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花生中DREB类转录因子PNDREB1的克隆及鉴定 被引量:9
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作者 张梅 刘炜 +1 位作者 毕玉平 王自章 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1973-1980,共8页
脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序... 脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序列长度为687bp,推测编码蛋白含有229个氨基酸残基,相对分子量为24.7kD,理论等电点为5.97,与其他物种中该类转录因子序列同源性较高。利用酵母单杂交系统,对花生PNDREB1与DRE元件的特异识别和结合能力及其C-末端转录激活活性进行检测,显示,转入含有该基因及阳性对照基因的载体均可使酵母菌株正常生长,且具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,证明基因PNDREB1中的AP2结构域具有和DRE元件特异性结合的能力;同时,只有转入含有该基因C-末端片段及阳性对照基因的载体可使酵母菌株正常生长,并具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,说明其C-末端片段具有转录激活活性,该基因为DREB类转录因子。基因表达模式分析显示,PNDREB1为组成型表达,且被低温强烈、迅速诱导表达,并对干旱胁迫也有一定程度的响应,但对高盐和ABA处理没有响应。 展开更多
关键词 花生 DREB转录因子 PNDREB1 酵母单杂交 表达模式 低温 干旱
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ERF类转录因子OPBP1基因的超表达提高烟草的耐盐能力 被引量:26
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作者 刘文奇 陈旭君 +2 位作者 徐晓晖 凌建群 郭泽建 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第6期473-478,共6页
ERF是植物中的一类重要的转录因子 ,参与调节植物的生长、发育以及抗胁迫等过程。对一烟草OPBP1基因 (属于ERF类基因 )的烟草转化 ,获得了该基因超表达的植株 ,转基因植株明显地增加了耐盐能力。Northern杂交结果表明 ,OPBP1基因有不同... ERF是植物中的一类重要的转录因子 ,参与调节植物的生长、发育以及抗胁迫等过程。对一烟草OPBP1基因 (属于ERF类基因 )的烟草转化 ,获得了该基因超表达的植株 ,转基因植株明显地增加了耐盐能力。Northern杂交结果表明 ,OPBP1基因有不同程度的表达 ,而且表达丰度与其耐盐性有一定的正相关性。凝胶阻滞实验结果证明OPBP1融合蛋白能特异地与含GCC盒的DNA序列结合。这些结果说明OPBP1基因可能作为一转录因子来调节烟草耐盐相关的基因。 展开更多
关键词 ERF转录因子 OPBP1基因 超表达 烟草 耐盐能力
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STAT1在乳腺癌中作用机制的研究进展
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作者 石媛媛 赵杨 +1 位作者 刘赛璇 申兴斌 《承德医学院学报》 2024年第1期57-61,共5页
乳腺癌是全球三大最常见癌症之一,也是女性有关癌症死亡的主要原因。由于公众的密切关注对乳腺癌的识别和筛查产生了积极影响,治疗上也取得了长足进展,避免过度治疗和治疗不足已成为一个焦点,治疗方法需要在多学科背景下确定,同时还要... 乳腺癌是全球三大最常见癌症之一,也是女性有关癌症死亡的主要原因。由于公众的密切关注对乳腺癌的识别和筛查产生了积极影响,治疗上也取得了长足进展,避免过度治疗和治疗不足已成为一个焦点,治疗方法需要在多学科背景下确定,同时还要考虑分子亚型和局部肿瘤负荷。近年来,信号传导及转录激活蛋白(signal transduction and activator of transcription,STAT)在肿瘤中的应用受到了广泛关注,它们参与肿瘤的发生发展,包括细胞增殖和凋亡、细胞周期进展、血管生成、肿瘤细胞的转移以及免疫逃逸等过程。STAT1可能与肿瘤的侵袭性生物学行为相关[1],在不同肿瘤或者同种肿瘤的不同阶段具有差异性表达,推测肿瘤细胞会根据特定的遗传背景选择性激活或抑制STAT1的表达[2]。本文对STAT1在乳腺癌中主要的促癌和抑癌功能及其机制进行概述。 展开更多
关键词 stat1 乳腺癌 转录激活因子 作用机制
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麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘大鼠IL-6/STAT3信号通路及TRPV1感受器的影响
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作者 杨倩 江波 +3 位作者 孙勤国 吕琨 罗蒙 黄天慧 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第3期729-735,共7页
【目的】探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘(CVA)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,麻杏石甘汤低、高剂量组,麻杏石甘汤高剂量+信号转导和转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin(Col)组,每组12只。除正常组... 【目的】探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘(CVA)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,麻杏石甘汤低、高剂量组,麻杏石甘汤高剂量+信号转导和转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin(Col)组,每组12只。除正常组外,其他各组大鼠采用腹腔注射卵清蛋白结合艾条熏蒸法构建CVA模型。对应治疗后,观察大鼠体征和咳嗽次数,肺功能仪检测气道阻力(RE),Diff-Quik染色计数嗜酸性粒细胞(EOS),苏木素-伊红(HE)染色法观察肺、支气管组织病理学特征,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测肺组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western Blot法检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、STAT3、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠出现明显哮喘症状,肺组织可见炎性细胞浸润严重,支气管上皮细胞坏死、纤毛粘连、黏液多,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量,以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,麻杏石甘汤低、高剂量组大鼠哮喘症状明显改善,肺及支气管损伤减轻,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05);与麻杏石甘汤高剂量组比较,麻杏石甘汤高剂量+Col组大鼠哮喘加重,肺及支气管损伤加重,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平升高(P<0.05)。【结论】麻杏石甘汤可有效改善CVA大鼠症状,其机制与抑制IL-6/STAT3信号通路及TRPV1高表达有关。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 咳嗽变异型哮喘 白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(stat3)信号通路 瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1) 大鼠
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转录因子NF-κB家族、STAT1、ELK1核表达与HPV16阳性宫颈癌发生发展的相关性及其预后意义 被引量:5
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作者 许珂 于瑞梅 +3 位作者 刘天齐 莫哲伦 容雁 刘婵桢 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2020年第5期353-359,共7页
目的:探讨转录因子NF-κB家族、STAT1、ELK1在HPV16阳性宫颈癌中的核表达及其与宫颈癌发生、发展的关系,并分析其临床预后意义。方法:免疫组化法检测NF-κB家族、STAT1、ELK1在HPV16阳性的116例宫颈癌、26例HSIL、12例LSIL、24例正常宫... 目的:探讨转录因子NF-κB家族、STAT1、ELK1在HPV16阳性宫颈癌中的核表达及其与宫颈癌发生、发展的关系,并分析其临床预后意义。方法:免疫组化法检测NF-κB家族、STAT1、ELK1在HPV16阳性的116例宫颈癌、26例HSIL、12例LSIL、24例正常宫颈组织及高危型HPV阴性的10例LSIL、27例正常宫颈组织中的核表达水平,比较不同HPV感染状态、各种类型宫颈组织中各转录因子的核表达差异,分析其与宫颈癌发生发展的相关性及其临床预后意义。结果:NF-κB家族成员c-Rel、p65、p50的核阳性表达率与宫颈病变程度呈正相关,STAT1的核阳性表达率与宫颈病变程度呈负相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELK1在正常宫颈组织中表达较低,在各组宫颈病变组织中表达无统计学差异(P=0.210)。HPV16早期感染组的c-Rel和p65阳性表达率明显高于正常对照组(P<0.05);晚期感染组的NF-κB p50阳性表达率明显高于早期感染组(P<0.05),c-Rel在晚期感染组也有显著升高(P<0.05);晚期感染组的STAT1阳性表达率明显低于早期感染组(P<0.05)。Logistic回归分析示,c-Rel、p65核表达与宫颈癌发生相关(P<0.05),而c-Rel、p50、STAT1核表达则与宫颈癌发展相关(P<0.05)。宫颈癌中NF-κB家族各成员核表达呈正相关(P<0.05),而p65、p50与STAT1核表达呈负相关(P<0.05)。c-Rel、p65分别与宫颈癌患者脉管浸润、宫旁浸润有关(P<0.05)。生存分析示,p65、STAT1与宫颈癌患者生存预后相关,高p65核表达、无STAT1核表达者总体生存率较低(P<0.05)。结论:各转录因子分别在宫颈癌发生发展的不同时期参与下游基因的调控,c-Rel、p65与宫颈癌发生相关,而c-Rel、p50、STAT1与宫颈癌发展相关。p65、STAT1可作为HPV16阳性宫颈癌预后预测因子。 展开更多
关键词 转录因子 HPV16 宫颈癌 NF-κB stat1 ELK1 预后 miRNA
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类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究 被引量:8
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作者 罗婷婷 严爱芬 +6 位作者 刘连 蒋泓 冯翠兰 刘冠男 刘芳 唐冬生 周天鸿 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期229-239,共11页
目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion regi... 目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。 展开更多
关键词 转录激活因子效应物核酸酶 E-钙黏蛋白 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1 基因打靶 鼻咽癌
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转录因子STAT1两个亚型STAT1α和STAT1β高表达载体的构建及鉴定
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作者 李靖 伊静 +10 位作者 蓝茜 李玥 刘莉 梁栋 杜小娟 武丽涛 闫小飞 杨旭东 张富军 吕社民 李冬民 《国外医学(医学地理分册)》 CAS 2016年第1期49-53,共5页
目的利用高表达载体pLJM1-EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒(简称为pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β)。方法以大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段(即STAT1α和STAT1β);用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切p... 目的利用高表达载体pLJM1-EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒(简称为pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β)。方法以大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段(即STAT1α和STAT1β);用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切pLJM1-EGFP表达载体和PCR扩增的STAT1α和STAT1β基因片段后,用T4DNA连接酶连接酶切纯化后的载体及目的基因片段;将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞、挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切和DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β重组载体中分别成功插入了STAT1α和STAT1β基因片段。DNA测序结果表明插入的STAT1α和STAT1β基因片段的序列完全正确。结论成功构建了pLJM1-STAT1α和pLJM1-STAT1β高表达重组载体。 展开更多
关键词 转录因子stat1 stat1α stat1β pLJM1-EGFP表达载体
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下调miR-106a-5p对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤及JAK1/STAT3通路的影响 被引量:2
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作者 姜花 沈延梅 马驯凯 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期113-117,共5页
目的 探讨下调miR-106a-5p对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤及Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法 不同浓度梯度H2O2(0、50、100、200、400μmol/L)处理大鼠心肌细胞H9c2。H9c2细胞分为对照组、H2O2组... 目的 探讨下调miR-106a-5p对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤及Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法 不同浓度梯度H2O2(0、50、100、200、400μmol/L)处理大鼠心肌细胞H9c2。H9c2细胞分为对照组、H2O2组(100μmol/L H_(2)O_(2))、miR-106a-5p NC组(100μmol/L H_(2)O_(2)+转染miR-106a-5p NC)和miR-106a-5p siRNA组(100μmol/L H_(2)O_(2)+转染miR-106a-5p siRNA)。实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-106a-5p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白免疫印迹法检测细胞中JAK1/STAT3通路相关蛋白表达。结果 根据H_(2)O_(2)浓度梯度实验,选择100μmol/L H_(2)O_(2)用于后续实验。与对照组相比,H2O2组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中miR-106a-5p水平、MDA含量、p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3及细胞培养液中LDH含量显著升高(P<0.05),细胞培养液GSH-Px活性及细胞中SOD活性显著降低(P<0.05);上述指标在H2O2组与miR-106a-5p NC组间的差异无统计学意义(P>0.05);与miR-106a-5p NC组相比,miR-106a-5p siRNA组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中miR-106a-5p水平、MDA含量、p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3及细胞培养液中LDH含量显著降低(P<0.05),细胞培养液GSH-Px活性及细胞中SOD活性显著升高(P<0.05)。结论 下调miR-106a-5p可抑制JAK1/STAT3通路激活,提高抗氧化应激水平,减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 肌细胞 心脏 过氧化氢 微RNAS Janus激酶1 stat3转录因子 氧化性应激
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锌指转录因子Snail1在糖尿病大鼠肾组织中的表达 被引量:11
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作者 方开云 娄晶磊 +4 位作者 肖瑛 石明隽 桂华珍 郭兵 张国忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期737-742,共6页
目的:观察锌指转录因子Snail1在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其与糖尿病肾病(DN)发生、发展的关系。方法:链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16、20、24周以及16周A、20周A和24周A组,其中A组动物从第13周起用胰岛... 目的:观察锌指转录因子Snail1在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其与糖尿病肾病(DN)发生、发展的关系。方法:链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16、20、24周以及16周A、20周A和24周A组,其中A组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,每个时点均设鼠龄匹配的正常对照组。测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、肾脏指数。PAS染色光镜观察肾脏病理改变。免疫组化、RT-PCR方法检测肾皮质Snail1和纤连蛋白(FN)的蛋白及mRNA水平,Western blotting检测Snail1蛋白表达。结果:DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),A组上述指标均明显低于DM组(P<0.05,P<0.01)。Snail1免疫组化阳性染色见于各组DM大鼠肾小管,正常对照组未见阳性表达,A组见弱阳性表达,并随治疗时间延长而减少。DM组肾皮质Snail1、FN蛋白和mRNA的表达水平高于正常对照组(P<0.01),而A组显著低于DM组(P<0.01)。Snail1与FN mRNA的表达水平呈显著正相关(P<0.01),Snail1蛋白表达水平与血糖、尿蛋白、血肌酐、肾脏指数亦呈正相关(P<0.01)。结论:Snail1基因和蛋白在DM大鼠肾组织过度表达,提示Snail1可能参与了DN的发生、发展机制。 展开更多
关键词 转录因子SNAIL 1 纤连蛋白 糖尿病肾病 大鼠
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STAT3介导了血小板源性生长因子BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞Pim-1表达 被引量:5
10
作者 孙晓东 王燕 +1 位作者 王汉琴 黄铁柱 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期804-809,共6页
目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时... 目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时间刺激体外培养的VSMCs,用细胞计数法检测增殖;用re-al-time RT-PCR检测Pim-1 mRNA表达水平;Western blotting检测STAT3的活性变化;用放线菌素D(actinomycinD)、AG490(JAK特异性抑制剂)及siRNA沉默Pim-1和STAT3进行干预。结果:PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs24 h,可以诱导细胞增殖,Pim-1沉默抑制了这一过程;正常未经处理的VSMCs Pim-1 mRNA表达量较低,不同浓度PDGF-BB(10μg/L~50μg/L)作用VSMCs 1 h,Pim-1 mRNA表达明显增加,其中以20μg/L最显著;用PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs不同时间(0.5 h~4 h),可显著上调Pim-1 mRNA表达,以0.5 h最显著。用actinomycin D及AG490预处理后Pim-1 mRNA表达随之降低。PDGF-BB可激活VSMCs中磷酸化STAT3水平,AG490和转染STAT3-siRNA可抑制STAT3的磷酸化以及相应的Pim-1 mRNA表达。结论:PDGF-BB可通过Pim-1调节VSMCs增殖;STAT3可能参与了PDGF-BB诱导的VSMCs Pim-1表达。 展开更多
关键词 Pim-1蛋白 stat3转录因子 血管平滑肌细胞 RNA干扰 血小板源性生长因子BB
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类风关巴布剂穴位贴敷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜细胞核转录因子-κ β表达的影响 被引量:2
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作者 叶天申 邹贤斐 +3 位作者 金可可 朱小春 林向阳 陈勇 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2008年第7期27-29,共3页
目的比较不同组合穴位贴敷类风关巴布剂对牛Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞核转录因子-κβ(NF-κβ)表达的影响。方法大鼠背部5处皮内注射牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎,观察以雷公藤为主的中药类风关巴布剂不同组合穴位贴敷对模型... 目的比较不同组合穴位贴敷类风关巴布剂对牛Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞核转录因子-κβ(NF-κβ)表达的影响。方法大鼠背部5处皮内注射牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎,观察以雷公藤为主的中药类风关巴布剂不同组合穴位贴敷对模型大鼠免疫组化指标NF-κβ计分,以及滑膜细胞上清液的白细胞介素-1β(IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。结果类风关巴布剂治疗后,各穴位贴敷组大鼠的NF-κβ计分较模型组降低,其中系统组(远近配穴)最接近正常组;各组滑膜浸液中IL-1β、TNF-α浓度降低。结论类风关巴布剂穴位贴敷能够降低CIA大鼠滑膜细胞的NF-κβ的蛋白表达,并降低相关细胞因子的浓度,抑制正反馈效应;远近配穴可能通过标本兼治,多靶点起效,使其整体疗效优于单纯远道取穴或局部取穴。 展开更多
关键词 关节炎 风关巴布剂 大鼠 转录因子-κβ 肿瘤坏死因子 白细胞介素-1Β
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心肌营养素-1诱导大鼠心肌细胞肥大与JAK激酶/信号转导转录活化因子信号通路的关系 被引量:3
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作者 武利军 赵连友 +4 位作者 郑强荪 陈永清 王先梅 牛晓琳 黄志刚 《高血压杂志》 CSCD 北大核心 2006年第3期206-209,共4页
目的研究心肌营养素1(CT1)对培养大鼠心肌细胞肥大的诱导作用,探讨细胞因子信号途径JAK激酶/信号转导转录活化因子(JAKSTAT)与CT1诱导心肌细胞肥大的关系。方法以培养的新生SpragueDawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组、CT1刺... 目的研究心肌营养素1(CT1)对培养大鼠心肌细胞肥大的诱导作用,探讨细胞因子信号途径JAK激酶/信号转导转录活化因子(JAKSTAT)与CT1诱导心肌细胞肥大的关系。方法以培养的新生SpragueDawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组、CT1刺激组(10ng/mL)、JAK2拮抗剂AG490(10μmol/L)干预组。应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RTPCR和蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测JAKSTAT的mRNA和蛋白表达水平。结果(1)CT1组心肌细胞表面积(1664.7±152.3)μm2明显高于对照组(621.1±90.2)μm2,P<0.01,AG490干预后心肌细胞面积(862.9±158.1)μm2明显减小,与CT1组比较,P<0.01。(2)CT1组心肌细胞[3H]亮氨酸掺入率(2388±72)计数/(min·孔)高于对照组(1353±81)计数/(min·孔),P<0.01,AG490组[3H]亮氨酸掺入率(1693±59)计数/(min·孔)明显下降,与CT1组比较,P<0.01。(3)CT1组心肌细胞ANP的mRNA表达水平(0.61±0.03)明显增强,与对照组(0.23±0.02)比较,P<0.01,经AG490干预后ANP的mRNA表达水平(0.29±0.02)明显下降,和CT1组相比,P<0.01。(4)CT1刺激后心肌细胞JAKSTAT的mRNA和蛋白表达水平显著增强(P<0.01),在AG490干预后JAKSTAT的mRNA和蛋白表达明显减弱,与CT1组比较,P<0.05。结论CT1有明显的促心肌细胞肥大效应,细胞因子信号通路JAKSTAT活化参与了这一过程,并可能是心肌细胞肥大的分子生物学机制之一。 展开更多
关键词 心肌营养素-1 心肌细胞 肥大 JAK—stat 信号转导转录活化因子 信号通路 分子生物学
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玉米转录因子ZmERF1的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 史庆玲 董永彬 +4 位作者 周强 马智艳 乔大河 邓飞 李玉玲 《生物技术进展》 2017年第1期38-42,J0002,共6页
ERF类转录因子是乙烯信号转导途径中的下游响应因子,参与乙烯调控的多种生理生化反应。从玉米自交系丹232授粉后20 d的胚乳中克隆了一个ERF类转录因子ZmERF1,并对其进行了序列及表达分析。结果显示,ZmERF1基因全长811 bp,ORF 690 bp,编... ERF类转录因子是乙烯信号转导途径中的下游响应因子,参与乙烯调控的多种生理生化反应。从玉米自交系丹232授粉后20 d的胚乳中克隆了一个ERF类转录因子ZmERF1,并对其进行了序列及表达分析。结果显示,ZmERF1基因全长811 bp,ORF 690 bp,编码230个氨基酸,包含一个典型的AP2结构域,含有3个α-helix和1个β-sheets,亚细胞定位于细胞核中。进化树分析表明该基因与单子叶高粱SbERF和水稻Os ERF同源性较高。在体外原核表达系统中能够检测到重组蛋白His-ZmERF1,并用Western Blot验证了所表达蛋白为重组蛋白,表明该基因具有体外活性。荧光定量PCR分析表明该基因在胚乳发育的前期表达量较少,后期(36 d)表达量较高。进一步对胚乳总蛋白的定量Western Blot分析,表明该蛋白在胚乳发育后期积累量高于发育前期。因此,初步推测玉米ZmERF1可能在籽粒胚乳发育后期发挥重要作用。该研究结果为了解该基因家族转录因子并进一步阐明其生物学功能提供了依据。 展开更多
关键词 AP2/EREBP转录因子 ZmERF1 荧光定量PCR WESTERN BLOT
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沉默信息调节因子1对脂类代谢的调控作用 被引量:2
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作者 吴铁梅 闫素梅 格日乐玛 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1285-1293,共9页
沉默信息调节因子1(SIRT1)通过脱乙酰作用能抑制脂肪生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)的转录活性,从而抑制脂肪细胞分化,降低脂肪沉积,促进脂肪动员。SIRT1通过调节脂类代谢相关的... 沉默信息调节因子1(SIRT1)通过脱乙酰作用能抑制脂肪生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)的转录活性,从而抑制脂肪细胞分化,降低脂肪沉积,促进脂肪动员。SIRT1通过调节脂类代谢相关的信号通路SIRT1-腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和SIRT1-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)减少脂肪合成,加快脂肪分解,降低脂肪的沉积量。本文主要综述了SRIT1通过相关转录因子与信号通路对动物脂类代谢的调节作用,为进一步研究动物的脂类代谢及改善肉品质提供依据。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子1 代谢 转录因子 信号通路
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BMAL1减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤机制研究 被引量:1
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作者 易娜 肖雯 +1 位作者 田源 袁李礼 《天津医药》 CAS 2024年第2期119-123,共5页
目的探讨脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白的类似蛋白1(BMAL1)通过核因子E2相关因子2(NRF2)调节活性氧(ROS)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响。方法体外培养H9c2细... 目的探讨脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白的类似蛋白1(BMAL1)通过核因子E2相关因子2(NRF2)调节活性氧(ROS)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响。方法体外培养H9c2细胞和BMAL1稳定过表达的H9c2细胞,建立H_(2)O_(2)诱导的H9c2细胞损伤模型,并将细胞分为对照(Control)组、H_(2)O_(2)组、BMAL1过表达(BMAL1-OE)组、BMAL1过表达+H_(2)O_(2)(BMAL1-OE+H_(2)O_(2))组、BMAL1过表达+NRF2抑制剂(BMAL1-OE+ML385)组、BMAL1过表达+NRF2抑制剂+H_(2)O_(2)(BMAL1-OE+ML385+H_(2)O_(2))组。采用CCK-8法检测细胞活力,荧光探针2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯检测ROS生成,Western blot检测BMAL1、NRF2和NLRP3蛋白表达,酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素(IL)-1β释放。结果与Control组相比,H_(2)O_(2)组H9c2心肌细胞活力减弱,ROS生成增多,BMAL1和NRF2蛋白表达水平降低,NLRP3蛋白表达水平升高,IL-1β释放增多(P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,BMAL1-OE+H_(2)O_(2)组H9c2心肌细胞活力升高,ROS生成减少,BMAL1和NRF2蛋白表达水平升高,NLRP3蛋白表达水平降低,IL-1β释放减少(P<0.05)。与BMAL1-OE+H_(2)O_(2)组相比,BMAL1-OE+ML385+H_(2)O_(2)组H9c2心肌细胞活力减弱,ROS生成增多,NLRP3蛋白表达水平升高,IL-1β释放增多(P<0.05)。结论BMAL1可减轻H_(2)O_(2)诱导的H9c2心肌细胞损伤,其机制可能与NRF2调节ROS/NLRP3炎症小体通路有关。 展开更多
关键词 ARNTL转录因子 NF-E2相关因子2 活性氧 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白的似蛋白1 炎症小体
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信号转导和转录活化因子-1在上皮性卵巢癌中的表达及其与预后的关系 被引量:1
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作者 沈怡 LASSMANN S +3 位作者 HASENBURG A GERALD G MARTIN W 王泽华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期772-776,共5页
目的:探讨信号转导和转录活化因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)-1在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:应用显微切割法从石蜡切片标本中提取mRNA,实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic qu... 目的:探讨信号转导和转录活化因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)-1在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:应用显微切割法从石蜡切片标本中提取mRNA,实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)和免疫组织化学方法检测105例原发性卵巢上皮癌和29例正常卵巢组织中STAT-1 mRNA及蛋白的表达,并分析其蛋白表达与预后的相关性。结果:上皮性卵巢癌组织中STAT-1 mRNA的表达高于正常卵巢组织[(0.96±1.05)vs(0.46±0.57),P=0.032],但mRNA表达水平与卵巢癌的手术分期、病理分级以及生存时间无关(P>0.05);上皮性卵巢癌组织中STAT-1和P-STAT-1蛋白的阳性表达率分别为72.4%和71.9%,显著高于正常卵巢组织(P<0.05),但蛋白表达水平与病理分级和手术分期无明显相关性(P>0.05)。在行辅助泰素化疗的病例组中STAT-1和P-STAT-1蛋白高表达患者的预后较好,总的生存时间长于低表达患者(P<0.05);STAT-1蛋白高表达的卵巢癌患者无瘤生存时间明显长于低表达患者(P<0.01)。结论:STAT-1在上皮性卵巢癌中存在异常表达,与紫杉醇类药物化疗后的预后密切相关。STAT-1可能是抑制肿瘤细胞生长的关键因子之一。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 stat1转录因子 芯片分析技术 预后
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信号转导和转录激活因子3及小凹蛋白1在X射线诱导肺腺癌A549细胞早衰中的调控关系研究 被引量:1
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作者 马丽萍 丁春燕 +2 位作者 田梅 刘青杰 高玲 《中国医学装备》 2021年第3期1-5,共5页
目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)和小凹蛋白1(Cav-1)在X射线诱导A549细胞早衰过程中的调控关系,完善X射线诱导A549细胞早衰的分子机制。方法:利用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同肿瘤细胞A875、BGC-823、A549细胞和正常... 目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)和小凹蛋白1(Cav-1)在X射线诱导A549细胞早衰过程中的调控关系,完善X射线诱导A549细胞早衰的分子机制。方法:利用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同肿瘤细胞A875、BGC-823、A549细胞和正常细胞株Hacat细胞中STAT3和Cav-1蛋白表达水平,并检测X射线照射和STAT3过表达及抑制剂处理后A549细胞中p53蛋白、Cav-1蛋白表达水平。结果:肿瘤细胞A875、BGC-823、A549细胞及正常细胞Hacat细胞中STAT3、Cav-1蛋白呈现阳性表达;X射线照射A549细胞后p53蛋白表达增加,STAT3过表达及活化可引起p53蛋白表达水平升高,同时抑制Cav-1蛋白的表达。结论:X射线诱导的A549细胞p53蛋白早衰通路部分依赖于STAT3激活,STAT3负向调控Cav-1蛋白表达。 展开更多
关键词 X射线 细胞早衰 信号转导和转录激活因子3(stat3) P53蛋白 小凹蛋白1(Cav-1)
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灵长类动物限制性因子SAMHD1的生物学功能分析 被引量:1
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作者 李爽 郭浩然 魏伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期484-490,I0001,共8页
目的:探讨不同灵长类动物限制因子不育-α-基序结构域和组氨酸/天冬氨酸残基双联体结构域包涵蛋白1 (SAMHD1)的抗病毒、抑制逆转录转座子LINE-1和减弱干扰素(IFN)产生信号通路等作用,为灵长类动物SAMHD1的研究提供依据。方法:构建稳定... 目的:探讨不同灵长类动物限制因子不育-α-基序结构域和组氨酸/天冬氨酸残基双联体结构域包涵蛋白1 (SAMHD1)的抗病毒、抑制逆转录转座子LINE-1和减弱干扰素(IFN)产生信号通路等作用,为灵长类动物SAMHD1的研究提供依据。方法:构建稳定表达不同灵长类动物SAMHD1蛋白的U937细胞系,以空载体构建的细胞作为阴性对照组,以稳定表达不同灵长类动物SAMHD1蛋白的U937细胞系为实验组。经佛波酯(PMA)刺激分化成巨噬样细胞后,流式细胞术分析各组HIV-1病毒感染率。以单独转染SAMHD1表达质粒的HEK293T细胞为对照组,共同转染SAMHD1与HIV-2/SIV Vpx表达质粒的细胞为实验组,转染后48h收获细胞,采用Western blotting法检测SAMHD1蛋白表达水平,免疫荧光检测法观察不同SAMHD1蛋白的细胞内定位。以单独转染LINE-1-GFP报告质粒的HEK293T细胞作为对照组,以共同转染LINE-1-GFP与SAMHD1表达质粒的细胞为实验组,采用流式细胞术检测GFP阳性细胞率,代表SAMHD1对LINE-1转座子的活性。以单独转染IFN-luc报告质粒的HEK293T细胞为对照组,共同转染IFN-luc和SAMHD1表达质粒的细胞为实验组,采用化学发光仪检测HEK293T细胞中荧光素酶的表达水平。结果:与阴性对照组比较,灵长类动物SAMHD1稳定表达的实验组HIV-1病毒感染率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,实验组灵长类动物SAMHD1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光检测,灵长类动物SAMHD1蛋白均定位于细胞核中。与对照组比较,实验组GFP阳性细胞率明显降低,即SAMHD1对LINE-1转座子活性降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,实验组灵长类动物HEK293T细胞中荧光素酶表达水平明显降低(P<0.05)。结论:不同灵长类动物SAMHD1蛋白具有抵抗HIV-1病毒感染、抑制逆转录转座子LINE-1以及拮抗天然免疫系统产生IFN的作用。 展开更多
关键词 灵长动物 限制因子 不育-α-基序结构域和组氨酸/天冬氨酸残基双联体结构域包涵蛋白1 转录病毒 转录转座子 VPX
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固本防哮饮对信号转导及转录激活因子1及哮喘易感基因ORMDL3的影响 被引量:3
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作者 董盈妹 王爱华 +3 位作者 陆远 凌昊 刘亚南 赵霞 《中国中医急症》 2016年第5期762-765,845,共5页
目的观察固本防哮饮对信号转导和转录因子1(STAT1)及哮喘易感基因血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)的调控作用,分析其防治哮喘机制。方法利用白介素-4诱导人支气管上皮细胞建立哮喘细胞模型,固本防哮饮含药血清对其进行干预,采用实时荧光定... 目的观察固本防哮饮对信号转导和转录因子1(STAT1)及哮喘易感基因血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)的调控作用,分析其防治哮喘机制。方法利用白介素-4诱导人支气管上皮细胞建立哮喘细胞模型,固本防哮饮含药血清对其进行干预,采用实时荧光定量-PCR(Real Time PCR)、免疫印迹法(Western blotting,WB)、免疫荧光法(IF)分别从基因、蛋白水平检测细胞中ORMDL3和STAT1的表达及亚细胞定位。结果与正常组比较,模型组ORMDL3、STAT1 m RNA含量升高,但差异无统计学意义(P>0.05),固本防哮饮可降低模型组细胞ORMDL3、STAT1 m RNA水平,差异无统计学意义(P>0.05);与正常组比较,模型组ORMDL3、STAT1蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01),与模型组相比,固本防哮饮组ORMDL3及STAT1蛋白表达均显著(P<0.05)。结论固本防哮饮对STAT1及ORMDL3的表达有一定的调控作用,可能为固本防哮饮防治哮喘的内在机制。 展开更多
关键词 固本防哮饮 哮喘 易感基因 血清黏蛋白1样蛋白3 信号转导和转录因子1
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转录调节因子Ets-1及MMPs在结直肠癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 贾新立 黄韵红 何常 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第48期53-54,共2页
目的探讨转录调节因子Ets-1、基质金属蛋白酶(MMPs)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测转录调节因子Ets-1、MMP-1、MMP-3在结直肠癌、大肠腺瘤及腺瘤伴异型增生组织中的表达。结果Ets-1、MMP-1与MMP-3蛋白在大... 目的探讨转录调节因子Ets-1、基质金属蛋白酶(MMPs)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测转录调节因子Ets-1、MMP-1、MMP-3在结直肠癌、大肠腺瘤及腺瘤伴异型增生组织中的表达。结果Ets-1、MMP-1与MMP-3蛋白在大肠腺瘤、大肠腺瘤伴腺上皮异型增生及大肠癌组织中的阳性表达率依次递增。Ets-1、MMP-1、MMP-3高表达与1、3、5 a生存率呈负相关。Ets-1与MMP-1、MMP-3的表达呈正相关。结论Ets-1、MMP1、MMP3在大肠癌的发生、发展、浸润及转移中发挥重要作用,与大肠癌患者的预后有关。 展开更多
关键词 直肠肿瘤 结肠肿瘤 转录调节因子 ETS-1 基质金属蛋白酶 预后
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