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应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率
被引量:
19
1
作者
吴金青
梅瑰
+3 位作者
刘志国
陈瑶生
丛佩清
何祖勇
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期55-62,共8页
IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重...
IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts,PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%,显著高于ZFN的切割效率(<1%),但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer,SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA(Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞,结果表明,该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右,对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。
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关键词
IGF2基因
CRISPR/Cas9
ssa报告系统
CRISPR/Cas9
下载PDF
职称材料
题名
应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率
被引量:
19
1
作者
吴金青
梅瑰
刘志国
陈瑶生
丛佩清
何祖勇
机构
中山大学生命科学学院
广东省农业科学院动物科学研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期55-62,共8页
基金
国家转基因重大专项(编号:2013ZX08006005-005)
国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(编号:2010CB945404)资助
文摘
IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts,PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%,显著高于ZFN的切割效率(<1%),但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer,SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA(Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞,结果表明,该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右,对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。
关键词
IGF2基因
CRISPR/Cas9
ssa报告系统
CRISPR/Cas9
Keywords
ZFN
IGF2 gene
ZFN
ssa
reporter system
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率
吴金青
梅瑰
刘志国
陈瑶生
丛佩清
何祖勇
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2015
19
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