JAK2/STAT3信号转导通路与男性不育IVF-ET/ICSI-ET妊娠结局的关系及预测价值

目的分析Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号转导通路与男性不育体外受精-胚胎移植/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF-ET/ICSI-ET)妊娠结局的关系及预测价值。方法选取2022年10月至2023年10月成都市锦江区妇幼保健院收治的105例男性不育患者作为研究对象,根据IVF-ET/ICSI-ET临床妊娠结局分为成功组(n=79)和未成功组(n=26)。比较两组基线资料、JAK2/STAT3信号转导通路指标,采用Logistic回归模型分析患者IVF-ET/ICSI-ET结局,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果未成功组前向运动精子总数、正常形态精子百分率均低于成功组(P<0.05)。未成功组JAK2、STAT3蛋白表达量均低于成功组(P<0.05)。前向运动精子总数、正常形态精子百分率、JAK2、STAT3均为男性不育患者IVF-ET/ICSI-ET结局成功的保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,联合预测因子预测男性不育患者IVF-ET/ICSI-ET结局成功的曲线下面积大于各协变量(P<0.05)。结论前向运动精子总数、正常形态精子百分率、JAK2和STAT3与男性不育IVF-ET/ICSI-ET临床妊娠结局密切相关,且联合预测效能较高。

淡豆豉异黄酮对增殖血管平滑肌细胞JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的探讨淡豆豉异黄酮对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖及Janus激酶2-细胞信号转导及转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法建立AngⅡ诱导VSMC增殖模型,MTT法检测VSMC增殖活性;RT-PCR法检测AngⅡ1型受体(angiotensin Ⅱreceptor1,AT1R)mRNA表达;Westernblot法检测JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2,STAT3及其磷酸化表达水平。结果100、200μg·L-1淡豆豉异黄酮可明显抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,并明显下调AT1R mRNA表达水平;200μg·L-1淡豆豉异黄酮可明显下调磷酸化JAK2、磷酸化STAT3的表达。结论淡豆豉异黄酮可抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,其机制可能与下调AT1R表达,阻断JAK2/STAT3信号通路的磷酸化有关。

JAK2/STAT3信号转导通路在大鼠急性脊髓损伤中对细胞凋亡的调控作用

目的研究P-JAK2(磷酸化Janus激酶2)、P-STAT3(磷酸化信号转导和转录激活子3)以及Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)中的表达变化,并探讨相互作用。方法采用健康成年雄性SD大鼠90只,体重225～275g,分为对照组(n=30)、脊髓损伤组(n=30)和AG-490(JAK2酶抑制剂)+脊髓损伤组(n=30),随机分到4h、12h、24h、72h和168h各个亚组(n=6)。应用Allen’s重物坠落法并加改良制作大鼠急性脊髓损伤模型,对照组只切除椎板不损伤脊髓。术后在相应时间点处死,HE染色观察组织形态结构,免疫组织化学检测P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的表达变化。结果成功建立大鼠ASCI模型并获得满意脊髓组织标本。HE染色示脊髓组织损伤严重阶段出现在ASCI后72h,而不是损伤即刻。免疫组织化学检测显示对照组大鼠脊髓组织中P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3阳性细胞较少,在脊髓损伤组各个时间点P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的表达量明显高于对照组(P<0.01)。P-JAK2、P-STAT3在脊髓损伤后4h迅速上升,12h达峰值,而后逐渐下降,168h仍有表达。Caspase-3在脊髓损伤后4h迅速上升,72h达峰值,而后下降。AG-490+脊髓损伤组P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的阳性表达低于脊髓损伤组(P<0.01),但峰值不变。结论 ASCI可异常激活JAK2/STAT3信号转到通路,它可能对继发性脊髓损伤中细胞凋亡有着重要调控作用。

PPARγ激动剂吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的观察过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxisome proliferators activated receptor gamma,PPARγ)激动剂吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其对大鼠内源性酪氨酸激酶2(janus kinase2,JAK2)/信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号转导通路的影响,并对其作用机制进行探讨。方法采用改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。分为假手术组、缺血再灌注组、生理盐水干预组、吡格列酮干预组。分别采用神经功能评分法观察大鼠行为学评分的变化,HE染色观察大鼠脑组织损伤情况变化,western-blotting观察大鼠缺血半暗带区P-JAK2、P-STAT3表达的改变。结果PPARγ激动剂能够减少缺血再灌注损伤大鼠行为学评分,假手术组:0,模型组:(2.3±0.98),生理盐水干预组:(2.4±0.99),吡格列酮15 mg/kg组:(1.5±0.69)(P<0.05);减轻脑细胞坏死程度;降低缺血半暗带区P-JAK2、P-STAT3的表达,两种蛋白分别为假手术组:0、0,模型组:(0.89±0.06)、(0.27±0.03),生理盐水干预组:(0.88±0.05)、(0.28±0.04),吡格列酮15 mg/kg组:(0.23±0.04)、(0.10±0.02)(P<0.05)。结论PPARγ激动剂对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制与下调JAK2/STAT3信号转导通路有关。

白藜芦醇调控白血病JAK1/STAT3信号转导通路的研究

本研究探讨白藜芦醇抗白血病作用的具体分子机制。采用细胞体外培养和免疫组织化学、免疫沉淀法检测白血病细胞L1210 p-JAK1、p-STAT3蛋白的表达;建立了L1210白血病腹水瘤小鼠模型,用Western blot、免疫组织化学测定信号转导分子p-JAK1及p-STAT3的活性。结果表明:白藜芦醇能明显抑制JAK1/STAT3信号转导通路,以时间-剂量依赖的方式下调p-JAK1、p-STAT3表达,减弱JAK1和STAT3的酪氨酸磷酸化活性。结论:白藜芦醇体内外均具能明显调控白血病JAK1/STAT3信号转导通路,发挥抗白血病作用。

丁苯酞氯化钠注射液联合胞磷胆碱钠注射液对老年脑梗死患者神经功能及JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的:探讨丁苯酞氯化钠注射液联合胞磷胆碱钠注射液对老年脑梗死(cerebral infarction,CI)患者神经功能及JAK2/STAT3信号转导通路的影响。方法:选取2017年3月至2019年5月中国人民解放军联勤保障部队第九○九医院收治的老年CI患者60例,采用简单随机化分组方法分为观察组和对照组,每组30例。两组患者均给予常规治疗,在此基础上,对照组患者给予胞磷胆碱钠注射液治疗,观察组患者给予丁苯酞氯化钠注射液联合胞磷胆碱钠注射液治疗。观察两组患者临床疗效,治疗前后神经功能[美国国立卫生院卒中神经功能缺损评分量表(national institutes of health stroke scale,NIHSS)评分]、日常生活能力(Barthel指数)及血液流变学指标变化,血清脑源性神经营养因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)及JAK2/STAT3信号转导通路相关蛋白表达水平。结果:观察组患者的总有效率为90.00%(27/30),明显高于对照组的66.67%(20/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者NIHSS评分明显低于对照组,Barthel指数明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者血浆黏度、全血黏度、血小板聚集率及纤维蛋白原水平明显低于对照组,血清BDNF、NGF、GSH-Px及T-AOC水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者JAK2、P-JAK2及P-STAT3表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:丁苯酞氯化钠注射液联合胞磷胆碱钠注射液治疗老年CI的疗效显著,能有效改善患者神经功能,提高日常生活能力,可能与该方案能进一步改善血液流变学、缓解氧化应激反应及提高脑保护效果有关。

STAT3信号转导通路及肿瘤治疗的方法

STAT3是一类由750800个氨基酸组成的DNA结合蛋白，有泖三种亚型，它因可介导细胞的恶性转化而被确认为癌基因，STAT3在早期胚胎发育和骨髓细胞的分化中发挥着不可缺少的重要作用，此外它还参与了肿瘤的增殖、分化、血管生成、侵袭转移和免疫逃避等生理功能的调控。与STAT3相关的几条信号转导通路特别是Jak—STAT3信号转导通路在多种肿瘤细胞中均有激活，体内外阻断或抑制肿瘤细胞中STAT3的信号通路可抑制细胞恶性增殖和存活，并诱导细胞凋亡，而对正常细胞却无影响。

PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在SO_2抗大鼠肢体缺血再灌注致急性肺损伤中的作用

目的:探讨PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在二氧化硫(SO2)抗肢体缺血再灌注(I/R)致急性肺损伤中的作用。方法:应用双大腿根部绑扎止血带复制大鼠双后肢缺血再灌注肺损伤模型。在再灌注前20 min腹腔注射Na2SO3/Na HSO3;在再灌注前1 h静脉注射Stattic或LY294002。应用TUNEL、ELISA、Western blot等方法检测细胞凋亡、细胞因子表达及相关信号通路蛋白表达的情况。结果:与对照组相比,I/R组的MDA及MPO含量、肺系数、细胞凋亡指数、细胞因子表达以及p-STAT3、p-Akt蛋白的水平均显著增高;当应用Na2SO3/Na HSO3后,上述反映肺损伤的各项指标均下降。Western blot检测结果显示I/R后,肺组织中p-STAT3和p-Akt蛋白的水平均明显增加。而应用Na2SO3/Na HSO3后,p-Akt蛋白的水平继续增加,但p-STAT3蛋白的水平却减少(P<0.05)。结论:JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路都参与了SO2抗肢体缺血再灌注致急性肺损伤的作用。JAK2/STAT3通路的活化,能够使I/R损伤加重;相反,PI3K/Akt信号通路的活化,可以使I/R损伤减弱。此外,JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路之间存在交互作用。

复方甘草酸苷对小鼠实验性结肠炎NF-κB、STAT3信号转导通路的影响

背景:溃疡性结肠炎(UC)的病因、发病机制不明,且缺乏有效治愈手段。对相关信号转导通路的研究有助于了解药物干预的作用机制。目的:观察复方甘草酸苷对小鼠实验性结肠炎的治疗作用及其对NF-κB、STAT3信号转导通路的影响。方法:40只健康昆明小鼠随机分为四组,一组为正常对照组,另三组以噁唑酮诱导实验性结肠炎,随后分别腹腔注射0.9%NaCl溶液(模型对照组)、复方甘草酸苷(甘草酸苷组)或予柳氮磺砒啶(SASP)灌胃(SASP组)7 d。观察各组小鼠疾病活动指数(DAI)、结肠组织大体和组织学损伤评分以及髓过氧化物酶(MPO)活性,蛋白质印记法检测结肠黏膜NF-κB、STAT3活化水平。结果:模型对照组DAI、大体和组织学损伤评分、MPO活性以及结肠黏膜固有层单个核细胞中活化NF-κB p65、STAT3的表达均显著高于正常对照组(P<0.05),甘草酸苷组和SASP组则较模型对照组显著降低(P<0.05),甘草酸苷组与SASP组间仅DAI和组织学损伤评分有显著差异(P<0.05)。结论:复方甘草酸苷能有效改善小鼠实验性结肠炎的炎症活动水平,其作用机制可能与下调NF-κB、STAT3信号转导通路有关。

基于JAK/STAT3信号转导通路探讨黄芩苷预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察黄芩苷对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法将雄性SD大鼠给予高脂饲料后腹腔给予链脲佐菌素的方法制备糖尿病模型,造模成功后将60只大鼠均分为假手术组、缺血再灌注组、AG490组、黄芩苷组和黄芩苷+AG490组。采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。AG490组和黄芩苷组在结扎前20 min分别静脉给予AG490 1μmol/kg、黄芩苷100 mg/kg,黄芩苷+AG490组给予AG490 1μmol/kg+黄芩苷100 mg/kg,假手术组和缺血再灌注组给予等量生理盐水。恢复血流2 h后心脏取血,处死大鼠,检测心肌梗死面积、血清中LDH和CK含量以及心肌组织中JAK1、JAK2和STAT3 mRNA的水平。结果给予黄芩苷后,大鼠心肌梗死面积、血清中LDH和CK含量均降低,心肌组织中JAK1、JAK2和STAT3 mRNA相对表达水平增高;在给予了AG490干预后,大鼠心肌梗死面积、血清中LDH和CK含量均增加,心肌组织中JAK1、JAK2和STAT3 mRNA表达水平降低。结论黄芩苷能减小糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤造成的心肌梗死面积,这可能与激活JAK/STAT-3信号转导通路相关。

应用组织芯片检测食管鳞状细胞癌中Stat3信号转导通路的表达及意义

目的探讨Stat3、CyclinD1和Bcl-2三种Stat3通路上的蛋白在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生中的作用及其在早期诊断中的意义。方法制作组织芯片,包含有860例ESCC组织、198例不典型增生组织、201例单纯增生组织及467例癌旁正常上皮组织,应用免疫组化方法检测三种蛋白的表达情况。结果 (1)ESCC中三种蛋白的表达均显著高于癌旁单纯增生和正常上皮组织(P<0.05)。(2)随着ESCC分化程度由高到低,Stat3和Bcl-2蛋白的表达逐渐增强,而CyclinD1的表达逐渐减弱。(3)三种蛋白在ESCC中的表达与患者的年龄、性别、发生部位、肿瘤大小及大体分型差异无统计学意义(P>0.05),与癌组织浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。(4)ESCC中Stat3与CyclinD1的表达呈负相关(r=-0.699,P=0.000);与Bcl-2的表达呈正相关(r=0.660,P=0.000);但是CyclinD1与Bcl-2的表达无相关性。结论 Stat3、CyclinD1和Bcl-2可能在ESCC的发生发展和浸润转移中有重要的作用,CyclinD1和Bcl-2的表达检测有助于ESCC的早期诊断。

STAT3信号转导通路与肿瘤耐药研究进展

0引言转录信号传导子与激活子3（signal transducers and activators of transcription 3,STAT3）通路与细胞增殖、分化及凋亡密切相关,该通路持续激活可导致细胞异常增殖和恶性转化,因此被认为是一种癌基因。

缬沙坦和阿托法他汀对鼠血管平滑肌细胞Stat3信号转导通路的影响

目的观察缬沙坦和阿托法他汀对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）中转录信号转导子和激活子3（Stat3）信号转导通路的影响，探讨其细胞内信号转导机制。方法分别将阿托法他汀、缬沙坦及二者联合作用于大鼠VSMCs，应用MTT法检测细胞增殖状态；用流式细胞仪观察药物对细胞凋亡的影响，进一步用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测药物作用前后Stat3信号转导通路相关蛋白JAK2、Stat3的表达及磷酸化活性。结果阿托法他汀及缬沙坦都呈浓度依赖性方式抑制大鼠VSM—Cs的增殖水平，促进其凋亡，二者联合应用则具有协同作用。用阿托法他汀及缬沙坦处理VSMCs后p-JAK2、P—Stat3蛋白的表达水平随作用时间的延长而下降（P〈0．05），并且联合纽蛋白表达水平与单独处理组相比有显著性差异（P〈0．01）。结论阿托法他汀和缬沙坦对大鼠VSMCs的作用机制与Stat3信号转导通路高度相关，两者联合应用则具有协同作用，缬沙坦可加强阿托法他汀对VSMCs增殖及凋亡的影响。

右美托咪定经STAT3/FoxO3a信号转导通路对减轻H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用

目的建立大鼠心肌细胞系H9C2细胞缺氧/复氧模型,探究STAT3/FoxO3a信号转导通路在右美托咪定(Dex)保护心肌缺氧/复氧损伤中的作用。方法实验时间:2023年7月至11月,地点:香港大学深圳研究院实验室。使用对数生长期的H9C2心肌细胞进行实验,将其分为不同组别:对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组,缺氧6 h/复氧12 h)、Dex预处理后缺氧/复氧组(D组),以及添加STAT3抑制剂Stattic+Dex预处理后缺氧/复氧组(S组)。通过CCK8试剂盒检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤,丙二醛(MDA)试剂盒检测氧化应激水平,使用蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达。统计学方法采用单因素方差分析。结果H/R组H9C2细胞活力、Bcl-2和P62蛋白水平均低于C组,LDH、MDA、Bax、CC-3、LC3和Beclin-1蛋白水平均高于C组(均P<0.05)。Dex组细胞活力、P-STAT3/STAT3比值及Bcl-2、P62、FoxO3a蛋白水平均高于H/R组,LDH、MDA含量及Bax、CC-3、LC3、Beclin-1蛋白水平均低于H/R组(均P<0.05)。STAT3抑制剂可减弱Dex对心肌细胞损伤的保护作用。结论Dex预处理通过STAT3/FoxO3a信号转导通路,抑制心肌细胞的凋亡和自噬,降低氧化应激水平,减轻缺氧/复氧H9C2细胞损伤,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。

白藜芦醇通过阻断JAK激酶2/信号转导及转录活化因子3信号通路抑制食管癌细胞增殖和迁移并诱导其凋亡的作用研究

目的探究白藜芦醇对人食管癌细胞增殖、凋亡、迁移及JAK激酶2/信号转导及转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法2021年7月至2022年7月,体外培养人食管癌OE19细胞,将细胞分为对照组(不做干预)和实验组(15、30、60、90和120μmol/L白藜芦醇干预24 h)进行预实验,根据细胞计数试剂盒(CCK-8)预实验结果,筛选有显著作用且细胞活力高于50%的30、60、90μmol/L白藜芦醇进行后续的实验,后续实验又分为对照组(不做干预)、30、60、90μmol/L白藜芦醇组(30、60和90μmol/L白藜芦醇)和30μmol/L白藜芦醇+抑制剂组(30μmol/L白藜芦醇+10μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490),干预24 h。用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色、Transwell、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法对细胞增殖率、凋亡情况、迁移数及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)和JAK2/STAT3相关因子表达水平进行分析。结果不同浓度实验组的细胞活力与对照组相比逐渐降低,其中30、60、90和120μmol/L白藜芦醇差异有统计学意义(P<0.05),但120μmol/L白藜芦醇组细胞活力低于50%,所以本研究选择30、60和90μmol/L白藜芦醇继续后续实验;60μmol/L白藜芦醇组细胞增殖率(41.49±5.06)%、迁移细胞数(36.67±2.52)个显著低于对照组(53.34±1.99)%、(58.00±2.00)个,凋亡细胞数(7.67±1.53)个显著高于对照组(2.50±0.71)个,且cyclin D1、p-JAK2和p-STAT3表达量也低于对照组,caspase-3 mRNA和蛋白表达水平高于对照组(P<0.05);30、90μmol/L白藜芦醇组以上各指标与对照组比较同样如此。与30μmol/L白藜芦醇组相比,30μmol/L白藜芦醇+抑制剂组以上各指标变化更显著(P<0.05)。结论白藜芦醇可通过抑制JAK2/STAT3通路抑制人食管癌OE19细胞的增殖和迁移并诱导凋亡。

神经肌肉电刺激通过调控白细胞介素6/信号转导子及转录激活子3信号通路促进脊髓损伤后小鼠运动功能恢复

目的观察神经肌肉电刺激(NMES)对脊髓损伤后小鼠白细胞介素6(IL-6)/STAT3信号通路的影响,探讨其对运动功能恢复的机制。方法选取SPF级小鼠72只随机分成假手术(sham)组、脊髓损伤组(SCI)和NMES组。利用BMS评分、斜坡实验与电生理(EMG)评估小鼠脊髓损伤后肢体运动恢复情况。Western blotting和Real-time PCR检测各组小鼠脊髓组织中相关炎症因子、IL-6/STAT3信号通路与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。HE染色观察各组小鼠脊髓形态结构。结果NMES组BMS评分和小鼠斜坡实验均高于SCI组(P<0.05);NMES组小鼠运动诱发电位(MEP)最大振幅高于SCI组(P<0.05);NMES组脊髓组织TNF-α、IL-12A与GFAP表达量均低于SCI组(P<0.05),TGF-β、IL-10与BDNF表达量均高于SCI组(P<0.05);与SCI组相比,NMES组小鼠脊髓空洞较少,脊髓形态修复较好;与SCI组相比,NMES组IL-6/STAT3信号通路蛋白表达均低于SCI组(P<0.05)。结论神经肌肉电刺激通过抑制IL-6/STAT3信号通路发挥抗炎作用,从而促进脊髓损伤后小鼠后肢运动功能的恢复。

大承气汤通过Janus激酶2/信号转导和转录激活子3信号通路对急性胰腺炎大鼠细胞因子水平的影响

目的观察大承气汤通过Janus激酶2/信号转导和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠细胞因子水平的影响。方法选取30只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组10只。假手术组大鼠开腹后仅翻动十二指肠,模型组和治疗组大鼠经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠,治疗组大鼠在造模后24 h灌胃10 g/kg大承气汤。比较各组大鼠腹水量、血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;酶联免疫吸附法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平;免疫发光法和免疫扩散法检测大鼠血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠血清磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)和磷酸化信号转导和转录激活子3(p-STAT3)mRNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠腹水量显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠腹水量显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠AMY、脂肪酶、ALT水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠AMY、脂肪酶、ALT水平均显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠血清炎症因子水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠血清炎症因子水平显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠血清p-JAK2和p-STAT3 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠血清p-JAK2和p-STAT3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论大承气汤通过抑制JAK2/STAT3信号通路降低AP大鼠细胞因子水平。

青藤碱水凝胶经白细胞介素-6/Janus激酶2/信号转导因子和转录激活因子3信号通路调控自噬和炎症对胶原-诱导类风湿关节炎小鼠模型的影响作用

目的 探讨青藤碱(SIN)水凝胶(gel)对胶原-诱导类风湿关节炎(RA)小鼠模型的影响和作用机制。方法 10只DBA/1小鼠随机分为SIN oral组(口服管饲法给予SIN)和SIN gel组(关节处皮肤涂抹SIN gel),每组各5只。测定不同时间点两组小鼠关节滑膜液中的SIN水平。20只DBA/1小鼠随机分为Control组、Model组、Model+SIN oral组和Model+SIN gel组,每组各5只。采用ELISA法测定滑膜液中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平。采用Western blot法测定关节中自噬相关蛋白LC-3Ⅰ、LC-3Ⅱ、p62及IL-6/Janus激酶(JAK)2/信号转导因子和转录激活因子(STAT)3信号通路蛋白的相对表达水平。结果 与SIN oral组相比,SIN gel组小鼠给药后时间点1、2、6、12、16、20和24 h关节滑膜液中SIN水平均明显升高(P<0.05),且在给药后6 h时滑膜液中SIN水平达到同组峰值。与Control组比较,Model组小鼠关节滑膜液中IL-6、IL-1β、MCP-1和TNF-α水平及关节组织中LC-3Ⅱ/Ⅰ比值均明显升高,关节组织中p62表达水平明显降低;Model组、Model+SIN oral组及Model+SIN gel组小鼠关节滑膜液中IL-6、IL-1β、MCP-1和TNF-α水平及关节组织中LC-3Ⅱ/Ⅰ比值均依次降低,关节组织中p62表达水平依次升高(P<0.05)。与Control组比较,Model组小鼠关节组织中IL-6、磷酸化(p-)JAK2和p-STAT3相对表达水平均明显升高;Model组、Model+SIN oral组及Model+SIN gel组小鼠关节组织中IL-6、p-JAK2和p-STAT3相对表达水平均依次降低(P<0.05)。结论 SIN gel提高了RA小鼠向关节部位递送SIN的效率,并明显抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路的活化水平、炎症细胞因子分泌和关节处的自噬水平。

基于STAT3信号通路研究柠檬苦素对胃癌模型小鼠免疫因子表达的影响

目的 分析柠檬苦素对胃癌小鼠模型免疫因子表达的影响并探索其作用机制。方法 选取50只SPF级小鼠,随机分为5组各10只,构建MFC胃癌荷瘤模型,建模成功后随机分为模型组、阳性对照组及柠檬苦素低、中、高剂量组并给予对应药物灌胃,1次/d,连续14 d。计算脾指数、胸腺指数及抑瘤率;流式细胞术检测CD4^(+)、CD8^(+) T细胞及其比值;酶联免疫吸附试验检测血清免疫因子白细胞介素(IL)-2、IL-10、干扰素(IFN)-γ的表达水平;免疫组化法检测胃癌组织磷酸化信号转导与转录激活因子(p-STAT3)、基质金属蛋白酶(MMP)-9阳性表达率;Western印迹法检测胃癌细胞STAT3磷酸化水平。结果 与模型组相比,阳性对照组脾指数、胸腺指数显著降低(P<0.05),柠檬苦素低、中、高剂量组脾指数、胸腺指数显著升高(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组、柠檬苦素低、中、高剂量组抑瘤率均显著增加(P<0.05)。柠檬苦素低、中、高剂量组CD4^(+)、CD8^(+) T淋巴细胞百分数和CD4^(+)/CD8^(+)比值较模型组显著上升(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组IL-2、IL-10水平显著下降,IFN-γ显著上升(P<0.05);而柠檬苦素低、中、高剂量组IL-2、IFN-γ水平显著增加,IL-10显著降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组及柠檬苦素低、中、高剂量组p-STAT3、MMP-9的阳性表达率均显著下降(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组及柠檬苦素低、中、高剂量组第705位点酪氨酸的磷酸化STAT3蛋白(pTyr^(705)-STAT3)水平均显著降低(P<0.05)。结论 柠檬苦素能抑制胃癌小鼠模型肿瘤组织的发展,这与其提高小鼠免疫水平与抑制STAT3通路激活密切相关。

miR-495-3p靶向BUB1调控STAT3信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨miR-495-3p靶向苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响。方法 使用cDNA芯片技术筛选出食管癌组织和正常组织差异表达基因,并用生物信息学方法进行分析。运用TargetScan数据库对miRNA的靶基因进行预测,并用双荧光素酶报告基因检测技术进行验证。将KYSE150细胞分为空白对照组、NC mimics组和miR-495-3p mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活力。用流式细胞术测定细胞周期和凋亡。通过定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定BUB1 mRNA的表达水平。通过蛋白质印迹法(Western blot)测量BUB1、STAT3、磷酸化(p)-STAT3、细胞周期蛋白B1(CCNB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白水平。用划痕和Transwell小室实验测定细胞的迁移和侵袭能力。结果 差异表达基因参与生物学过程、信号通路和网络构建主要与细胞周期相关,BUB1是关键的核心(Hub)基因,miR-495-3p靶向调控BUB1。体外实验表明,过表达miR-495-3p能显着抑制食管癌细胞的生长、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡和G2/M期阻滞。过表达miR-495-3p处理后,食管癌细胞中Caspase-3、Caspase-9表达量升高(P<0.01),而Bcl-2、BUB1、CCNB1、CDK1、p-STAT3表达量降低(P<0.01)。STAT3信号通路也被发现在此过程中发挥着重要作用。结论 miR-495-3p可能通过下调BUB1介导STAT3信号通路影响食管癌细胞的生物学行为。