黄瓜无苦味种质资源的SSR标记鉴定

鉴定无苦味种质,选育无苦味品种是控制黄瓜苦味、改善品质的有效方法。利用黄瓜营养器官苦味基因的标记SSR02309和果实苦味基因的标记SSR10795,对78份种质资源进行苦味基因型分析,表明黄瓜种质间和种质内苦味基因的标记基因型存在遗传变异性。明确了78份种质苦味基因的标记基因型。初步鉴定出7份无苦味种质。在田间逆境胁迫条件下,利用感官品尝方法对标记鉴定的7份无苦味种质的苦味性状进行了感官品尝鉴定,结果与标记鉴定的一致。为无苦味黄瓜品种改良奠定了技术与种质基础。

甘蔗与斑茅杂交后代的SSR标记鉴定方法

为简化甘蔗与斑茅杂交后代鉴定程序、缩短鉴定时间,提高检测准确性,本研究在前期简化基因组调研测序开发的SSR引物基础上,选取部分引物对其在甘蔗DNA混液、斑茅DNA混液、主要栽培种及甘蔗与斑茅杂交后代DNA的扩增情况进行分析。结果表明,选取的381对引物在斑茅DNA混液和10个甘蔗栽培种DNA混液中有363对引物在斑茅混液中检测到扩增产物,其中86对只在斑茅混液检测到扩增产物。将上述86对引物在192个甘蔗栽培种中进行扩增分析,筛选得到4对仅在斑茅及甘蔗与斑茅的后代有特异扩增条带的特异性引物。本研究可实现简单、快速、准确鉴定甘蔗和斑茅杂交后代的斑茅血缘,有利于高效地获得真实的杂种后代,加快甘蔗和斑茅杂交后代育种进程。

大豆种质对花叶病毒病和疫霉根腐病抗病性的SSR标记辅助鉴定

通过与花叶病毒病（soybeanmosaicvirus，SMV）抗性相关的SSR标记Sattll4对30份大豆种质进行分子辅助鉴定，共发现10个抗SMV的种质，经摩擦接种法表型验证其中9个种质表现为抗病，即分子辅助鉴定的准确性为90％。另外，利用与疫霉根腐病（phytophthorarootrot，PRR）相关的SSR标记Satt325、SatG43、Satg28、Sate05、Satt600、Satt611、Satt689、Sate79、Satt252、Satt274对相同的30份大豆种质进行分子辅助鉴定，共在2，3，5，6，12，2份大豆种质上分别检测到0，1，2，3，4，5个抗PRR的QTI．，并利用菌土法盆栽验证种质的抗病性，结果表明拥有0～1个抗PRR的QTL大豆种质的病害损失率平均为94％，拥有2～3个抗PRR的QTL大豆种质的病害损失率平均为77．82％，拥有4—5个抗PRR的QTL大豆种质的病害损失率平均为36．70％。通过本研究筛选获得了1份既高抗SMV又高抗PRR的种质合05-31。

大豆花叶病毒病和疫霉根腐病抗性的SSR标记辅助鉴定

采用抗花叶病毒病品种东农93046、抗疫霉根腐病品种Conrad、耐疫霉根腐病品种合丰25和高产品种东农L-5两两杂交后再复交衍生的146个F2：5重组自交系，利用与大豆花叶病毒病抗性基因相关的SSR标记Satt114，与大豆疫霉根腐病抗性相关的分子标记Satt325、Satt343、Satt428、Satt005、Satt600、Satt611、Satt689、Satt579、Satt252、Satt274进行分子辅助鉴定，进而分别通过摩擦接种法和菌土法来验证分子辅助鉴定的准确性。结果表明：通过Satt114分子辅助鉴定共发现32个抗大豆花叶病毒病家系，经摩擦接种法表型验证其中28个家系表现为抗病，即分子辅助鉴定的准确性为87．5％。通过与大豆疫霉根腐病相关的10个SSR标记的分子辅助鉴定，共发现23个家系含有4～8个抗性位点，经菌土法表型验证其中含有4，5，6，7，8个抗病位点家系的病害损失率分别可达61．11％、47．08％、32．92％、26．11％、18．34％，即后代家系聚合越多的QTL则抗大豆疫霉根腐病能力越强。另外，本研究得到了4份既高抗大豆花叶病毒病又高抗大豆疫霉根腐病的新种质。

黑龙江省主栽大豆品种脂肪含量分析及SSR分子标记辅助鉴定

以黑龙江省92个主栽大豆品种(系)为研究对象,分别对其在2010年和2011年的脂肪含量进行分析,发掘与脂肪含量紧密连锁的SSR标记,用以辅助鉴定黑龙江省主栽大豆品种的脂肪含量。结果表明:供试材料脂肪含量变异范围2010年为17.10%～23.14%,2011年为17.70%～23.04%,两年平均为17.40%～23.09%。结合SSR数据的品种系统进化树分析,可以将黑龙江省主栽大豆品种脂肪含量总体上分成大于20%和小于20%两类。此外,鉴别出2个与脂肪含量相关的SSR标记(Satt428-900、Satt502-150),标记指数与脂肪含量显著相关(相关系数分别为-0.41*和0.41*)。

亲本未知的棉花F_1杂种及其F_2单株的SSR分子鉴定

在棉花品种区域试验中,杂交种纯度的分子检测一直是比较困难的课题,尤其是在亲本未知的情况下,杂交种的纯度的分子检测研究尚未见报导。本研究利用17对SSR核心引物对参试品种邯6402的F1进行纯度检测,SSR标记纯度达100%,17对引物中有12对呈现共显性,5对引物为非共显性。同时,构建了F1的SSR指纹图谱,以此可以鉴定邯6402的真实性。继续用这些引物对F2的44株棉苗进行检测,F2群体棉苗均有不同程度的分离,绝大部分基因型为杂合体,许多位点显示共显性,且共显性位点互不相同,在分子水平上验证了F2群体的杂合状态。应用这一套SSR核心引物,能够在室内鉴定棉花杂交种的真实性和纯度,还能够鉴别是F1杂交种还是F2分离群体,比对杂交种的指纹图谱能检测出F1中掺杂成分。