SP-B基因内含子4区(CA)_n模体上SRp20蛋白结合位点的初步研究

目的探讨SP-B基因内含子4区第8号(CA)_n模体上可能存在的剪切蛋白结合位点,为进一步研究第8号(CA)_n模体影响SP-B mRNA剪切的机制提供实验基础。方法软件分析特定(CA)_n模体的潜在RNA结合蛋白,并合成含有特定蛋白潜在结合位点的模体RNA序列的探针及突变序列探针,用凝胶阻滞迁移(EMSA)技术研究相关(CA)_n模体的RNA序列与其潜在结合蛋白的相互作用。结果软件分析预测第8号(CA)_n模体上可能存在特定剪切蛋白SRp20的结合位点;EMSA实验中当抗体或突变探针竞争时特异性结合带(迁移带)均消失,显示第8号(CA)_n模体RNA序列上的"CAUC"能够与SRp20特异性结合。结论SP-B内含子4区第8号(CA)_n模体的保守序列上存在SRp20的特异性结合位点,从而可能影响SP-B mRNA剪切。

骨肉瘤组织SRp20蛋白表达及其临床意义的初步研究

目的:探讨骨肉瘤组组织SRp20蛋白表达情况及其临床意义。方法:应用Max Vision免疫组化方法检测64例骨肉瘤组织和18例骨软骨瘤组织SRp20蛋白表达情况,并分析与临床病理参数之间的关系。结果:骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中,SRp20胞核阳性表达率分别为14.1%(9/64)和0(0/18),P=0.195;而骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中,SRp20细胞质阳性表达率分别为73.4%(47/64)和5.6%(1/18),P<0.001。在骨肉瘤组织中,SRp20的细胞质阳性表达与骨肉瘤的恶性程度(P=0.002)、Enneking分期(P=0.001)以及5年生存率(P=0.023)相关。结论:SRp20细胞质表达与骨肉瘤患者的不良预后相关,可能成为预测患者预后情况的靶点。

SRp20对口腔癌细胞丙酮酸激酶前体mRNA可变剪切的调控作用

目的:研究SRp20参与口腔癌细胞中丙酮酸激酶前体mRNA可变剪切的调控机制。方法:采用siRNA在口腔癌细胞Cal27和Tca8113中沉默SRp20的表达,再以RT-PCR检测丙酮酸激酶的M1和M2亚型的表达水平。结果:SRp20的特异性siRNA转染Cal27和Tca8113细胞,显著降低了SRp20的表达水平。在Cal27细胞和Tca8113细胞中,抑制SRp20的表达后,M2的表达水平下降,M1与M2表达水平的相对比例显著增加。结论:在口腔癌细胞中,SRp20调控丙酮酸激酶前体mRNA可变剪切,利于M2亚型丙酮酸激酶的表达。