808I)错义变异,第31号外显子c.2965-1G>A剪切位点变异,二者构成的复合杂合关系可能是患者罹患Netherton综合征的原因。结合临床表现及基因检测结果,诊断为Netherton综合征。