流感等病毒感染过程中STATs蛋白非细胞因子依赖性的早期激活

STATs蛋白在宿主抗病毒应答中具有重要功能,但对其在病毒感染早期的作用研究不多。为确定STATs蛋白在病毒感染早期的激活,本文采用甲型流感病毒H1N1亚型的不同毒株(WSN和PR8)和伪狂犬病毒(PRV)分别感染细胞或基因敲除小鼠,利用Western blotting分析STAT1和STAT3酪氨酸位点的磷酸化水平。结果显示,病毒感染早期阶段的干扰素等细胞因子产生时,可直接诱导STAT1和STAT3的激活。该结果表明非细胞因子依赖性早期抗病毒的天然免疫应答反应的存在,不仅为阐明病毒-宿主互作的分子基础提供新的理论依据,也为筛选新型抗流感病毒药物靶标提供了新思路。

基于GIS与Frag stats的土地利用与景观格局变化——以拉萨市为例

土地利用与景观格局的变化能直观地反映出区域相应的生态环境变化。基于拉萨市1990、2000、2010与2018年土地分类遥感监测数据为基础,借助GIS与Frag stats进行了拉萨市土地利用动态与景观格局指数分析。结果表明:①拉萨市以草地与未利用地为主要地类。除草地外,其余各地类的面积均有所增加,其中以林地面积增幅最大;②2000~2010年土地利用类型分布与景观格局变化明显强于其他两个时期;③地类主要分布的空间格局主要在2000~2010年间发生改变。④拉萨市的景观破碎度下降,优势景观优势度减弱,丰富度增加,斑块集聚度减弱,斑块分布更加均匀。

中药单体紫草素介导JAK/STATs信号通路对银屑病细胞生物学活性的作用机制

目的探讨中药单体紫草素介导Janus激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)信号通路对银屑病细胞生物学活性的作用机制。方法用人类永生化表皮细胞(Hacat)建立银屑病细胞模型,分为:银屑病组(PSO组,未加入紫草素)、紫草素低浓度组(SLC组,紫草素浓度为0.125 mmol/L)、紫草素高浓度组(SHC组,紫草素浓度为0.5 mmol/L)。模型建立成功后,培养24 h后用光学显微镜观察细胞形态,采用噻唑蓝(MTT)检测紫草素对各组Hacat OD值,流式细胞仪检测各组Hacat凋亡率,PCR和Western印迹检测JAK2、STAT1、STAT3表达水平。结果倒置显微镜下观察:银屑病细胞形态镶嵌贴壁生长,呈现铺路石样外观,排列整齐;细胞形态为多角形,扁平,界清;经过紫草素干预24 h以后,SLC组细胞为黏附性降低,部分细胞脱落、漂浮;SHC组细胞数目逐渐减少,细胞形态发生改变,细胞黏附性变差,有较多细胞从瓶壁脱落,24、48、72 h后,与PSO组对比,SLC组与SHC组OD值均明显降低(P<0.05),与SLC组相比,SHC组OD值显著降低(P<0.05);PSO组凋亡率显著低于SLC组(P<0.05);SLC组凋亡率显著低于SHC组(P<0.05);与PSO组相比,SLC组STAT3、STAT1、JAK2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),与SLC组比较,SHC组STAT3、STAT1、JAK2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与SHC组相比,WP1066组STAT3蛋白的表达明显降低,AG490组JAK2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论中药单体紫草素可以通过抑制JAK/STAT通路上STAT3、STAT1、JAK2蛋白的表达,进而抑制银屑病细胞的增殖,促进其凋亡。

JAK-STATs通路在CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化中的作用

目的:探讨JAK-STATs是否参与CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblast,hHSF)增殖分化过程。方法:原代培养hHSF,将其分为①对照组:hHSF组;②CTGF刺激hHSF组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,采用western-blot方法检测各时相点JAK1、JAK2、JAK3、TYK2、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。再对筛选出的蛋白用免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法进一步验证分析其表达及活化情况,以筛选出参与CTGF调控hHSF增殖和分化的JAK-STATs信号分子。结果:通过western-blot、免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法筛选出JAK1、STAT1蛋白在CTGF刺激后蛋白活化程度明显增强。结论:JAK1、STAT1可能参与了CTGF调控hHSF增殖过程。这从一定程度上揭示了CTGF调控hHSF增殖分化过程的信号转导机制,从而为抑制瘢痕纤维化提供了新的研究方向,有助于更深入地调控CTGF的促纤维化作用,为hHSF及其它纤维化疾病的研究及防治提供新的思路。

STATs蛋白家族在口腔黏膜下纤维化及其并存口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的比较口腔黏膜下纤维化(OSF)、OSF并存扁平苔癣(OLP)及正常口腔黏膜组织中STATs蛋白家族的表达差异,探讨STATs蛋白家族在OSF并存OLP发生、发展中的作用机制。方法收集临床OSF病例21例(OSF组)、OSF并存OLP13例(OSF并存OLP组),以及NBM组织10例(对照组),分离组织RNA,采用RT-PCR分析STATs蛋白家族(Stat1、Stat2、Stat3、Stat4、Stat5a、Stat5b、Stat6)在OSF不同分期组织及OSF并存OLP组织中的表达差异。筛选表达差异较大的基因,进行免疫印迹杂交检测验证,并分析其磷酸化变化,探讨STATs蛋白家族在OSF并存OLP发生、发展中的作用机制。结果 Stat1、Stat3、Stat5a的表达量与OSF分型呈正相关,即在OSF组中晚期黏膜组织样本中的表达量明显高于对照组(P<0.05),而Stat2、Stat4、Stat5b、Stat6在不同OSF分型中的表达量变化不显著(P>0.05)。Stat1和p-Stat1在OSF并存OLP组中的表达水平与对照组比较显著增加(P<0.05),Stat3和p-Stat3(Ser727)在OSF并存OLP组中的表达水平与对照组比较明显上调(P<0.05)。与对照组比较,Stat5a在OSF并存OLP组中显著上调,而p-Stat5a在各组中变化不显著。结论 STATs蛋白家族成员Stat1、Stat3、Stat5a在OSF及其并存OLP中表达上调。

基于Th1细胞功能研究中药合地塞米松对哮喘大鼠pJAKs/pSTATs的影响

目的观察中药淫羊藿女贞子煎剂及提取物配伍地塞米松对哮喘大鼠肺组织中与Th1细胞信号通路相关的JAKs及STATs蛋白磷酸化表达的影响。方法 SPF级雄性大鼠,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、地塞米松组(C组)、淫羊藿女贞子煎剂组(D组)、地塞米松合煎剂组(E组)、淫羊藿女贞子提取物组(F组)、地塞米松合提取物组(G组)。卵蛋白致敏,激发建立大鼠哮喘模型,腹腔注射地塞米松和/或灌胃淫羊藿女贞子煎剂或提取物,免疫荧光法检测肺组织JAKs(JAK1、JAK2)及STATs(STAT1、STAT2、STAT4)蛋白的磷酸化表达。结果与A组比较,B组大鼠肺组织pJAK1、pSTAT1、pSTAT2蛋白表达均显著升高(均P<0.01),pJAK2、pSTAT4蛋白表达显著降低(均P<0.01);与B组比较,各给药组pJAK1、pSTAT1、pSTAT2蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),pJAK2、pSTAT4蛋白表达显著升高(均P<0.01);与C组比较,E组、G组能pJAK1、pSTAT1、pSTAT2的蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),pJAK2、pSTAT2的蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。与单用地塞米松比较,地塞米松合煎剂或提取物组能显著性调整pJAK1、pJAK2、PSTAT1、pSTAT2、pSTAT4蛋白的表达。结论调节哮喘大鼠肺组织中与Th1细胞信号通路相关的JAKs/STATs可能是淫羊藿女贞子煎剂及提取物协同激素治疗哮喘的作用机制之一。

CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的状况

目的:探讨CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的情况。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将其分为:①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②增生性瘢痕成纤维细胞外源性重组CTGF刺激组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,分别采用MTT检测细胞增殖,western-blot检测各组之间a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)的变化趋势以及各时相点STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。结果:在确定成纤维细胞增殖以及a-SMA表达变化趋势以②-①组顺序递减的前提下(P<0.05),用western-blot观测两组STATs蛋白活化情况,发现:STAT1蛋白磷酸化水平以②-①组顺序递减(P<0.01);STAT2-6均有不同程度的磷酸化,但不以②-①组顺序递减。结论:STAT1可能在CTGF促进人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和分化过程中可能发挥着重要作用,以上研究结果为抑制瘢痕纤维化及挛缩提供了新的研究方向。

CD8^+T细胞浸润与STATs家族活化在胃癌组织中表达及临床意义

目的 探讨CD8^+T细胞浸润及STAT1、pSTAT1、STAT3、pSTAT3蛋白表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法 回顾性分析2008年7月至2011年12月行D2根治性手术胃癌患者186例。采用免疫组化染色SP法对CD8^+T细胞浸润、STATs蛋白的表达,分析其表达与临床病理特征(性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期、病理分级)的关系;Kaplan-miere法绘制生存曲线,Cox风险比例回归模型分析影响无病生存时间(DFS)和总生存时间(OS)的预后因素。结果 仅pSTAT3蛋白表达与胃癌病理分级有关(P=0.017)。186例胃癌患者中位DFS和OS分别为87.0个月(50.96~123.04个月)、91.0个月(68.31~113.69个月)。单因素分析显示:TNM分期、肿瘤部位、CD8^+T细胞浸润程度均与DFS和OS有关(P<0.05)。Cox风险比例回归模型分析显示:TNM分期、肿瘤部位、CD8^+T细胞浸润是DFS和OS的独立预后因素(P<0.05)。Spearman相关分析显示,CD8+T细胞表达与pSTAT3、STAT3相关,相关系数分别为0.405、0.186(P<0.05)。结论 CD8^+T细胞浸润程度越高,患者预后越好。STATs(STAT1、pSTAT1、STAT3、pSTAT3)蛋白表达与胃癌临床病理特征、DFS和OS无关,pSTAT3、STAT3可能参与CD8^+T细胞抗肿瘤免疫环节。

淫羊藿女贞子影响激素干预哮喘大鼠与炎性因子相关的pJAKs/pSTATs的研究

目的研究淫羊藿女贞子合地塞米松对哮喘大鼠肺组织中与炎性因子相关的JAKs及STATs蛋白磷酸化表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为7组,分别是正常对照组(正常组)、哮喘模型组(模型组)、地塞米松组(激素组)、淫羊藿女贞子煎剂组(煎剂组)、地塞米松合煎剂组(激素合煎剂组)、淫羊藿女贞子提取物组(提取物组)、地塞米松合提取物组(激素合提取物组)。卵蛋白(OVA)致敏,建立大鼠哮喘模型,腹腔注射地塞米松和/或灌胃淫羊藿女贞子煎剂或提取物,免疫荧光法检测肺组织JAKs(JAK3、TYK2)及STATs(STAT3、STAT5、STAT6)蛋白的磷酸化表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织p JAK3、p TYK2、p STAT3、p STAT5、p STAT6的蛋白表达均显著升高(均P<0.01);与模型组比较,各给药组p JAK3、p TYK2、p STAT3、p STAT5、p STAT6的蛋白表达均显著降低(均P<0.01);与单用激素比较,激素合煎剂或提取物组均能进一步显著降低p JAK3、p TYK2、p STAT3、p STAT6的蛋白表达。结论调节哮喘大鼠肺组织中与炎性因子相关的JAKs/STATs可能是淫羊藿女贞子煎剂及提取物协同激素治疗哮喘的作用机制之一。

JAK/STATs通路与肥胖发病机制的研究进展

瘦素(leptin)是一种由肥胖基因(obese gene,ob基因)编码、由白色脂肪组织合成和分泌的蛋白质,与肥胖的发病密切相关。leptin主要通过Janus激酶/信号转导及转录激活子通路(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription pathway,JAK/STATs通路)参与体脂代谢、机体摄食,能够有效抑制肥胖的产生。然而近来研究发现在肥胖个体中普遍存在着leptin抵抗、血液中高leptin表达;leptin并不能发挥体脂调控作用。其失活机制还不是十分清楚,研究表明JAK/STATs通路异常与机体内leptin失活存在密切关系。本文就肥胖与JAK/STATs通路的关系进行综述。

STATs信号传导通路成员选择性活化与结直肠癌发生机制的研究

目的检测STATs信号传导通路重要成员在结直肠癌组织中的表达与活化,分析STATs成员与结直肠癌临床病理特征的关系。方法应用Westernblot检测结直肠癌组织中Stat1、Stat3、Stat5及其下游产物cyclin D1、Bcl-xL的表达,免疫组织化学法检测STATs成员在细胞水平的分布。结果结直肠癌组织中STATs信号传导通路成员Stat3、Stat5及其下游产物cyclin D1、Bcl-xL蛋白表达水平明显高于正常肠黏膜(P<0.05);p-Stat3、p!Stat5表达水平与TNM分期较晚(Ⅲ/Ⅳ)及淋巴结转移有关(P<0.05),cyclin D1与淋巴结转移有关(P<0.05),p-Stat3与cyclinD1在结直肠癌组织中表达情况呈线性相关,相关系数为0.480(P<0.05)。结论STATs信号传导通路持续活化可能在结直肠癌的发生中起重要作用,其详细作用机制还需要进一步研究。

STATs家族在结直肠癌中的研究进展

信号传导和转录激活因子(signal transduction and activator of transcription,STAT)蛋白是一组细胞质内蛋白,其家族共有7个成员。STAT蛋白可以激活多种基因、调节多种通路,在细胞周期进展、凋亡、肿瘤血管发生、肿瘤细胞浸润和转移及肿瘤细胞逃避免疫系统的监视中发挥重要作用。结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一,其发病率在消化系统肿瘤当中位居第三。本综述重点阐述STATs家族在结直肠癌中的作用,以期为结直肠癌的治疗提供新的思路。

口腔扁平苔藓组织中STATs家族表达与外周血PD-1、PD-L1表达及免疫功能的相关性

目的:研究口腔扁平苔藓组织中STATs家族表达与外周血PD-1、PD-L1表达及免疫功能的相关性。方法:选择在我院诊断为口腔扁平苔藓的47例患者作为研究的扁平苔藓组(OLP组),选择同期体检的健康志愿者作为研究的对照组。采集外周血单个核细胞并检测PD-1、PD-L1以及免疫细胞表面标志分子的表达量,采集血清并测定Th1、Th2细胞因子及免疫球蛋白的含量,采集口腔扁平苔藓病灶组织及病灶旁正常组织并测定STATs家族的表达量。结果:病灶组织中p-STAT1、p-STAT3、pSTAT5a的表达量显著高于正常组织,p-STAT2、p-STAT4、p-STAT5b的表达量与正常组织比较无显著性差异;OLP组外周血单个核细胞中PD-1、PD-L1的mRNA表达量以及CD19^+的平均荧光强度显著高于对照组且与p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5a的表达量呈正相关,CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD16^+CD56^+的平均荧光强度显著低于对照组且与p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5a的表达量呈负相关;OLP组血清中IFN-γ、IL-2的含量显著低于对照组且与p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5a的表达量呈负相关,IL-4、IL-10、IgG、IgM、IgA的含量显著高于对照组且与p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5a的表达量呈正相关。结论:口腔扁平苔藓组织中p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5a的表达量异常升高,PD-1/PDL1所介导的Th1/Th2细胞免疫及体液免疫紊乱与病灶中STAT分子表达量的改变密切相关。

调节JAKs/STATs信号转导通路的药物及其研究进展

JAKs与STATs广泛参与体内多种重要细胞因子的信号转导,JAKs/STATs信号转导通路的异常活化与肿瘤、免疫相关疾病的病理过程密切相关,已成为新药发现及研究的重要靶点,多个JAKs激酶抑制剂和STATs抑制剂正在临床前或已进入临床研究阶段。

STATs与细胞凋亡

细胞因子(cytokines)是由细胞分泌的一类小分子蛋白质,它们能与其他多种信号分子一起通过触发细胞内各种信号传导途径来调控诸多的细胞生命活动。其中包括生长、分裂、分化、病理过程(尤其是癌变),甚至死亡等。迄今已证明这些途径大多数较复杂,存在多步连续的,甚至是级联式的(cascade)生化反应系统。

JAKs—STATs信号传导——疾病治疗新领域

细胞因子受体介导的JAKs STATs信号传导途径是目前细胞因子研究领域的热点。由于细胞因子广泛地参与了肿瘤、白血病、自身免疫性疾病等多种疾病的发生、发展和预后 ,因此近年来JAKs和STATs的缺陷和异常活化与疾病的关系日益受到了人们的广泛关注。本文就JAKs、STATs的结构、JAKs和STATs的缺陷和异常活化与疾病的关系以及JAKs、STATs在疾病治疗中的研究进展综述如下。

细胞因子受体信号转导的JAKs-STATs途径

细胞因子信号转导的ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径是当前细胞因子研究领域的热点。多数造血生长因子通过此途径转导信号，表达相应的生理功能。此途径的异常活化与多种疾病密切相关。ＪＡＫｓ是一类非受体型酪氨酸激酶，ＳＴＡＴｓ是一类转录因子，它们均是由多个成员构成的一个家族。细胞因子与其受体结合后诱导受体二聚化，在胞浆内形成ＪＡＫｓ结合位点结合并活化ＪＡＫｓ，活化的ＪＡＫｓ进一步活化ＳＴＡＴｓ，由ＳＴＡＴｓ转入细胞核内启动相应基因的转录，从而表达细胞因子的功能。本文就造血生长因子受体、ＪＡＫｓ、ＳＴＡＴｓ的结构和活化以及ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径的异常活化与疾病的关系，参与ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径的调节因子综述如下：

应用Empower Stats软件快速实现病例对照研究的个体匹配

病例对照研究（case-control study）是流行病学方法中最基本、最重要的研究类型之一，可用于发病危险因素的研究，也可用于临床回顾性治疗与探索预后因素的研究等旧0。其主要研究类型主要分为病例对照不匹配和病例对照匹配，前者只需对照数目等于或多于病例人数，而后者在目前的软件实现比较复杂，尤其是匹配因素较多，对照匹配比例较高（如1：2以上）时，很多医学工作者无从下手。

JAKs—STATs信号转导通路与疼痛敏化调控研究进展

最近研究表明酪氨酸激酶-信号传导子与转录激活子（Janus kinase—signal transducers and activators of transcription．JAKs-STATs）信号传导通路在疼痛高敏感性的产生和维持中发挥重要作用，但其间的精确机制尚不清。本文综述了JAKs—STATs信号转导通路与疼痛敏化调控方面的研究进展。