SRSV/3T3和NIH/3T3细胞膜的分离和蛋白质组分的初步比较

应用甘油低渗两相分配法分离了SRSV/3T3细胞质膜(SM)和NIH/3T3细胞质膜(NM)。经Na^+、K^+-ATP酶和葡萄糖-6-磷酸酶等标志酶活性鉴定,表明SM和NM纯度较高。经SDS-PAGE分析比较,发现SM和NM的蛋白质组分有较明显差异。SM有7种独特的组分,分子量分别为2.29×10^(-22)、2.18×10^(-22)、9.79×10^(-23)、9.60×10^(-23)、8.63×10^(-23)、5.49×10^(-23)和4.78×10^(-23)kg。NM有两种特有的组分(1.15×10^(-22)和4.17×10^(-23)kg)。在彼此共有的蛋白质组分中,也有许多组分在含量和电泳迁移速度上存在着程度不同的区别。

小鼠腹水瘤病毒(SRSV)及其核糖核酸的纯化和某些性质的研究

从感染NIH3T3小鼠成纤维细胞上清液中分离小鼠腹水瘤病毒,用蔗糖密度梯度离心法纯化。从新鲜病毒中取小鼠腹水瘤病毒RNA,并用酚-氯仿抽提和蔗糖梯度分离。各组分的沉降系数(S)和分子量通过超速离心凝胶电泳分析测定。SRSV RNA主要由两组分组成,一是沉降系数约60～70S(热处理后约35S),还有少量18S和28S,另一是4～5S。35S组分在体外能指导无细胞蛋白的合成。

用植物病毒载体表达小球状病毒抗原蛋白的研究

将引起人类腹泻主要病原物小球状病毒(Small round structured virus;SRSV)编码抗原蛋白基因的全长序列1605bp,导入来自三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus;ClYVV)侵染性全长cDNA克隆的侵染性植物病毒表达载体pClYVV/CP/W基因组的NIb/CP基因之间,构建了重组病毒克隆pClYVV-NV1.6。用上述重组病毒克隆接种蚕豆植物,表现了与野生型ClYVV相同的症状。从发病叶中提取总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)对上述重组病毒克隆的转录进行了检测,结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中仍然稳定存在。从发病叶中提取总蛋白,用酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay;ELISA)及蛋白质杂交(Western blotting;WB)对上述重组病毒克隆表达的目的基因产物抗原蛋白进行了测定,结果表明,重组病毒克隆pClYVV-NV1.6之目的基因产物的表达量随寄主植物发病后时间的推移而变化,最大表达是在寄主植物发病后第9天,最大表达量为每克鲜叶可表达160.00μg,这一研究结果为用植物生产抗SRSV口服疫苗提供了有力的基础。

STUDY ON MOLECULAR BIOLOGY OF SRS LEUKEMIA VIRUS ISOLATED IN CHINA AND INHIBITORY EFFECT OF ANTISENSE OLIGODEOXYNUCLEOTIDES

This paper reviews the significant study on SRS leukemia virus (SRSV) in recent years in China. A series of results about the proteins, nucleic acids and function, CDNA libraries, molecular cloning of SRSV, and inhibitory effect of antisense oligodeoxynucleotides on SRSV are reported. It has proved that SRSV is useful to study the vival etiology and pathogenesis of human leukemial.

正常小鼠脾细胞的抑瘤效应与自然杀伤细胞活性相关

利用甲基氚化胸腺嘧啶核苷(~3H-dT)与^(51)Cr释放法平行对比,检测正常小鼠脾细胞对YAC-1细胞的抑瘤率和杀伤率,两者呈显著相关。参与抑瘤效应的细胞与自然杀伤细胞(NK细胞)类似,都能被多聚肌苷酸:胞苷酸(polyⅠ:C)、白细胞介素2(IL-2)活化;耐受20Gyγ射线。实验表明,在抑瘤效应中,包含着NK细胞的作用。但~3H-dT掺入试验比^(51)Cr释放法更敏感,当选用低杀伤率的效靶配组时,仍能检测一定程度的抑瘤率。