三种植物甾醇调控SRE元件和3T3-L1细胞脂肪化活性的作用

[目的]为了研究植物甾醇对脂质代谢的调控作用。[方法]利用所构建的SRE荧光素酶活性测定系统,体外考察了豆甾醇、β-谷甾醇和菜油甾醇3种常见的植物甾醇对SRE元件的调控活性。[结果]植物甾醇能够增强SRE元件活性。植物甾醇也可以增加3T3-L1细胞的脂肪化作用。[结论]植物甾醇可能正调控脂质的合成。

SRE元件报告质粒构建、转染和活性测定

固醇调节元件结合蛋白(SREBP)是机体调控脂质合成的重要转录因子,其作用靶标是所调控基因启动子区域的SRE元件,构建该元件报告质粒对于评价SREBP相关活性物质的作用机制具有重要意义。文章扩增或人工合成了人LDLr基因启动子区域SRE元件1次重复片段或3次重复片段,将其插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建了2种含有人SRE元件的荧光素酶报告质粒;将该报告质粒转染到人肝癌细胞HepG2中,胰岛素处理可以显著活化荧光素报告质粒,而25-羟基胆固醇和胆固醇结合处理可以强烈抑制。结果表明,所构建的质粒能成功地反映SREBP活性的改变,为体外快速检测SREBP活性相关调控物质提供了一个有效的平台。

低密度脂蛋白受体基因表达调控研究

低密度脂蛋白受体(LDLR)调节体内胆固醇的平衡是通过其启动区的固醇调节元件(SRE)感受体内胆固醇的变化,从而调控LDLR基因的表达来实现的。胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、SREBP裂解蛋白(SCAP)参与这一调节。LDLR基因的表达还受到HMG-CoA还原酶抑制剂、激素、细胞生长因子等因素的影响。