干扰STX18-AS1通过靶向miR-204保护心肌细胞

目的探讨干扰长链非编码RNA STX18-AS1(long non-coding RNA,LncRNA STX18-AS1)是否通过上调微小RNA-204(miR-204)的表达从而影响心肌细胞缺氧损伤。方法体外培养心肌细胞H9C2,采用二氯化钴(CoCl_(2))处理心肌细胞建立细胞缺氧损伤模型,采用qRT-PCR检测CoCl_(2)处理不同时间点STX18-AS1、miR-204的表达量;实验设置对照组、模型组、si-NC组、si-STX18-AS1组、miR-NC组、miR-204组。采用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖活性;流式细胞术与TUNEL检测细胞凋亡率;采用生化试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性;双荧光素酶报告实验验证STX18-AS1、miR-204的靶向关系。结果与对照组比较,在CoCl_(2)处理6 h、12 h、18 h、24 h时模型组和si-NC组STX18-AS1表达水平升高(P<0.01),miR-204表达水平降低(P<0.01);与模型组、si-NC组比较,在CoCl_(2)处理6 h、12 h、18 h、24 h时si-STX18-AS1组STX18-AS1的表达水平降低(P<0.01),miR-204的表达水平升高(P<0.01);与对照组比,模型组、si-NC组细胞增殖活性降低(P<0.01),细胞凋亡率及LDH活力、MDA的水平升高(P<0.01),SOD、CAT的活力降低(P<0.01);与模型组、si-NC组比较,si-STX18-AS1组细胞增殖活性升高(P<0.01),细胞凋亡率及LDH活力、MDA的水平降低(P<0.01),SOD、CAT的活力升高(P<0.01);转染miR-204mimics对心肌细胞增殖活性、凋亡及氧化应激的作用与转染si-STX18-AS1的作用相同;双荧光素酶报告实验证实STX18-AS1可靶向结合miR-204。结论干扰STX18-AS1表达可能通过上调miR-204,抑制细胞凋亡、促进增殖,减轻CoCl_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤。