长链非编码RNA ST8SIA6-AS1在恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA (long non-coding RNAs, LncRNA)是一种长度超过200个核苷酸的非编码RNA,尽管LncRNA占所有转录物的不到2%,但其在调节基因表达水平发挥重要作用,广泛参与人类疾病进展。很少有LncRNA被发现对癌细胞存活至关重要,尤其是对多种癌症类型至关重要的LncRNA。长链非编码RNA ST8SIA6-AS1被发现在多种肿瘤中处于失调状态,如垂体腺瘤、肝细胞癌、肺癌、乳腺癌及结直肠癌等。本综述结合近期文献,总结ST8SIA6-AS1参与肿瘤的发生发展作用与分子机制,为进一步研究提供参考。

ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用通过激活AKT活性并下调P21促进肝癌进展

目的筛选肝癌中具有临床意义的潜在药物靶点并研究此靶点在肝癌发生、发展中的功能和分子机制。方法通过临床数据库GEPIA找到在肝癌中差异表达的lncRNA,进一步筛选到相比于肝正常组织表达差异性明显的lncRNA;通过细胞增殖实验筛选到影响肝癌细胞生长明显的lncRNA;通过GEPIA数据库探讨目的lncRNA在各肿瘤及肝癌中的表达情况及其与肝癌的临床预后相关性;最后通过与目的lncRNA相互作用的蛋白预测其参与的信号通路并进行Western blotting验证,从而说明目的lncRNA在肝癌中发挥功能的潜在分子机制。结果ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC在肝癌相比于肝正常组织中显著高表达;通过敲低ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC的细胞增殖实验结果显示,ST8SIA6-AS1显著促进肝癌细胞的生长,从而确定ST8SIA6-AS1为研究目的lncRNA;ST8SIA6-AS1在肝癌中显著高表达且具有明显的临床预后相关性即高表达预后差的特征;ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用,敲低ST8SIA6-AS1和hnRNPA2B1表达均可降低cleaved caspase-3和P21的表达从而激活PI3K/AKT信号通路,促进肝癌细胞生长增殖。结论ST8SIA6-AS1有望作为肝癌的潜在药物治疗靶点。

ST8SIA6-AS1对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响及其分子机制

目的探讨ST8SIA6-AS1对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取37例骨肉瘤患者的瘤组织及瘤旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ST8SIA6-AS1、miR-223-3p的表达水平。将骨肉瘤细胞U2OS分为si-ST8SIA6-AS1组、si-NC组、miR-223-3p mimic组、miR-NC组、si-ST8SIA6-AS1+miR-223-3p inhibitor组、si-ST8SIA6-AS1+anti-miR-NC组。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;采用克隆形成实验检测细胞克隆形成数;采用划痕实验检测细胞划痕愈合率;采用Transwell检测细胞迁移数;采用双荧光素酶报告实验检测ST8SIA6-AS1与miR-223-3p的靶向关系。结果与瘤旁组织相比,骨肉瘤组织中ST8SIA6-AS1表达水平升高,miR-223-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默ST8SIA6-AS1或过表达miR-223-3p后,U2OS细胞增殖抑制率升高,U2OS细胞克隆形成数和迁移数减少,U2OS细胞划痕愈合率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。ST8SIA6-AS1可靶向调控miR-223-3p;抑制miR-223-3p可逆转沉默ST8SIA6-AS1对U2OS的抑制作用。结论ST8SIA6-AS1在骨肉瘤中高表达,沉默ST8SIA6-AS1可通过调控miR-223-3p抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移。

ST8Sia1基因过表达载体构建与鉴定及对人黑色素瘤细胞增殖的影响

目的构建ST8Sia1基因过表达载体,建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,检测ST8Sia1的表达及对细胞增殖的影响。方法通过PCR反应扩增ST8Sia1基因片段,双酶切目的基因片段和pEGFP-C1载体以及pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZsGreen-T2A-Puro载体,分别将目的基因片段和不同载体连接,得到ST8Sia1-pEGFP-C1重组载体和重组慢病毒载体。采用PCR方法和DNA序列进行鉴定。分别用不同载体转染黑色素瘤细胞WM451,筛选建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,Real-time PCR检测稳转细胞ST8Sia1 mRNA水平;Western blot法检测稳转细胞中ST8Sia1蛋白表达水平;CCK-8法检测稳转细胞的生长增殖活性;软琼脂克隆形成实验分析稳转细胞的克隆形成能力。结果成功构建ST8Sia1-pEGFP-C1重组质粒及ST8Sia1过表达慢病毒载体。发现ST8Sia1过表达慢病毒载体转染效率较高,建立稳定过表达ST8Sia1的WM451细胞株,发现ST8Sia1过表达促进肿瘤细胞增殖和克隆形成。结论成功构建了ST8Sia1过表达载体,并发现ST8Sia1过表达能够促进黑色素瘤细胞WM451的增殖、克隆形成能力。

长链非编码RNA MEG3等在肺癌组织中的表达

目的探讨长链非编码RNA MEG3、ST8SIA3和TUG1在肺癌中的表达。方法选择47例肺癌患者的癌组织和癌旁正常组织,利用TRIzol提取总RNA,SYBR Green实时荧光定量PCR检测MEG3、ST8SIA3和TUG1 RNA的相对表达量。结果 MEG3和TUG1在癌组织中经对数转换后的相对表达量分别为4.74±2.31和12.90±1.36,均低于癌旁正常组织(分别为6.89±2.19和13.68±1.39),差异有统计学意义(P<0.05);ST8SIA3在癌组织中经对数转换后的相对表达量为13.12±1.55,与癌旁正常组织(13.61±1.72)的差异无统计学意义。Spearman等级相关显示,肺癌组织中ST8SIA3、TUG1的相对表达量与TOPOⅡ呈负相关(分别为r=-0.47,P=0.00;r=-0.42,P=0.01),ST8SIA3的相对表达量与TNM分期呈正相关(r=0.29,P=0.04);未发现其他指标间呈相关性。结论 MEG3、TUG1在癌组织中的相对表达量均降低,提示可能在肺癌的发生发展中起到抑癌因子的作用。