SRB法和MTT法抗肿瘤药物筛选结果相关性研究

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。

抗肿瘤药物筛选中MTT法和SRB法的比较

在抗肿瘤药物的体外筛选中 ,MTT法和 SRB法是常用的两种方法。我们用MTT法和 SRB法分别测定 3种已知植物抗癌药对 2 2株人肿瘤细胞的抗癌活性 ,对这两种方法进行了详细的比较。通过分析两种方法测出的细胞存活率 ( T/ C)的差异分布和相关系数以及 IC50 的二变量分布 ,比较了两种方法测定结果的异同 ;通过两种方法重复测定 3种药物对 7株人癌细胞的抗癌活性 ,比较了两种方法的重复性 ;通过分析两种方法测定结果 T/ C值随时间变化的程度 ,比较了两种方法测定结果的稳定性。实验结果表明 :MTT法和 SRB法的相关性较好 ,都可用于抗肿瘤药物的体外筛选 ,SRB法更适合于大规模筛选 ,3种抗癌药物的测定结果与临床资料基本一致。

白血病细胞株化疗药物敏感性试验SRB法的研究

化疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一。因此以抗癌药物治疗个体化为目的的抗癌药物敏感性试验愈来愈受到人们的重视，成为当今癌症研究的主要课题之一。在众多的方法中，美国国立癌症研究所（ＮＣＩ）从蛋白质染色法的思路设计的ＳＲＢ试验［１］以其简便、敏感、准确、快速...

SRB法检测4HPR对HeLa细胞生长的影响

目的；检测４ＨＰＲ对ＨｅＬａ细胞生长的影响。方法；采用ＳＲＢ实验法。结果：１０６４４ｇ／ｍｌ，２μｇ／ｍｌ，４μｇ／ｍｌ，８μｇ／ｍｌ，１６μｇ／ｍｌ，的４ＨＰＲ作用２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ后ＨｅＬａ细胞其ＯＤ值分别为１．７８，１．７７，１．７２，１．６８，１．６０，１．５９，１．５５，１．４０，１．３３，１．３２，１．１６，１．０３，０．７５，０．６９，０．５４。对照组为１．７０，１７１，１．

应用SRB法测定抗孕激素米非司酮对人类前列腺癌LNCaP细胞系活力的抑制作用

目的：应用一种新的细胞毒性的检测方法SRB（SulforhodamineB)硫基罗丹明B蛋白染料结合测定法，检测抗孕激素米非司酮对人类前列腺癌细胞系雄激素依赖型LNCaPC4及雄激素非依赖型LNCaPC4－2细胞株活力的抑制作用。方法：应用一新型染料SRB蛋白染料结合测定法。结果：抗孕激素米司酮对前列腺细胞系有显著的时间及剂量依赖性的生长抑制剂（P＜0．05），雄激素难中性LNCaPC4细胞株及雄激素素非依赖性LNCaPC4－2细胞株之间抑制作用无显著性差异（P＞0．05），均有显著的抑制作用，结果：SBR染色法是培养细胞蛋白含量的快速，敏感而且廉价的方法，它提供了一非破坏性的稳定的肉眼可见的比色终点，是药物介导的细胞毒性的敏感性的检测方法，本实验得出抗孕激素米非司酮对前列腺细胞有明显抑制作用，因此这种新型的染色法SRB法可应用于抗癌药的筛选，可替代MTT法，应用抗孕激素米司酮为雄素非依赖性前列腺癌提供一种新珠治疗途径。

SRB法检测As_2O_3对KB细胞和Tca8113细胞毒性的研究

目的:采用SRB(Sulforhodamine B)法研究三氧化二砷(As2O3)对人口腔鳞癌KB细胞和Tca8113的细胞毒性。方法:采用SRB法检测As2O3作用于KB细胞和Tca8113细胞前后的A值变化。结果:SRB法检测结果显示在KB组,1、1×10-1、1×10-2、1×10-3、1×10-4μg/mL质量浓度的As2O3所对应的A值分别为0.11、0.21、0.26、0.27、0.27;在Tca8113组,1、1×10-1、1×10-2、1×10-3、1×10-4μg/mL质量浓度的As2O3对应的A值分别为0.48、0.81、0.93、0.97、0.97。结论:As2O3对人口腔鳞癌KB细胞和Tca8113细胞的增殖有明显抑制作用,癌细胞抑制率呈现出剂量依赖性效应关系。

SRB法急性白血病体外药敏试验适用性研究

目的探索最简便、准确、敏感可靠的化疗药物敏感性试验，以指导临床急性白血病个体化治疗的药物选择。方法用ＳＲＢ法肿瘤药敏试验检测白血病细胞株ＨＬ_６０及１２例急性白血病对六种化疗药物的敏感性。结果ＳＲＢ法检测ＨＬ_６０细胞对六种药物中的五种均敏感；１２例急性白血病患者ＳＲＢ法检测结果：体外敏感预测值（ＰＶ＋）为７５％，体外抗药预测值（ＰＶ－）为６６．６７％。结论ＳＲＢ法急性白血病体外药敏试验可用于临床白血病病人个体化治疗时选择敏感性高的药物。

SRB显色法用于抗癌药物敏感性试验的研究

采用 SRB显色法对在 96孔培养板中短期培养的人大肠癌细胞株 Colo2 0 5、人骨肉瘤细胞株 OS732、人舌癌细胞株 Tca81 1 3经 5- FU、顺铂、蟾酥等药物处理后的活性进行了研究 .结果表明 ,SRB法对这些细胞株的体外抗癌药物敏感试验结果稳定 ,该法与其它细胞毒试验相比有一定优点 。

10种常用中药提取物和10种单体对3种细胞增殖检测方法影响

目的:评估MTT法、SRB法和FDA法对中药的兼容性,确定适用于中药药效研究的细胞增殖检测方法。方法:采用无细胞体系和细胞体系两种实验体系,分别检测10种常用中药提取物和10种单体对MTT法、SRB法和FDA法检测结果的影响。结果:在无细胞体系中,中药提取物和单体均不与SRB直接作用。3种中药单体影响MTT法检测结果;6种中药单体影响FDA的检测。10种中药提取物中,8种影响MTT检测结果;4种影响FDA的检测。细胞体系中,影响MTT法、SRB法和FDA法检测结果的单体数量分别为4种、4种和7种。结论:SRB法最适于中药对细胞增殖影响的实验研究。

昆明山海棠总生物碱体外抗肿瘤作用的研究

目的:探讨昆明山海棠(THH)总生物碱对10种不同肿瘤细胞系的抑制作用,并筛选出最敏感的肿瘤细胞系。方法:采用XTT法和SRB法对THH总生物碱体外抗肿瘤作用进行初步筛选。结果:THH总生物碱对10种不同肿瘤细胞系生长均有明显的抑制作用,而且对不同肿瘤细胞系抑制作用存显著差异和选择性。尤其是对人T细胞白血病细胞系MOLT-4、人T淋巴母细胞白血病细胞系Jurkat、小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10、人结肠腺癌细胞系SW-480抑制率均>80%,其对应的IC50分别为13.59,24.10,30.05,31.39mg·L-1。结论:THH总生物碱体外具有广泛,高效的抗肿瘤活性,可进一步探讨其作为抗肿瘤药物研究开发的价值。

壳寡糖抗肿瘤和免疫调节作用的实验研究

研究壳寡糖抗肿瘤的作用和免疫调节作用.应用SRB法对壳寡糖进行体外抗肿瘤作用研究,对S180荷瘤小鼠的瘤重和胸腺及脾指数进行了的观察,同时观察了壳寡糖体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力的影响.壳寡糖体外对肿瘤生长的抑制作用不明显,体内实验表明壳寡糖能抑制S180小鼠的瘤重.壳寡糖能显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数.壳寡糖体外实验能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力.提示壳寡糖有可能是通过调节荷瘤小鼠免疫力实现抗肿瘤作用的.

β-榄香烯醇酯类化合物的合成及抗癌活性研究

目的设计合成β-榄香烯醇酯类化合物,并进行体外抗癌活性筛选。方法采用烯丙位的氯代反应,先合成β-榄香烯氯代物,再与羧酸或氨基酸反应合成目标化合物。用SRB法测定目标化合物对癌细胞的增殖抑制作用。结果共合成10个未见报道的β-榄香烯醇酯类化合物,其结构经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证。所合成的多个化合物对3种人癌细胞HL-60、HeLa、SGC-7901的IC50值低于β-榄香烯。结论通过在β-榄香烯结构中引入含氮、含氧基团,改善其水溶性,可以提高体外抗癌活性。

红树林海洋细菌的分离鉴定及其活性物质初步分析

从广西北部湾红树林海洋淤泥中分离筛选到270株海洋细菌,用喉癌细胞Hep-2的细胞毒作用为筛选模型,用SRB法检测这270株海洋细菌的抑制肿瘤细胞生长活性,其中13株呈阳性反应。依据形态和生理生化反应特征及16SrRNA基因序列分析,确定其中一株为短小芽孢杆菌Bacillus pumilusPLM4。取该菌株液体培养上清液,检测对人喉癌细胞Hep-2的生长抑制率为63.9%,经过凝胶过滤层析分析获得2个活性峰,其中活性高的峰估计平均分子量为116kd。采用经典显色反应法初步判断该活性物质为多糖。

辽东楤木叶总皂苷体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)的体外抗肿瘤作用,为进一步将其开发成新靶点的抗肿瘤药物提供可靠的科学依据,为研发具有自主知识产权的抗肿瘤新药奠定坚实的基础。方法利用磺酰罗丹明B(SRB)染色法,观察辽东楤木叶总皂苷不同浓度对A549、BGC、BEL-7402和HCT-8肿瘤细胞的抑制作用。结果 ETS浓度达到31.25μg.ml-1时即可对人肺腺癌A549细胞、人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%生长抑制作用,达到62.5μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%生长抑制作用。其浓度达到125μg.ml-1时即可对人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%杀死的作用。浓度达到500μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%杀死的作用,而对人肺腺癌A549细胞未测出其50%杀死作用。各组均未测出完全抑制细胞生长所需的ETS浓度。对于体外加药48 h后对A549、BGC、BEL和HCT-8细胞OD值的影响,ETS组500,250,125μg.ml-1均有极显著性统计学差异(P<0.01),62.5μg.ml-1对A549、BEL和HCT-8均有显著性意义;31.25μg.ml-1均无统计学意义。结论 ETS体外对人肺癌A549、人胃癌BGC、人肝癌BEL-2、人结肠癌HCT-8肿瘤细胞有一定的抑制作用。

低聚壳聚糖负载金属卟啉配合物的制备及生物活性研究

将低聚壳聚糖(COS)分别与不同卟啉金属(MTPPS4,M=Cu,Co,Zn)配合物结合,制备了水溶性低聚壳聚糖负载金属卟啉配合物(COS-MTPPS4),并采用红外光谱和紫外-可见光谱对其结构进行了表征。采用SRB细胞染色法,研究了壳聚糖负载金属卟啉(COS-MTPPS4)对人体肝癌细胞Bel-7402的抗肿瘤细胞活性。结果表明,金属离子配位到卟啉环中,使系列化合物对Bel-7402有较强的抑制生长活性,IC50值均小于100μg/mL,在10～20μg/mL范围内。水溶性低聚壳聚糖金属卟啉配合物作为抗肿瘤药物有很好应用前景。

共附生微生物抗肿瘤活性菌的筛选与鉴定

对分离自海绵和植物组织的一些微生物进行抗肿瘤活性菌株的筛选。采用SRB法对252株微生物菌株的发酵提取物进行了抗肿瘤活性的筛选。结果显示,28%的测试菌株在提取物浓度为100μg/mL时对HeLa细胞的抑制率在50%以上,经复筛确定有6株细菌和1株真菌具有良好且稳定的抗肿瘤活性,其提取物在100μg/mL时对HeLa细胞的抑制率均在80%以上,其中活性最高的两株菌HMJ-390和YX-5对HeLa细胞的IC50分别为40.56μg/mL和5.33μg/mL。经16S rDNA和ITS rDNA序列分析,鉴定HMJ-390为Cellulophagasp.,YX-5为Aspergillussp.。结果表明,作为抗肿瘤药物的潜在来源共附生微生物值得关注。

N_1-(芳)烷酰氧亚甲基-5-氟尿嘧啶的合成及其初步抗肿瘤活性的研究

目的 合成抗肿瘤活性高 ,毒性小的N1- (芳 )烷酰氧亚甲基取代的 5 -氟尿嘧啶衍生物。方法 以 5 -氟尿嘧啶为原料 ,经与甲醛加成反应后 ,和二酸单苄酯反应即得目标物 3a、3b、3c ,并采用MTT法及SRB法评价目标物 3的抗肿瘤活性。结果 合成了 3个目标物 3a、3b、3c ,其结构经1HNMR、IR和MS确证。结论 体外抗肿瘤活性筛选结果显示 3b和 3c有较强的抗肿瘤活性。

沙利度胺衍生物的设计合成及其抗肿瘤活性研究

目的设计合成1,3-二氢-1,3-二氧代-2H-异吲哚-N-取代沙利度胺衍生物,并对其进行体外抗肿瘤活性测试。方法以2-氨基-β-D-吡喃葡萄糖盐酸盐为原料,经过6步反应得到化合物N-(3′,4′,6′-三乙酰-1′-溴代吡喃葡萄糖)-1,3-二氢-1,3-二氧代-2H-异吲哚,该化合物经过溴代、取代反应得到目标化合物。通过对4T1细胞存活率的测试测定20个目标化合物体外抗肿瘤活性。结果设计合成的20个目标化合物均未见文献报道,所有化合物均经过1H-NMR谱确证,部分化合物经IR、MS谱确证。结论所有目标化合物对4T1细胞均具有一定的抑制生长作用,表明所合成的沙利度胺衍生物均有一定的抗肿瘤活性。

口腔鳞癌体外药敏实验

目的寻找适宜应用于临床的体外敏感药物实验方法。方法对37例经病理确诊的口腔癌患者的口腔颌面部原代鳞状细胞癌,利用卡铂、5-氟尿嘧啶、平阳霉素、氨甲喋呤进行MTT法和SRB法药物敏感实验。结果①MTT法与SRB法所得结果差异无显著性(P>0.05)。②各药物的平均抑癌率依次为卡铂+5-氟尿嘧啶>卡铂>5-氟尿嘧啶>平阳霉素>氨甲喋呤。结论①MTT法与SRB法适合临床需要。②口腔鳞癌的药物敏感性与药物有关。③联合用药效果比单药效果好。