SULT1A1蛋白表达和性激素含量与子宫肌瘤发病相关性的研究

目的:检测子宫肌瘤SULT1A1蛋白表达和性激素含量,分析其在子宫肌瘤发生、发展中的作用。方法:化学发光分析法测定30例子宫肌瘤患者、30例同年龄段健康女性以及10例因CINⅢ行全子宫切除术患者血清及组织匀浆中E2、P、T含量。Western Blot方法检测SULT1A1蛋白的表达,并采用Spearman进行等级相关分析。结果:肌瘤组血清E2含量明显低于健康女性组(P<0.05),其T含量则明显高于健康女性组(P<0.01),P含量各组无显著差异。肌瘤组织E2含量显著高于肌瘤包膜外子宫肌层组织及CINⅢ患者子宫肌层组织(P<0.001)、前二者P、T含量组间无显著差异。肌瘤组织中SULT1A1蛋白表达与肌瘤包膜外子宫肌层组织比较差异显著(P<0.05)。肌瘤组织,肌瘤包膜外子宫肌层组织和CINⅢ患者子宫肌层组织中SULT1A1蛋白相对含量与相应组织匀浆E2含量均为负相关,与相应血清E2含量无明显相关性。结论:子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULT1A1蛋白活性降低有关。

干扰SULT2B1抑制人肝癌细胞BEL-7402的上皮间质化

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1与人肝癌细胞BEL-7402上皮间质转化的关系及其作用机制。方法细胞分为空白对照组(NC)、阴性对照组(control-siRNA)和SULT2B1干扰组(SULT2B1-siRNA),LipofectamineTM2000脂质体转染细胞,real-time PCR和Western blot检测干扰效果。Western blot检测紧密连接蛋白(ZO-1)、波形蛋白(vimentin)和转录因子ZEB1的表达。结果 SULT2B1干扰BEL-7402细胞后其mRNA与蛋白表达均显著降低(P<0.05),ZO-1表达水平升高(P<0.05),vimentin的表达及ZEB1的蛋白水平均降低(P<0.05)。结论干扰SULT2B1通过下调ZEB1的表达抑制人肝癌细胞BEL-7402的上皮间质化。

SULT1E1蛋白表达和性激素含量与子宫肌瘤发病的相关性研究

目的:探讨性激素及人雌激素硫酸基转移酶在子宫肌瘤发生、发展中的作用。方法:化学发光分析法测定30例子宫肌瘤患者和30例同年龄段健康女性血清及组织匀浆中E2、P、T含量。免疫组化染色法检测SULT1E1蛋白的表达。结果:肌瘤组血清E2含量明显低于健康女性组(P<0.05),其T含量则明显高于健康女性组(P<0.05),P含量各组无显著差异;肌瘤组织匀浆中E2含量显著高于肌瘤包膜外肌层组织(P<0.01),其P、T含量两组间无显著差异;肌瘤组织中SULT1E1蛋白表达与肌瘤包膜外肌层组织比较差异显著(P<0.05),肌瘤组织与肌瘤包膜外肌层组织中SULT1E1蛋白定量表达与相应组织匀浆中E2含量分别呈负相关(r=-0.533,r=-0.498,P<0.01)。结论:子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULT1E1酶活性降低有关。

SULT1E1、ERβ在子宫内膜腺癌组织中的表达及其相关性

目的:探讨SULT1E1及ERβ蛋白与子宫内膜腺癌的发生、发展之间的关系。方法:采用Western blot方法检测正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中SULT1E1和ERβ蛋白的表达含量。结果:SULT1E1和ERβ蛋白在正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中的表达含量逐渐降低,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织与正常增生期子宫内膜组织比较差异均有统计学意义(P<0.05)。SULT1E1和ERβ蛋白与子宫内膜腺癌组织学分级、肌层浸润深度、手术病理分期及淋巴结转移等无关(P>0.05)。在子宫内膜腺癌组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达呈明显正相关(r=0.66,P<0.01)。在正常增生期和不典型增生子宫内膜组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达无明显相关性(r=0.035,P>0.05;r=0.466,P>0.05)。结论:在子宫内膜腺癌的渐近演变过程中,SULT1E1、ERβ表达降低或缺失可能与子宫内膜癌的早期形成有一定的关系,ERβ蛋白含量越多,SULT1E1蛋白对雌激素的调节作用越强,但不能作为子宫内膜腺癌病情严重程度和预后进行评价的指标。

SULT2A1、Bcl-2蛋白在子宫肌瘤组织中的表达及意义

为探讨子宫肌瘤组织中硫酸基转移酶2A1(SULT2A1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达及意义。选取2017年1月至2018年9月保存的子宫肌瘤标本110例(子宫肌瘤组),同时选取正常子宫肌层组织70例(正常子宫肌层组),采用免疫组化染色法检测SULT2A1、Bcl-2蛋白表达。结果显示,子宫肌瘤组SULT2A1阳性表达率明显低于正常子宫肌层组(P<0.05),Bcl-2蛋白阳性表达率为89.09%,明显高于正常子宫肌层组(P<0.05);子宫肌瘤组分泌期Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于增生期(P<0.05);SULT2A1和Bcl-2蛋白表达无相关性(rs=-0.008,P>0.05)。结果提示,SULT2A1和Bcl-2表达与子宫肌瘤发生发展有关。

酶抑制剂对V79-hCYP2E1-SULT1A1细胞酶依赖性化学诱变的影响

目的:V79-hCYP2E1-hSULT1A1是一个表达人细胞色素P450(CYP)2E1和硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1的重组中国地鼠V79[Chinese hamster lung(V79)cells]细胞系,它对于需有关代谢酶活化的间接诱变剂有基因突变反应;为观察单个酶的作用,需要建立对细胞中任一酶特异抑制的模型。方法:以细胞Hprt位点的正向突变为试验终点,N-二甲基亚硝胺(N-Nitrosodimethylamine,NDMA)和2-硝基丙烷(2-Nitropropane,2-NP)为依赖CYP2E1和SULT1A1的间接诱变剂,观察CYP抑制剂反式二氯乙烯(Trans-1,2-dichloroethylene,DCE)和1-氨基苯并三唑(1-Aminobenzotriazole,ABT)、SULT1抑制剂槲皮素和五氯酚(Pentachlorophenol,PCP)对上述间接诱变剂作用的影响。结果:在一定浓度下,ABT抑制NDMA的诱变率达99%而不影响2-NP的作用,DCE对其抑制仅达55%且对2-NP的细胞毒性有明显加强作用。槲皮素和PCP抑制2-NP的诱变率达63%和98%,且都对NDMA的作用无影响。结论:ABT和PCP可完全且特异地抑制该细胞中CYP2E1和SULT1A1依赖的诱变反应,此模型对于探讨遗传毒物的代谢活化有可靠价值。

干扰SULT2B1对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制作用的实验研究

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠H22肝癌细胞增殖能力的影响及作用机制。方法用不同MOI值(50,100)的SULT2B1慢病毒干扰载体感染H22细胞,CCK-8法检测干扰SULT2B1对H22细胞增殖能力的影响,采用Real-time PCR和Western blot检测增殖相关基因BCL2和MYC的mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组相比,干扰SULT2B1显著抑制H22细胞在不同时间点的增殖能力(MOI=100)(P<0.05)。不同MOI值(50,100)感染显著抑制H22细胞中SULT2B1基因的表达,并降低BCL2与MYC的mRNA及蛋白水平(P<0.05),但不同MOI值间各项指标的差异不明显(P>0.05)。结论干扰SULT2B1可抑制H22细胞的体外增殖能力,其作用主要与下调BCL2和MYC基因的表达水平有关。

卤代有机污染物抑制甲状腺激素代谢酶活性的研究进展

甲状腺激素(thyroid hormones,THs)对生物体细胞的正常发育和分化至关重要,甲状腺激素失调可引起中枢神经系统、肺、心血管和其他器官的异常发育。研究表明,环境中的卤代有机污染物(halogenated organic contaminants,HOCs)及其代谢产物具有甲状腺激素干扰效应。抑制参与THs代谢的生物酶,例如磺基转移酶(sulfotransferases,SULTs)和脱碘酶(deiodinases,DIs),是HOCs及其代谢产物干扰THs正常功能的重要方式。本文重点综述了HOCs对不同甲状腺激素代谢酶的抑制效应的研究,讨论了环境计算化学和预测毒理学方法在该领域的重要应用,期望为HOCs干扰甲状腺激素酶代谢活性的深入研究提供借鉴与参考。

乳腺癌CYP2D6、SULT1A1基因多态性与他莫昔芬疗效的关系

目的探讨乳腺癌患者CYP2D6、SULT1A1基因多态性与他莫昔芬疗效相关性。方法2018年1月至2019年1月接受他莫昔芬治疗的乳腺癌患者,检测CYP2D6(100C>T)、SULT1A1638(G>A)基因型,分析其与临床病理参数、生存的关系;Kaplan-meier生存分析,Log-rank检验生存差异。结果入组203例患者,CYP2D6(100C>T)CC、CT、TT分别44例(21.67%)、117例(57.64%)、42例(20.69%)。SULT1A1638(G>A)均为GG型,无GA或AA型。CC及CT型患者2年总生存率高于TT型(P=0.013)。CC及CT型患者OS较TT型患者延长(P=0.001)。结论CYP2D6(100C>T)TT型他莫昔芬治疗后总生存较CC、CT型明显下降。SULT1A1638(G>A)未发现等位基因突变。

SULT2B1影响小鼠Hepa1-6肝癌细胞的HIF-1α,糖酵解及血管新生

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠Hepa1-6肝癌细胞HIF-1α、糖酵解及血管新生能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法分别用SULT2B1过表达及干扰载体感染Hepa1-6细胞,采用Real-time PCR和Western blot检测过表达/干扰SULT2B1对HIF-1α表达水平的影响,同时检测糖酵解相关基因HK-Ⅱ和LDH的mRNA表达水平。CCK-8法检测干扰SULT2B1的肿瘤条件培养基(tumor conditioned medium,TCM)对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖能力的影响,并检测VEGF的mRNA表达水平。建立Hepa1-6细胞裸鼠移植瘤模型,免疫组化染色检测裸鼠瘤组织中CD34的表达水平。结果过表达/干扰SULT2B1可分别上调/下调HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平,且干扰SULT2B1可使HK-Ⅱ和LDH的mRNA表达水平降低,过表达发生相反的变化(P<0.05)。干扰SULT2B1的TCM可抑制bEnd.3细胞的增殖能力,并降低VEGF的mRNA表达水平(P<0.05)。同时,干扰SULT2B1可降低Hepa1-6细胞移植瘤在裸鼠体内的生长并降低瘤组织中的微血管密度(P<0.05)。结论干扰SULT2B1可抑制Hepa1-6细胞的糖酵解及血管新生能力,其作用主要与下调HIF-1α、HK-Ⅱ、LDH及VEGF的表达水平有关。

SULT1A3与芹菜素的磺酸化结合反应的动力学特征研究

目的：研究人重组酶SULT1A3与芹菜素的磺酸化结合反应的动力学特征。方法采用高效液相色谱法，测定芹菜素的消除量及其磺酸化结合反应代谢产物的生成量，并应用LC－MS／MS液质联用技术鉴定其结构。建立芹菜素与重组酶SULT1 A3体外反应体系，测定SULT1A3催化不同浓度芹菜素的磺酸化结合反应代谢速率，采用GraphPad Prism 5软件对其进行酶动力学分析。结果芹菜素在0．15625～30μM范围内线性关系良好，平均回收率大于80％，日内和日间的RSD均小于15％。芹菜素与SULT1A3孵育体系中的代谢产物为单磺酸化结合产物。芹菜素与人重组酶SULT1A3的反应呈底物抑制动力学特征。芹菜素与SULT1A3酶反应的动力学参数Km和Ksi分别为（0．355±1．04）、（23．62±0．06）μM，Vmax为（65．71±1．30） nmol／（min· mg），Vmax／Km为185．10 mL／（min· mg）。结论人重组酶SULT1A3可介导芹菜素的磺酸化结合反应，且其酶动力学特征呈现底物抑制效应。推测由SULT1A3介导的磺酸化结合反应可能在芹菜素的体内II相代谢中发挥重要的作用。

白杨素在人小肠S9中磺酸化结合反应的代谢特性

目的研究白杨素分别与人重组酶SULT1A3和人小肠S9(human small intestine S9,HSI S9)孵育体系磺酸化结合反应的代谢特性。方法采用高效液相色谱法,测定白杨素及其代谢产物,并应用LC-MS/MS液质联用技术鉴定其结构。分别建立白杨素与重组酶SULT1A3及与人小肠S9的反应体系,测定不同浓度的白杨素在不同酶反应中的代谢速率。结果白杨素与SULT1A3及人小肠S9孵育体系反应的代谢产物均为单磺酸化结合产物。白杨素与重组酶SULT1A3及人小肠S9的酶反应均呈双相动力学特征。白杨素与SULT1A3酶反应的动力学参数Km为(3.06±1.04)、(0.41±0.06)μM,Vmax为(12.13±1.30)、(6.72±1.61)nmol/(min·mg),Vmax/Km为3.96、16.39 mL/(min·mg)。白杨素与人小肠S9的酶反应的动力学参数Km为(1.92±0.35)、(0.01±0.00)μM,Vmax为(0.52±0.02)、(0.08±0.02)nmol/(min·mg),Vmax/Km为0.27、8.00 mL/(min·mg)。重组酶SULT1A3和人小肠S9分别介导的白杨素磺酸化结合反应的代谢呈现显著的相关性(R2=0.985)。结论 SULT1A3在白杨素的肠道代谢中发挥主导作用,小肠可能是白杨素的主要代谢器官。

干扰SULT2B1下调MMP-2抑制Hepa1-6肝癌细胞的体外迁移与侵袭

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶(SULT2B1)对小鼠肝癌细胞Hepa1-6体外迁移与侵袭的影响及分子机制。方法分别用SULT2B1慢病毒干扰载体和对照载体感染Hepa1-6细胞,设立干扰组和对照组。Transwell法检测细胞的侵袭与迁移能力,Real-time PCR法检测MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA水平,明胶酶谱法检测肿瘤条件培养基(TCM)中MMP-2和MMP-9的活性。结果 SULT2B1干扰组穿过未铺和铺Matrigl胶滤膜的细胞数较对照组明显减少(P<0.05),干扰SULT2B1下调MMP-2、上调TIMP-2的mRNA水平(P<0.05),干扰SULT2B1的TCM降低MMP-2的活性(P<0.05)。结论干扰SULT2B1可抑制Hepa1-6细胞的迁移与侵袭能力,其机制主要与降低MMP-2,升高TIMP-2的表达水平有关。

干扰SULT2B1对H22肝癌细胞上皮间质转化标志分子的影响

目的研究抑制羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1表达对小鼠H22肝癌细胞中上皮与间质标志分子的影响。方法用针对SULT2B1靶序列的慢病毒干扰载体感染H22细胞(MOI=100),Real-time PCR法检测SULT2B1及上皮与间质标志分子ZO-1、vimentin、fibronectin、β-catenin的mRNA表达水平。结果与对照组相比,干扰SULT2B1可使H22细胞上皮标志因子ZO-1mRNA表达水平增高,间质标志因子vimentin和fibronectin的mRNA表达水平降低(P<0.05),而β-catenin mRNA的表达水平并无显著变化(P>0.05)。结论干扰SULT2B1通过上调ZO-1,下调vimentin和fibronectin的mRNA表达影响H22细胞的上皮间质化。

干扰SULT2B1对Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及机制研究

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法SULT2B1慢病毒干扰载体感染Hepa1-6细胞(MOI=100),Real-time PCR检测其干扰效果。采用流式细胞仪通过Annexin V-APC/7-ADD染色检测干扰SULT2B1后Hepa1-6细胞凋亡率的改变,Western blot检测FAS和p-JNK的蛋白表达水平。结果构建的SULT2B1干扰载体可显著抑制Hepa1-6细胞中SULT2B1的表达(P<0.05)。Hepa1-6细胞中干扰SULT2B1后其凋亡率较对照组相比显著增加(P<0.05),干扰SULT2B1后可显著增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平(P<0.05)。结论干扰SULT2B1可促进Hepa1-6细胞的凋亡,其作用主要与增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平有关。

磺基转移酶SULT在疾病中的作用

硫酸化(sulfation)是人体内的主要共轭途径之一,它负责脱毒并从宿主体内清除有毒外源性化学物质和内源性小分子。人体内硫酸化反应主要由胞浆磺基转移酶(sulfotransferase,SULT)超家族成员催化的,此反应对于维持体内内源性小分子与外源性化合物的稳态具有重要作用。本文结合国内外关于SULT的报道,综述了SULT对癌症、脂质代谢紊乱等疾病的重要作用,最后对SULT的发展趋势和应用前景做出了展望。

自拟利胆汤结合西药治疗妊娠期肝内胆汁淤积症临床疗效及对血清sICAM-1、SULT2A1的影响

目的观察自拟利胆汤结合西药治疗妊娠期肝内胆汁淤积症临床疗效及对血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、硫酸基转移酶2A1(SULT2A1)的影响。方法采用信封密封法将90例妊娠期肝内胆汁淤积症患者分为两组,对照组给予西医常规治疗,实验组给予自拟利胆汤结合西药治疗,比较两组患者治疗效果及治疗前后肝功能、胆汁酸及血清sICAM-1、SULT2A1水平。结果实验组总有效率为93.33%,高于对照组的82.22%(P<0.05)。两组治疗10 d后谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(DB)、总胆汁酸(TBA)较治疗前下降,且实验组治疗10 d后AST、ALT、DB、TBA低于对照组(均P<0.05)。两组治疗10 d后s ICAM-1均较治疗前降低,SULT2A1较治疗前提高,且实验组治疗10 d后s ICAM-1低于对照组,SULT2A1高于对照组(均P<0.05)。实验组新生儿1 min Apgar评分<7分、羊水污染Ⅲ度、剖宫产的例数低于对照组(P<0.05)。结论自拟利胆汤结合西药治疗妊娠期肝内胆汁淤积症,能够控制病情,改善肝功能,降低TBA,具有显著效果,其作用机制可能与SULT2A1升高、sICAM-1降低有关。

SULT4A1基因4个位点在中国北方汉族群体中的分布及法医学意义

目的调查SULT4A1基因rs549267654、rs2285162、rs963263和ss2137544034位点在中国北方汉族群体的多态性分布,评价其法医学应用价值。方法采用Sanger测序及PCR-RFLP技术对226例中国北方汉族健康无关个体样品进行检测,应用Haploview4.2进行数据的统计分析。结果rs549267654、rs2285162和rs963263位点的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,个人识别力分别为0.649、0.619和0.647,非父排除率分别为0.187、0.177和0.187。同时,发现1个新的6碱基插入/缺失位点ss2137544034。结论rs549267654、rs2285162和rs963263位点在中国北方汉族人群中具有较好的遗传多态性,可用于法医学个人识别与亲权鉴定。

磺基转移酶SULT家族及其在药物代谢中的作用

硫酸化(Sulfation)是人体内主要的共轭途径之一,它们是由胞浆磺基转移酶(sulfotransferase,SULT)超家族成员催化的重要Ⅱ期反应,在人体代谢中具有重要作用。本文总结了目前人体内存在的13种SULT的组织分布和功能的相关信息,并结合目前国内外相关报道,综述了SULT在几种临床药物代谢中的影响与作用,期待为今后的药物研发和临床研究提供一定的帮助。

SULT2B1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨硫酸基转移酶2B1(SULT2B1)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法选择山东阳光融和医院采用外科手术治疗的结直肠癌患者160例。采用PCR、免疫组化法测定结直肠癌组织、癌旁组织及淋巴结组织中SULT2B1蛋白表达情况。分析SULT2B1蛋白与结直肠癌患者临床病理特点及预后的关系。结果 SULT2B1 mRNA在癌组织和转移淋巴结中表达水平均高于癌旁组织和非转移淋巴结组织(P<0.05),SULT2B1蛋白阳性111例(69.4%)高于癌旁组织52例(32.5%)(P<0.05)。SULT2B1蛋白与结直肠癌患者的年龄、TNM分期、分化程度、浸润水平、淋巴结和远处转移情况相关(P<0.05)。与结直肠癌患者的性别、脉管受累、肿瘤直径无关(P≥0.05)。结直肠癌患者的5年总生存率为51.78%,其中SULT2B1阴性患者为63.57%,阳性患者为28.75%,对比阳性表达者,SULT2B1阴性表达患者的生存时间更长(P<0.05)。结论 SULT2B1在结直肠癌组织中呈高表达,SULT2B1阳性表达患者预后差。