期刊文献+
共找到14篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
SUMO-1基因在肝癌中的表达及意义 被引量:7
1
作者 郭武华 袁丽华 +1 位作者 肖志华 张吉翔 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期3115-3117,共3页
目的研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义。方法采用RT-PCR、Westernblot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达。结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细... 目的研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义。方法采用RT-PCR、Westernblot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达。结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细胞SMMC-7721、Hep3B、HepG2及肝癌标本中均明显高表达,而癌旁肝组织中SUMO-1基因明显低表达,肝癌组织和癌旁肝组织中SUMO-1表达差异有统计学意义(P<0.001)。结论SUMO-1基因在肝癌中高表达,SUMO-1可能为肝癌诊断和治疗中的一个靶点。 展开更多
关键词 sumo-1 基因表达 肝癌
下载PDF
利用SUMO技术表达可溶性的拟南芥AtRD22蛋白 被引量:5
2
作者 唐玉林 米子岚 +1 位作者 钟活权 江年琼 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期610-616,共7页
为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-R... 为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-RD22和p SUMO-RD22,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行AtRD22蛋白的表达.在0.3 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dithiogalactopyranoside,IPTG)诱导下,探索不同培养温度和诱导时间对可溶性蛋白表达的影响.结果表明,在实验条件下,转化p ET32a-RD22的重组菌表达AtRD22蛋白的总量高于转化p SUMO-RD22的重组菌,但后者的可溶性AtRD22蛋白表达量明显高于前者.当诱导温度为28或16℃,时间分别为6.0或8.0 h以上时,转化p SUMO-RD22的重组菌中可溶性目的蛋白的表达量相对较大.为进一步在体外研究AtRD22蛋白质的结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 蛋白质工程 拟南芥AtRD22 融合标签 小泛素相关修饰物 基因克隆 原核表达
下载PDF
SUMO-1 mRNA诊断肝癌的价值研究 被引量:1
3
作者 郭武华 袁丽华 +3 位作者 肖志华 罗良平 余婷 张吉翔 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2098-2099,2102,共3页
目的研究肝癌中SUMO-1mRNA表达水平及诊断肝癌的应用价值。方法采用RT-PCR检测外科切除的肝癌、癌旁肝组织、肝血管瘤及肝局灶性结节性增生标本中SUMO-1mRNA表达水平,并比较肝癌与癌旁肝组织,甲胎蛋白(AFP)阴性与阳性的肝细胞性肝癌,... 目的研究肝癌中SUMO-1mRNA表达水平及诊断肝癌的应用价值。方法采用RT-PCR检测外科切除的肝癌、癌旁肝组织、肝血管瘤及肝局灶性结节性增生标本中SUMO-1mRNA表达水平,并比较肝癌与癌旁肝组织,甲胎蛋白(AFP)阴性与阳性的肝细胞性肝癌,肝良、恶性肿瘤之间SUMO-1mRNA表达水平的差异。结果 SUMO-1mRNA在肝癌及癌旁肝组织中均有表达,但在肝癌中的表达水平明显高于癌旁肝组织;在不同AFP水平的肝细胞性肝癌中SUMO-1mRNA均高表达,差异无统计学意义;在肝血管瘤及肝局灶性结节性增生中SUMO-1mRNA也有表达,但表达水平明显低于肝癌。结论在不同AFP水平的肝细胞性肝癌中SUMO-1mRNA均高表达,而在癌旁肝组织及肝良性肿瘤中表达较低,SUMO-1mRNA可作为诊断肝癌的一个重要标志物。 展开更多
关键词 sumo-1 基因 MRNA 肝肿瘤 诊断
下载PDF
SUMO-1 siRNA对肝癌细胞SMMC-7721 p53基因表达的影响 被引量:2
4
作者 郭武华 袁丽华 +3 位作者 肖志华 罗良平 余婷 张吉翔 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第20期2090-2094,共5页
目的:研究肝癌细胞SMMC-7721中SUMO-1基因对突变型p53基因表达的影响,及SUMO-1基因对肝癌细胞增殖的作用.方法:通过将有效的人工合成的SUMO-1 siRNA转染肝癌细胞SMMC-7721后沉默SUMO-1基因的表达.通过RT-PCR及Western blot实验来观察SUM... 目的:研究肝癌细胞SMMC-7721中SUMO-1基因对突变型p53基因表达的影响,及SUMO-1基因对肝癌细胞增殖的作用.方法:通过将有效的人工合成的SUMO-1 siRNA转染肝癌细胞SMMC-7721后沉默SUMO-1基因的表达.通过RT-PCR及Western blot实验来观察SUMO-1基因表达下调后对SMMC-7721中突变型p53基因表达的影响.通过MTT实验来检测SUMO-1siRNA转染SMMC-7721后在24、48及72h对细胞增殖的影响.结果:在SMMC-7721中,SUMO-1和突变型p53基因均高表达.SUMO-1基因表达下调后,SMMC-7721中突变型p53基因在mRNA及蛋白水平同步表达下调,24、48及72h表达下调率分别为5.73%±0.61%、69.43%±1.22%及57.71%±0.94%.细胞增殖明显受到抑制,24、48及72hSMMC7721增殖抑制率分别为70.96%、71.57%及81.56%.结论:在转录水平,SUMO-1基因控制突变型p53基因的表达,并和突变型p53基因共同控制SMMC-7721细胞的增殖. 展开更多
关键词 sumo-1 P53 基因 突变 肝癌
下载PDF
利用SUMO表达系统高效表达猪O型口蹄疫病毒VP0、VP1、VP3基因 被引量:3
5
作者 宋妮 温永俊 +1 位作者 王凤雪 武华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期61-65,共5页
根据GenBank中公布的猪O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)全基因合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因,同时设计了扩增FMDV结构蛋白VP0、VP1和VP3基因的引物。以P1基因为模板,分别经PCR扩增获得FMDV VP0、VP1和VP3基因。... 根据GenBank中公布的猪O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)全基因合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因,同时设计了扩增FMDV结构蛋白VP0、VP1和VP3基因的引物。以P1基因为模板,分别经PCR扩增获得FMDV VP0、VP1和VP3基因。扩增产物克隆于Blunt载体中,酶切后将目的片段连接到原核表达载体SUMO中,构建重组表达质粒SUMO-VP0、SUMO-VP1和SUMO-VP3,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳可见融合蛋白均获得高效表达,融合蛋白表观分子质量分别约为55、48和40 ku。在IPTG浓度为1.0 mmol/L,温度为37℃,诱导5 h时融合蛋白表达量最大。Western blotting结果表明,融合蛋白均可被FMDV阳性血清识别,反应原性良好。 展开更多
关键词 猪O型口蹄疫病毒 VP0、VP1、VP3基因 sumo 高效表达
下载PDF
利用SUMO表达系统高效可溶性表达鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因 被引量:5
6
作者 曲栗 尹杰超 +7 位作者 李宁 刘生伟 傅俊华 姚文兵 谷学佳 郝建权 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期199-202,共4页
为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-V... 为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-VP3,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)PlysS,经IPTG诱导,得到可溶性表达的融合蛋白SUMO-VP3。结果表明,该融合蛋白表达量占细菌总蛋白35%,经HisTrapTMFF crude column层析柱纯化后的SUMO-VP3蛋白可被SUMO蛋白酶Ⅰ有效切割,获得无标签的VP3蛋白,经western blot鉴定表明该VP3蛋白具有良好的抗原性。本研究表明pHisSUMO Express表达系统是高效可溶表达外源蛋白的有效工具,所表达的病毒蛋白具有良好的抗原性,为病原诊断抗原的研究和制备提供有效表达系统。 展开更多
关键词 sumo 高效可溶表达 鸡传染性法氏囊病病毒 VP3基因
下载PDF
SUMO-1基因在胆囊癌中的表达及意义 被引量:2
7
作者 张文兴 张阳德 彭健 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期35-37,共3页
目的研究胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达及意义。方法采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达。结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-... 目的研究胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达及意义。方法采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达。结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996、NOZ及胆囊癌标本中均明显高表达,而胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因表达明显低,胆囊癌组织和胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1表达有明显的差异(P<0.001)。结论 SUMO-1基因在胆囊癌中高表达,SUMO-1可能为胆囊癌诊断和治疗中的一个潜在的靶点。 展开更多
关键词 sumo-1基因 MRNA水平 蛋白水平 胆囊癌
下载PDF
OsSCE1 Encoding SUMO E2-Conjugating Enzyme Involves in Drought Stress Response of Oryza sativa 被引量:3
8
作者 Dini NURDIANI Dwi WIDYAJAYANTIE Satya NUGROHO 《Rice science》 SCIE CSCD 2018年第2期73-81,共9页
Small ubiquitin-like modifier(SUMO)-conjugating enzymes are involved in post-translational regulatory processes in eukaryotes, including the conjugation of SUMO peptides to protein substrate(SUMOylation). SUMOylation ... Small ubiquitin-like modifier(SUMO)-conjugating enzymes are involved in post-translational regulatory processes in eukaryotes, including the conjugation of SUMO peptides to protein substrate(SUMOylation). SUMOylation plays an important role in improving plant tolerance to abiotic stress such as salt, drought, heat and cold. Herein, we reported the isolation of OsSCE1(LOC_Os10 g39120) gene encoding a SUMO-conjugating enzyme from rice(Oryza sativa cv. Nipponbare) and its functional validation in response to drought stress. The E2 enzyme, Os SCE1, is one of three key enzymes involved in the conjugation of SUMO to its target proteins. Activated SUMO is transferred to the cysteine of an E2 enzyme and then to the target lysine residue of the substrate, with or without the help of an E3 SUMO ligase. Expression of OsSCE1 was strongly induced by polyethylene glycol 6000(PEG6000) treatment, which suggested OsSCE1 may be involved in the drought stress response. Overexpression of OsSCE1(OsSCE1-OX) in Nipponbare reduced the tolerance to drought stress. Conversely, the drought tolerance was slightly improved by the knockdown of OsSCE1(OsSCE1-KD). These results were further supported by measurement of proline content in OsSCE1-OX and OsSCE1-KD transgenic lines under induced drought stress, which showed OsSCE1-KD transgenic lines accumulated higher proline content than the wild type, whereas OsSCE1-OX line had lower proline content than the wild type. These findings suggested OsSCE1 may play a role as a negative regulator in response to drought stress in rice. 展开更多
关键词 ORYZA SATIVA drought stress small ubiquitin-like MODIFIER sumo-conjugating enzyme PROLINE content gene expression
下载PDF
GFP-SUMO-3融合蛋白的重组及其在LNCaP细胞中的表达和定位
9
作者 伍贤军 缪璇 +3 位作者 程秀 王妍青 辻一郎 李晓萌 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1024-1027,1175,共5页
目的:构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-N1-SUMO-3,观察GFP-SUMO-3融合蛋白在人前列腺癌细胞LNCaP中的表达与定位。方法:采用PCR扩增SUMO-3基因全长cDNA编码区序列,克隆入pEGFP-N1真核表达载体。重组质粒pEGFP... 目的:构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-N1-SUMO-3,观察GFP-SUMO-3融合蛋白在人前列腺癌细胞LNCaP中的表达与定位。方法:采用PCR扩增SUMO-3基因全长cDNA编码区序列,克隆入pEGFP-N1真核表达载体。重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3通过酶切和测序鉴定正确后,脂质体法将重组质粒转染至LNCaP中,利用GFP抗体通过Western blotting检测GFP-SUMO-3融合蛋白的表达,通过荧光显微镜观察其在细胞中的表达及分布。结果:重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定,得到大小分别为4 700和312bp的条带,与预期结果一致。测序结果显示,GFP在N端,是阅读框正确的SUMO-3的基因序列。在LNCaP细胞中过表达GFP-SUMO-3融合蛋白,Western blotting得到相对分子质量为39 000的蛋白表达条带,与GFP-SUMO-3大小相符。荧光显微镜观察,转染重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3的细胞中呈绿色荧光,主要在细胞核内表达,与DAPI重合。结论:成功构建重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3,并表达代绿色荧光蛋白的SUMO-3融合蛋白,鉴定出SUMO-3在LNCaP细胞中的核定位性。 展开更多
关键词 GFP-sumo-3融合蛋白 重组蛋白质类 LNCAP细胞 基因表达
下载PDF
不同生物型BVDV感染对MDBK细胞类泛素基因转录水平的影响 被引量:5
10
作者 韩玉霞 孟露萍 +3 位作者 孙志华 刘娟 张辉 陈创夫 《动物医学进展》 北大核心 2015年第12期11-17,共7页
探讨牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染对牛胚肾细胞(MDBK)类泛素基因转录水平的影响。对致细胞病变型(cp型)BVDV标准株NADL毒株及非致细胞病变型(ncp型)BVDV分离株shz 132毒株进行增殖,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)反应测定2种病毒拷贝数,按... 探讨牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染对牛胚肾细胞(MDBK)类泛素基因转录水平的影响。对致细胞病变型(cp型)BVDV标准株NADL毒株及非致细胞病变型(ncp型)BVDV分离株shz 132毒株进行增殖,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)反应测定2种病毒拷贝数,按照Reed-Muench法测定BVDV NADL病毒TCID50值。以100TCID50BVDV NADL病毒和同等拷贝数的BVDV shz 132病毒分别感染MDBK细胞不同时间(4、12、24、48h)后收集细胞,提取细胞总RNA,反转录得到cDNA。以cDNA为模板,采用特异性引物,通过RT-qPCR反应检测细胞类泛素基因SUMO1、SUMO2、SUMO3、Ubc9的转录水平。结果显示,致细胞病变型BVDV NADL感染MDBK细胞48h,引起细胞显著的病变,而非致细胞病变型BVDV shz 132感染不引起细胞病变。BVDV NADL和shz 132的病毒拷贝数分别是1.13×1011 copies/mL和1.77×1011 copies/mL,BVDV NADL的TCID50是10-4.9 TCID50/0.1mL。RT-qPCR分析显示,与对照组相比,2种BVDV病毒感染都能引起MDBK细胞SUMO1、SUMO2、SUMO3、Ubc9基因的相对表达量变化。在BVDV shz 132感染的细胞中,SUMO1、SUMO2、SUMO3的相对表达量在各个感染时间都高于或接近于BVDV NADL感染的细胞,且在感染后24h,以上3个基因的相对表达量下调,差异极显著(P<0.01);而Ubc9基因的相对表达量则低于或接近于BVDV NADL感染的细胞,且在感染后24h,其相对表达量上调,差异极显著(P<0.01)。结果表明,BVDV感染调控了MDBK细胞SUMO系统,提示细胞SUMO系统参与了BVDV在胞内的活动,且这种调控作用与病毒的生物型存在密切联系。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 牛胚肾细胞 类泛素基因
下载PDF
大黄鱼ubc9基因的克隆和组织表达 被引量:6
11
作者 周鹏 张子平 +2 位作者 王艺磊 谢芳靖 邹志华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期76-82,共7页
类泛素化(sumoylation)是一种重要的转录后修饰过程。激活的SUMO(small ubiquitin-related modifer)和E2结合酶结合稳定后共价结合到底物上,从而完成对底物的类泛素化。UBC9(ubiquitin-conjugating enzyme)作为惟一的E2结合酶,在完成类... 类泛素化(sumoylation)是一种重要的转录后修饰过程。激活的SUMO(small ubiquitin-related modifer)和E2结合酶结合稳定后共价结合到底物上,从而完成对底物的类泛素化。UBC9(ubiquitin-conjugating enzyme)作为惟一的E2结合酶,在完成类泛素化中起着重要作用。从已构建的大黄鱼性腺线性化cDNA文库中筛选出ubc9同源片段,用SMART-RACE方法克隆得到了846bp的全长cDNA序列。该序列编码一个由158个氨基酸组成的蛋白。该蛋白序列与已知的UBC9高度同源,含UBC保守结构域和UBC9激活位点区域。实时定量PCR分析ubc9基因在各组织器官的表达,结果发现,ubc9基因在大黄鱼的性腺中大量表达。推测UBC9在大黄鱼性腺发育中起重要的生物学作用。 展开更多
关键词 ubc9基因 小泛素相关修饰物 RT-PCR 大黄鱼
下载PDF
石斛兰SIZ1基因的克隆及序列分析 被引量:2
12
作者 王亚琴 钟开新 +1 位作者 阳成伟 梁山 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2011年第2期119-123,共5页
首次从石斛兰中克隆到1个类SIZ1基因,命名为DenSIZ1,运用生物信息学软件分析与预测其蛋白的理化性质、结构组成、二级结构、功能结构域与亚细胞定位.结果表明,DenSIZ1可能属于PIAS家族SUMO E3连接酶,包括3个重要的功能结构域SAP、PHD和z... 首次从石斛兰中克隆到1个类SIZ1基因,命名为DenSIZ1,运用生物信息学软件分析与预测其蛋白的理化性质、结构组成、二级结构、功能结构域与亚细胞定位.结果表明,DenSIZ1可能属于PIAS家族SUMO E3连接酶,包括3个重要的功能结构域SAP、PHD和zf-MIZ,且该蛋白可能定位于细胞核中,与PIAS家族有较高的同源性. 展开更多
关键词 石斛兰 sumo E3连接酶 基因克隆 序列分析
下载PDF
SUMO基因的内在原核启动子活性及其在大肠杆菌蛋白表达系统中的应用 被引量:4
13
作者 亓燕红 邹竹荣 +2 位作者 邹华英 范云六 张春义 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期952-962,共11页
SUMO融合系统已成为目前大肠杆菌重组蛋白生产的重要手段,但在载体构建效率和蛋白可溶性等方面仍有待改进。本研究在PCR克隆酿酒酵母SUMO基因Smt3(Sm)时意外发现Sm具有组成型原核启动子活性;而且经软莓BPROM程序预测发现大多数物种SUMO... SUMO融合系统已成为目前大肠杆菌重组蛋白生产的重要手段,但在载体构建效率和蛋白可溶性等方面仍有待改进。本研究在PCR克隆酿酒酵母SUMO基因Smt3(Sm)时意外发现Sm具有组成型原核启动子活性;而且经软莓BPROM程序预测发现大多数物种SUMO基因编码区都具有依赖σ70的原核启动子。进一步通过整合Sm启动子和Sm 3′末端StuⅠ位点特性以及引入His标签和超酸增溶标签,构建了基于Sm’-LacZα融合基因的一系列通用克隆表达载体,并通过蓝白斑筛选和SDS-PAGE分析进行了多个靶蛋白基因的克隆和表达,结果表明实现了基因表达载体的快速构建、蛋白高可溶性表达和关联蛋白的共表达等目标。因此,集成诸多特性而改良的SUMO融合技术可以成为大肠杆菌蛋白表达系统的有力工具,建立的共表达载体系统还可以用作研究细胞内蛋白间的相互作用。 展开更多
关键词 sumo基因 原核启动子 sumo融合系统 共表达 大肠杆菌
原文传递
新发现的1型糖尿病相关基因 被引量:4
14
作者 沈洁 谷卫 《国际内分泌代谢杂志》 2006年第1期40-42,共3页
1型糖尿病(T1DM)是一种由T细胞介导的自身免疫性疾病,与多种基因有关。除了位于人白细胞抗原基因区的IDDM1和位于人胰岛素基因区的IDDM2被公认为是T1DM的主效基因外,不断有新的潜在致病基因被发现。几个参与自身免疫反应的重要因子的编... 1型糖尿病(T1DM)是一种由T细胞介导的自身免疫性疾病,与多种基因有关。除了位于人白细胞抗原基因区的IDDM1和位于人胰岛素基因区的IDDM2被公认为是T1DM的主效基因外,不断有新的潜在致病基因被发现。几个参与自身免疫反应的重要因子的编码基因如维生素D受体、白细胞介素6、白细胞介素12B、PTPN22、SUMO4以及Tbet相继在一些人群研究中被发现与T1DM相关,本文就针对这些相关性研究结果及其中可能涉及的免疫学机制作一综述。 展开更多
关键词 1型糖尿病 基因 受体 维生素D 白细胞介素-6 sumo-4
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部