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题名简便高质量的食用菌总RNA提取方法
被引量:11
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作者
税丕容
郑晓冰
林俊芳
郭丽琼
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机构
华南农业大学食品学院生物工程系
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出处
《食用菌学报》
2008年第1期32-41,共10页
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基金
国家自然科学基金(编号:30671457
30371000)
+1 种基金
广东省自然科学基金(编号:5006680
032239)的部分研究内容
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文摘
STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.80~2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求。
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关键词
食用菌
总RNA
ste法
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Keywords
edible fungi
total RNA isolation
ste method
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分类号
S646
[农业科学—蔬菜学]
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题名阿魏侧耳菌丝体RNA提取方法的比较与研究
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作者
吴智艳
叶静云
程珊
闫训友
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机构
廊坊师范学院生命科学学院
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出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第6期1040-1044,共5页
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文摘
采用一步法、异硫氰酸胍—巯基乙醇联合变性法和STE法3种方法,分别对阿魏侧耳总RNA的提取效果进行比较。结果表明,一步法难以提取RNA,异硫氰酸胍—巯基乙醇联合变性法提取RNA效果不理想,存在蛋白污染,这2种方法不适于富含多糖的阿魏侧耳总RNA的提取;STE法提取阿魏侧耳总RNA质量高、完整性好、成功率高,经琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测,提取的总RNA具有清晰的28S,18S,5S三条带,且28S的亮度是18S的2倍左右,OD260/OD280比值为1.8~2.0,可作为阿魏侧耳总RNA提取的首选方法。用此方法来提取阿魏侧耳液体发酵不同时期的RNA,可以满足进一步分子生物学研究的要求。
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关键词
阿魏侧耳
RNA提取
ste法
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Keywords
Pleurotus ferulae Lenzi
RNA extraction
ste method
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分类号
S646
[农业科学—蔬菜学]
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