多囊卵巢综合征中高雄激素诱导的颗粒细胞自噬激活作用

目的探讨高雄激素睾酮(testosterone)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法分离培养卵巢功能正常的不孕患者(对照组)及PCOS不孕患者(PCOS组)的卵巢颗粒细胞,分别用10μmol/L睾酮处理24 h;将人卵巢颗粒细胞株KGN培养至3×10^(5)个,分别进行小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)及小泛素样修饰物(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异肽酶3(SUMO specific peptidase 3,SENP3)质粒转染;RT-PCR法检测SENP3基因mRNA转录水平,Western blot法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及SENP3蛋白表达水平。结果与对照组比较,PCOS组卵巢颗粒细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P <0.01),P62蛋白表达水平显著降低(P <0.01);两组患者卵巢颗粒细胞经睾酮处理后,LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P均<0.05),P62蛋白表达水平显著降低(P均<0.05)。与对照组比较,PCOS组卵巢颗粒细胞中SENP3 mRNA转录及蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05)。KGN细胞经siRNA干扰,LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平上调(P <0.01),P62蛋白表达水平下降(P <0.05);KGN细胞经SENP3质粒转染,LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平无明显变化(P> 0.05),P62蛋白表达水平上调(P <0.01)。PCOS组卵巢颗粒细胞经睾酮处理后,SENP3蛋白表达水平显著下降(P <0.05)。结论PCOS患者颗粒细胞有一定程度的自噬激活,且高雄激素参与了PCOS患者颗粒细胞的自噬激活过程,其作用机制可能与高雄激素抑制颗粒细胞中SENP3蛋白表达有关。