白藜芦醇在ST2细胞增殖及成骨分化过程中的作用研究

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对ST2细胞(小鼠骨髓间充质干细胞)增殖及成骨分化的作用,以期为颞下颌关节骨关节炎的治疗提供思路。方法对第3代ST2细胞分别用0、5、10、15和20μmol/L的RES培养,48 h后采用MTT检测细胞的增殖,采用Real time RT-PCR和Western blot检测成骨特异性蛋白Runx2、Osterix的表达。结果不同浓度RES对ST2细胞无显著的促增殖作用,但RES能增强ST2细胞的成骨分化能力,且具有剂量依赖性。结论 RES可促进ST2细胞的成骨分化,可能为颞下颌关节骨关节炎的治疗提供新的思路。

白细胞介素-33/ST2信号通路调控辅助T细胞/调节性T细胞免疫平衡参与慢性阻塞性肺疾病发病机制分析

目的探究基于白细胞介素-33(IL-33)/ST2信号通路激活树突状细胞(DCs)成熟,调控辅助T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡参与小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的临床机制。方法选择36只SPF级C57BL/6健康小鼠,随机选取12只作为健康对照组,其余小鼠用于制作COPD模型,采用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖的方式建立COPD模型,以小鼠肺部压力-容积曲线移动或弹性程度降低为造模成功,将模型小鼠按照随机数字表法分为COPD组(n=12)和IL-33抗体干预组(n=12)。于造模开始第3周时为IL-33抗体组小鼠腹腔注射IL-33抗体,健康对照组和COPD组小鼠注射同等剂量生理盐水,于造模开始第28天在小鼠清醒状态下采集三组小鼠的内眦静脉从血液,使用PBS液冲洗三组小鼠右肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),比较三组小鼠外周血、BALF中DCs、IL-33表达情况差异,采集肺组织甲醛固定后染色处理,光镜下观察肺组织病理变化。结果COPD组小鼠外周血、BALF中Th17/Treg比值均高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);COPD组小鼠外周血、BALF中DCs成熟标志物CD80、CD86水平均高于健康对照组和IL-33抗体组,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ低于健康对照组和IL-33抗体组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR分析显示,COPD组小鼠IL-33灰度值高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);三组小鼠气道炎症病理差异较大。结论调控IL-33/ST2信号通路可以激活DCs细胞成熟,恢复COPD小鼠Th17/Treg平衡,改善COPD小鼠炎症指标水平。

蛇床子和补骨脂含药血清对乳腺癌高转移细胞MDA-MB-231BO与骨髓基质细胞ST2的影响

目的:探讨不同比例蛇床子和补骨脂配伍对乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231BO及骨髓基质细胞株ST2的影响。方法:36只雌性SD大鼠按蛇床子和补骨脂用药比例随机分为4:0组、3:1组、1:1组、1:3组、0:4组和空白组。灌胃4d制备中药血清。用各药物血清培养MDA-MB-231BO细胞及ST2细胞后,甲基噻唑基四唑法检测MDA-MB-231BO细胞和ST2细胞的抑制率,细胞迁徙实验检测MDA-MB-231BO细胞迁徙能力,磷酸对硝基苯酯法检测ST2细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,矿化结节形态计量法检测ST2细胞成骨能力。结果:与空白血清比较,各配伍比例蛇床子和补骨脂含药血清均能抑制MDA-MB-231BO细胞的迁移,其中1:1蛇床子和补骨脂配伍药物血清对MDA-MB-231BO细胞的抑制迁徙能力显著(P<0.01)。与空白组比较,蛇床子和补骨脂1:1配伍组ST2细胞ALP活性增强(P<0.05),ST2细胞矿化结节形成数量增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蛇床子和补骨脂含药血清能够抑制MDA-MB-231BO细胞增殖和转移,增强ST2细胞活性。

Nortriptyline推迟Huntington病小鼠的发病(英文)

Huntington病(HD)是一种常染色体显性遗传性神经退行性疾病,主要组织病理学特征是纹状体运动神经元进行性死亡,目前尚无有效治疗方法,本实验探讨了nortriptyline(去甲替林)的潜在疗效。采用N548mu[1955-128]huntingtin ST14A细胞系进行体外培养,观察不同浓度nortriptyline对细胞存活的影响。选用R6/2转基因鼠,从第5周开始每天腹腔注射nortriptyline,直至21周,对照组腹腔注射与nortriptyline组等剂量的生理盐水。结果发现,nortriptyline对移入不同温度环境的ST14A细胞具有保护作用。nortriptyline可推迟R6/2转基因鼠的发病,由102d推迟到127d,与对照组比较具有显著性差异。nortriptyline对R6/2转基因鼠死亡率的影响,与对照组比较无显著性差异。作为检测nortriptyline毒性的指标,nortriptyline对R6/2转基因鼠体重的影响,与对照组比较无显著性差异。结果表明,nortriptyline可推迟Huntington转基因鼠的发病,是目前毒性低、能够延长Huntington转基因鼠存活的有效药物。

糖皮质激素对食管癌模型小鼠白细胞介素-33表达的影响

目的观察糖皮质激素对食管癌模型小鼠白细胞介素(IL)-33表达的影响。方法将18只BALB/c小鼠随机分为模型组(Model组)、糖皮质激素组(GC组)和对照组(Control组)。Model组小鼠饮用浓度为100 μg/ml的4NQO水溶液16周后,饮用灭菌注射用水到24周;GC组小鼠在Model组小鼠的基础上,腹腔注射地塞米松(400 μg/只)至24周;Control组小鼠饮用丙二醇水溶液16周后,饮用灭菌注射用水到24周。3组小鼠每隔4周进行尾静脉取血,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-33的水平;24周后处死所有小鼠并称取完整食管的质量;通过Western blot检测各组小鼠食管组织IL-33、ST2的蛋白表达水平;免疫组织化学观察IL-33的染色。结果Model组(4.75±1.78) g、GC组(2.06±0.02) g和Control组(0.08±0.01) g小鼠食管重量两两较,差异均有统计学意义(均P<0.05);GC组小鼠食管组织IL-33(238.007±36.091)和ST2(456.018±65.013)蛋白表达相对灰度值显著低于Model组小鼠食管组织IL-33(349.095±78.004)和ST2(871.021±60.015)蛋白相对灰度值,差异均具有统计学意义(P<0.05),Control组小鼠食管组织IL-33(123.075±23.027)和ST2(266.071±34.056)蛋白表达相对值显著低于GC组小鼠,两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。在第24周,Model组、GC组和Control组3组小鼠血清IL-33水平分别为(381.032±45.013) ng/ml、(168.035±26.078) ng/ml和(103.012±34.055) ng/ml,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色显示Model组小鼠食管黏膜组织上皮细胞的胞质中IL-33染色最多,其次为GC组和Control组小鼠,3组小鼠IL-33阳性细胞数量分别为9.073±1.035、3.068±1.005和1.023±0.087,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论IL-33与食管癌显著相关,GC能够通过抑制IL-33/ST2信号转导通路而抑制肿瘤的生长。