抑癌基因ST7L对卵巢癌细胞增殖、细胞周期和裸鼠移植瘤的影响

目的:研究ST7L基因对人类卵巢癌细胞系OVCAR3和SKOV3细胞增殖、细胞周期和体内裸鼠成瘤模型的影响。方法:PCR扩增ST7L过表达质粒(pc DNA3/ST7L),生物合成ST7L的敲降质粒(p Silencer/ST7L);利用脂质体转染技术在卵巢癌细胞中过表达或者敲降ST7L基因,用荧光定量PCR、Western blot验证质粒的有效性;MTT、克隆形成实验、流式细胞术检测ST7L对OVCAR3和SKOV3细胞增殖能力、周期的影响;并通过裸鼠移植瘤实验研究ST7L在体内成瘤能力。结果:过表达和敲降ST7L质粒是有效的;过表达ST7L后抑制了卵巢癌细胞生长,抑制了细胞G1/S期的转化;过表达ST7L在体内能够有效抑制裸鼠的成瘤能力。结论:ST7L抑制OVCAR3和SKOV3细胞的增殖能力,抑制细胞周期进程,抑制体内裸鼠成瘤能力。

ST7L通过调控WNT/β-catenin通路抑制非小细胞肺癌恶性行为

目的:探讨肿瘤抑癌基因7L(ST7L)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及具体分子机制。方法:运用临床数据库(TCGA和GEO)分析NSCLC临床样本中ST7L的表达水平;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测25对NSCLC患者及肺癌细胞系中ST7L的表达水平;CCK8实验、集落形成实验、细胞周期实验、Hoechst试剂盒染色检测ST7L对肺癌A549和H1299细胞生长能力、细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot、荧光报告载体实验和免疫荧光检测ST7L对WNT/β-catenin通路的调控作用。结果:ST7L在NSCLC组织及细胞系中低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC患者组织中ST7L的表达水平与肿瘤大小、TNM分期及远端转移呈负相关(P<0.05),与年龄、性别及组织学分类无相关性(P>0.05)。ST7L通过抑制细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制A549和H1299细胞的增殖能力(P<0.05)。ST7L在A549和H1299细胞中抑制WNT信号通路活化(P<0.05)。结论:ST7L通过失活WNT/β-catenin通路在NSCLC细胞中抑制细胞的恶性行为。

ST7L在人结直肠癌中的表达水平及作用机制研究

探讨人临床结肠癌组织和结直肠癌细胞中ST7L的富集程度,研究其作用分子机制及诊疗结肠癌患者的潜在临床意义。方法 使用利用GeneCards和TCGA数据库分析ST7L细胞在结肠癌中的定位及其表达水平。 CCK8、集落形成测定、膜联蛋白 V/PI 染色采用流式细胞术检测ST7L基因对人结直肠癌细胞SW480的增殖能力及凋亡水平的作用。 Transwell小室实验研究ST7L基因对人结直肠癌细胞SW480的细胞迁移和侵袭力量的作用。结果 ST7L主要定位于细胞核和细胞质,结直肠癌组织中表达量显着低于相应癌旁组织(P < 0.01)。过表达 ST7L可显着抑制人结直肠癌细胞SW480的增殖能力、迁移能力和侵袭侵袭,并显著促进人在结直肠癌细胞SW480的细胞凋亡能力(均P<0.01)。结论 结直肠癌中低表达的 ST7L通过调控细胞的增殖、凋亡和迁移侵袭能力发挥其抑癌的作用。

ST7L基因抑制甲状腺癌细胞恶性行为的机制

目的探讨肿瘤抑癌基因7-L(ST7L)抑制人类甲状腺癌细胞系K1和TPC-1恶性行为的具体分子机制。方法运用实时荧光定量PCR技术检测20对甲状腺癌患者及其癌旁组织的ST7L m RNA水平;应用PCR扩增出ST7L过表达质粒(pc DNA3/ST7L),并用退火引物构建出ST7L的敲降质粒(si ST7L);利用脂质体转染技术在甲状腺癌K1和TPC-1细胞中过表达或者敲降ST7L基因,用实时荧光定量PCR验证质粒的有效性;MTT、克隆形成实验、流式细胞术周期实验检测ST7L对K1和TPC-1细胞增殖能力、周期影响;应用Transwell迁移和侵袭实验检测ST7L对于K1和TPC-1细胞迁移能力及侵袭能力的影响。两组间独立样本比较采用t检验,使用Graphpad Prism 6统计软件进行统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 18/20对甲状腺癌患者组织内ST7L m RNA水平明显低于其癌旁组织(下降约50%),差异具有统计学意义(均P<0.05)。过表达ST7L质粒和敲降的ST7L质粒在m RNA水平是有效的,过表达ST7L后上调约为5.5倍,敲降ST7L后下调约为50%,差异具有统计学意义(均P<0.001);过表达ST7L后抑制甲状腺癌K1和TPC-1细胞生长活性(下调约38%)及集落形成能力(下调约42%),抑制K1和TPC-1细胞G1/S期的转化,差异具有统计学意义(均P<0.001);过表达ST7L后能够显著抑制K1和TPC-1细胞的迁移(下调约45%)和侵袭能力(下调约39%),而敲降ST7L后明显促进了K1和TPC-1细胞的迁移(上调约2.2倍)和侵袭能力(上调约1.8倍),差异具有统计学意义(均P<0.001)。结论抑癌基因ST7L抑制甲状腺癌细胞的细胞活性和克隆形成能力,抑制甲状腺癌细胞周期进程,抑制甲状腺癌细胞的迁移和侵袭能力。