绵羊Spry4基因的克隆、真核表达及序列分析

为探究Spry4在绵羊毛囊发育过程中的作用,以美利奴羊皮肤组织总RNA的反转录产物为模板,采用PCR技术扩增获得Spry4基因全长编码区,并克隆至pCRTMBluntⅡ-TOPT@vector载体进行测序。随后将ToPo-Spry4亚克隆至pcDNA3.0真核表达载体,再经脂质体转染至293T细胞表达,通过Western Blot鉴定表达产物,分析Spry4核酸和氨基酸序列。结果表明,首次克隆获得绵羊Spry4基因编码序列(GenBank登录号KP280032),序列长954bp,编码298个氨基酸,与其他哺乳动物氨基酸同源性达91%以上;预测Spry4蛋白不存在信号肽和跨膜结构域;Western Blot检测显示,重组表达的蛋白分子质量为36ku,与预期一致。

Kallmann综合征伴SPRY4基因错义突变1例

Kallmann综合征是一种罕见的先天性疾病,主要表现为嗅觉缺陷和低促性腺激素性性腺功能减退[1]。迄今为止,已发现30余种基因与该病相关。本文报道1例因自幼嗅觉缺失、发现阴茎短小4年就诊的青少年男性,经基因检测诊断为由少见基因SPRY4错义突变引起的Kallmann综合征,旨在丰富疾病基因突变谱,同时提高临床医生对该病的认识。

SPRY4遗传多态性与中国汉族人群青少年特发性脊柱侧凸相关:一项单中心回顾性研究

目的探究SPRY4基因多态性与中国汉族人群青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)及PUMC分型的相关性,以期为该病的病因学研究提供思路。方法回顾性收集2017年12月—2021年12月北京协和医院诊治的中国北方地区汉族AIS患者及按年龄、性别与其进行1∶1匹配的健康受试者临床资料。比较二者SPRY4基因rs3797053、rs10040443位点等位基因频率及基因型分布差异,并分析上述位点基因型与AIS患者PUMC分型的关联性。结果共入选符合纳入与排除标准的AIS患者97例,健康受试者100名。AIS患者rs10040443位点等位基因C[17.5%(34/194)比8.0%(16/200),P=0.005]及CC基因型频率[10.3%(10/97)比1.0%(1/100),P=0.0014]均高于健康受试者,rs3797053位点等位基因频率及基因型分布与健康受试者均无显著差异(P均>0.05)。多因素Logistic回归分析校正性别的影响后,rs10040443位点多态性在共显性、隐性及加性遗传模式下与AIS均存在关联性,其CC基因型可增加AIS发生风险;在各种遗传模式下,rs3797053位点多态性与AIS均无明显关联性。AIS患者SPRY4基因rs10040443位点基因型分布与PUMC分型具有一定关联性,CT+TT基因型患者中PUMCⅡ型的比例显著高于CC基因型患者(66.67%比0,P<0.001);rs3797053位点基因型分布与PUMC分型无明显关联性(P=0.315)。结论中国北方地区汉族人群SPRY4基因rs10040443位点多态性与AIS相关,该位点CC基因型可能是AIS的危险因素,CT+TT基因型与PUMCⅡ型具有一定关联。