目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药...目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P<0.05,P<0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P<0.01,P<0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。展开更多
为了阐明水牛信号转导子和转录激活子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)基因在水牛卵泡、胚胎发生及泌乳调节过程中的作用及分子机制,本试验采用了3′-RACE克隆获得STAT4基因,并对其核苷酸序列和蛋白质序列...为了阐明水牛信号转导子和转录激活子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)基因在水牛卵泡、胚胎发生及泌乳调节过程中的作用及分子机制,本试验采用了3′-RACE克隆获得STAT4基因,并对其核苷酸序列和蛋白质序列进行了信息学分析,通过构建其真核表达载体并转染HEK293T细胞验证所构建载体的准确性。结果表明,水牛STAT4基因编码区长2 247bp,3′-UTR区长268bp,编码748个氨基酸。BLAST分析显示,水牛STAT4核苷酸序列与牛、山羊、绵羊、猪、马、犬和人相应序列的同源性分别为99%、99%、99%、95%、93%、93%和92%,系统进化树分析结果表明,STAT4基因在不同物种及进化的过程中具有高度保守性。蛋白质分析结果表明,STAT4蛋白呈弱酸性,无信号肽,定位于细胞质,存在STAT_int、STAT_alpha、STAT_bind和SH2_STAT4等结构域。microRNA靶标预测显示bta-miR-200a、bta-miR-2429和bta-miR-2410等为STAT4 3′-UTR潜在microRNAs。试验成功构建了水牛STAT4基因真核表达载体pEGFPN1-STAT4,转染HEK293T后产生较强的绿色荧光信号,表明能够形成STAT4-EGFP融合蛋白。展开更多
文摘目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P<0.05,P<0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P<0.01,P<0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。
文摘为了阐明水牛信号转导子和转录激活子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)基因在水牛卵泡、胚胎发生及泌乳调节过程中的作用及分子机制,本试验采用了3′-RACE克隆获得STAT4基因,并对其核苷酸序列和蛋白质序列进行了信息学分析,通过构建其真核表达载体并转染HEK293T细胞验证所构建载体的准确性。结果表明,水牛STAT4基因编码区长2 247bp,3′-UTR区长268bp,编码748个氨基酸。BLAST分析显示,水牛STAT4核苷酸序列与牛、山羊、绵羊、猪、马、犬和人相应序列的同源性分别为99%、99%、99%、95%、93%、93%和92%,系统进化树分析结果表明,STAT4基因在不同物种及进化的过程中具有高度保守性。蛋白质分析结果表明,STAT4蛋白呈弱酸性,无信号肽,定位于细胞质,存在STAT_int、STAT_alpha、STAT_bind和SH2_STAT4等结构域。microRNA靶标预测显示bta-miR-200a、bta-miR-2429和bta-miR-2410等为STAT4 3′-UTR潜在microRNAs。试验成功构建了水牛STAT4基因真核表达载体pEGFPN1-STAT4,转染HEK293T后产生较强的绿色荧光信号,表明能够形成STAT4-EGFP融合蛋白。
