盐溶蛋白法和SSR标记法检测玉米纯度的比较

利用盐溶蛋白PAGE法和SSR分子标记法对玉米杂交种苏玉20和成单60的指纹图谱进行分析。结果发现,应用盐溶蛋白PAGE法可用于苏玉20纯度鉴定,而在成单60的图谱中未出现明显特征谱带,故不能进行鉴定;SSR分子标记法选用了20对SSR引物,分别在苏玉20及其双亲间得到8对引物显示稳定的多态性,而在成单60及其双亲间得到3对,杂种均表现为父母本互补的带型,可作为纯度鉴定候选引物。综合比较,盐溶蛋白PAGE法简单快速,适合单品种检测,而SSR分子标记法适用范围更广,且准确、高效、经济。

磁珠富集法分离小黄李基因组微卫星DNA片段

将微卫星探针5′端生物素化后与链亲和素磁珠特异结合,用磁珠和探针的结合物与两端连接已知序列人工接头的中国李品种小黄李(Prunus salicinacv.Xiaohuangli)基因组DNA酶切片段杂交,以此杂交片段为模板用人工接头序列为引物进行PCR扩增,根据PCR产物测序结果设计引物作为微卫星DNA的标记引物.结果在随机挑选的36个克隆进行菌落PCR检测时,从31个阳性克隆中挑选18个克隆进行测序后获得了12条特异序列,设计的8对SSR引物均在5个中国李受试品种上获得了预期的扩增产物,其中4对引物在受试品种上表现出多态性.

林下栽培金线莲的生药鉴别

目的:对林下栽培的不同品系金线莲进行生药鉴别,为金线莲药材商品的鉴别提供依据。方法:采用生药性状鉴定法、显微鉴定法和SSR分子标记法鉴定四个品系的林下栽培金线莲。结果:可从叶形、叶片大小、叶片脉纹特征等性状特征区分不同品系金线莲;通过(叶)显微构造观察,发现不同品系金线莲上表皮细胞和叶肉薄壁细胞的内含物存在差异;通过SSR分子标记聚类分析表明各品系金线莲遗传相似系数变幅为0.42~1.00,在遗传相似系数约0.74处,可将不同的品系分开;基于6对引物构建了各品系金线莲的DNA指纹图谱。结论:林下栽培的不同品系金线莲在生药性状、显微构造以及遗传特性方面存在差异。本研究所发现的鉴别特征可为市售金线莲的商品鉴别及质量控制提供依据。