以突触囊泡蛋白2A(SV2A)为靶点的抗癫痫药物研究进展

抗癫痫药物是癫痫患者的首选治疗癫痫手段。全球癫痫发病率的不断提高,给国家、个人和家庭生活等带来较大经济负担。随着越来越多的癫痫患者得到规范化治疗,使得抗癫痫药物临床需求越来越大。突触囊泡蛋白2A(synaptic vesicle protein 2A,SV2A)通过调节神经递质的释放,来维持脑内兴奋性神经递质和抑制性神经递质的平衡。随着SV2A确证为新的抗癫痫靶点,左乙拉西坦和布瓦西坦的上市,抗癫痫靶点和抗癫痫新药进一步丰富。本文围绕抗癫痫药物靶点SV2A以及以SV2A为靶点的上市及在研药物做概述,并对其构效关系进行总结。

SV2A基因真核表达质粒构建及其在HEK293T细胞中的表达

目的构建鼠突触囊泡蛋白2A(SV2A)基因的真核表达质粒,并瞬时转染至人胚肾细胞(HEK293T)中,对其表达进行鉴定。方法以APP/PS1双转基因小鼠海马组织的cDNA为模板,扩增得到长2239 bp的SV2A基因编码序列,将此序列插入到真核表达载体p3×Flag-CMV-10多克隆位点区域中,得到真核表达质粒p3×Flag-CMV-10-SV2A,转化后挑取单克隆菌落经双酶切鉴定后送公司测序,将构建成功的重组质粒转染至HEK293T细胞中,利用蛋白质印迹法(Western blot)检测SV2A基因的表达情况。结果成功构建p3×Flag-CMV-10-SV2A重组质粒,并在转染至HEK293T细胞后,验证了相应蛋白表达。结论利用分子克隆技术成功构建了p3×Flag-CMV-10-SV2A真核表达质粒并在HEK293T细胞中正确表达,为后续实验奠定了基础。

新型脑突触密度核素分子探针^(18)F-SynVesT-1放射性标记、质量控制与显像分析

突触密度活体可视化评估与定量分析在神经和精神疾病的诊断、治疗监测和机制研究方面具有广阔的临床应用前景。突触前膜囊泡蛋白2A(synaptic vesicle protein 2A,SV2A)可反映突触密度情况并与神经元兴奋性改变、致痫网络形成和癫痫耐药密切相关。为可视化评估突触密度,本研究采用GE Tracerlab FXFN模块高效合成与标记特异性靶向SV2A新型PET核素分子探针^(18)F-SynVesT-1,通过理化性质、稳定性、比活度、细菌内毒素等检测技术进行质量控制,利用癫痫动物模型对^(18)F-SynVesT-1显像效果进行验证。结果显示,Tracerlab FXFN模块能实现^(18)F-SynVesT-1的高效合成,未校准放化产率为(11.4±2.6)%,且产品溶液满足临床及注射要求。本研究合成的^(18)F-SynVesT-1质控表现良好,可用于活体脑突触显像、突触密度定量评估及致痫灶异常检测分析。

突触囊泡膜蛋白2B在胶质瘤研究中的进展

在中枢神经系统肿瘤中,发病率最高的是胶质瘤。目前对于胶质瘤的治疗有着较为规范的流程,但由于该肿瘤向周围浸润的特点,胶质瘤患者复发率较高且5年生存率仍然不够理想。突触囊泡膜蛋白2B (SV2B)作为一种跨膜糖蛋白在细胞内分泌、递质释放等功能中展现了重要作用。除此之外,最近越来越多的证据表明SV2B作为一种抑制性因素在乳腺癌与胶质瘤的发展过程中展现了重要的调节作用。综上所述,我们总结了突触囊泡膜蛋白2B在胶质瘤中的功能作用、分子机制和临床前景,并提出该蛋白在未来可能成为胶质瘤患者治疗和预后的有用目标。

杏仁核点燃癫痫大鼠模型海马组织突触囊泡蛋白2A的表达变化

目的探讨杏仁核点燃癫痫发生过程中突触囊泡蛋白2A(synaptic vesicle protein 2A,SV2A)在海马组织中表达的动态变化。方法建立杏仁核点燃癫痫大鼠模型,治疗组予左乙拉西坦(levetiracetam,LEV)灌胃,用荧光定量PCR(RealTime-PCR)测定不同时期SV2A mRNA的表达,免疫组织化学方法检测SV2A蛋白的表达。结果 SV2A在1w时表达降低,之后逐渐升高,到8w时达高峰,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);用药前后相比,除1w组外,2w组、4w组、8w组用相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SV2A的表达与癫痫的发作有关。

Sv2/Rv3指数、V_2导联移行比在流出道PVB、VT起源部位鉴别中的应用比较

目的探讨Sv2/Rv3指数、V2导联移行比在流出道室性早搏(PVB)或室性心动过速(VT)起源部位鉴别中的应用价值。方法选择成功射频消融的流出道PVB或VT患者60例,根据消融靶点确定为左心室起源15例、右心室起源45例。回顾性分析患者12导联心电图资料,计算Sv2/Rv3指数和V2导联移行比,并比较二者鉴别流出道PVB或VT起源部位敏感性的差异。结果 Sv2/Rv3指数鉴别流出道PVB或VT患者起源部位的敏感性为88.3%(53/60),起源部位为左心室13例(86.7%)、右心室40例(88.9%);V2导联移行比鉴别流出道PVB或VT患者起源部位的敏感性为85.0%(51/60),起源部位为左心室12例(80.0%)、右心室39例(86.7%);两种指标鉴别起源部位的敏感性比较,P均>0.05。结论 Sv2/Rv3指数、V2导联移行比均可较好地鉴别流出道PVB或VT的起源部位。

一种C^4ISR系统通信网络结构优化方法

针对目前基于图论的网络优化方法的不足,基于C4ISR体系结构产品中的系统和服务通信描述(SV 2)的一般表示,给出了C4ISR系统通信网络结构的形式化表示方法,建立了优化模型。根据混合智能算法的基本方法,结合SV 2的特点设计了同时考虑网络节点和链接的随机模拟及遗传迭代过程,给出优化模型的求解方法,并通过实验检验了方法的有效性。

线上线下混合式教学的SV2QR方法及实践

为解决线上线下教学交融效果的最优化和科学有序的教学进程,该文凝练并提出由一条主线、四个环路组成的“SV2QR”混合式教学方法,即:纵览预习(Survey)—视频学习(Video)—问题及解答(Question)—研读(Read)—作业测验(Quiz)—复习巩固提升(Review)。通过线上学习发现问题、线下解决问题并强化和提升基础,从而使教与学相结合形成一个完整的教学过程。该方法应用于数理基础要求高的大气科学专业数值天气预报课程的混合式教学中,显著提升了教学效果。

Sv2/Rv3指数、胸前导联移行区指数在鉴别左、右心室流出道VT/PVB中的应用价值

目的探讨Sv2/Rv3指数、胸前导联移行区指数在鉴别左、右室流出道室性心动过速(VT)/室性早搏(PVB)中的价值。方法 60例流出道VT/PVB患者,通过体表心电图检查测算Sv2/Rv3指数和胸前导联移行区指数,并以射频消融术中电生理检查结果为金标准,计算用Sv2/Rv3指数和胸前导联移行区指数定位VT/PVB起源部位的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果根据胸前导联移行区指数行VT/PVB定位,符合率为81.7%(49/60),其中对右室流出道VT/PVB的符合率为82.2%(37/45),对左室流出道VT/PVB的符合率为80%(12/15),敏感度80%,特异度93.2%,阳性预测值75%,阴性预测值93.2%。根据Sv2/Rv3指数行VT/PVB定位,符合率为85%(51/60)。其中对右室流出道VT/PVB的符合率为84.4%(38/45),对左室流出道VT/PVB的符合率为86.7%(13/15),敏感度86.7%,特异度93.3%,阳性预测值81.3%,阴性预测值95.4%。Sv2/Rv3指数、胸前导联移行区指数上述指标相比差异无统计学意义。结论 Sv2/Rv3指数、胸前导联移行区指数在鉴别左、右室流出道VT/PVB方面有较好的应用价值。

完全性左束支传导阻滞Sv3>Sv2、Rv6>Rv5对左心室肥大的诊断价值

目的 探讨 左束 支 传导 阻滞 合并 左 心室 肥大 心 电图 诊断 价 值。 方法 对 照 分 析 ５０ 例左 束 支 传 导 阻 滞 合 并 左 心 室 肥 大（ 观 察 组 ）与 ４０ 例 单 纯 完 全 性 左 束 支 传 导 阻 滞（ 对 照 组 ）的 心 电图 。 结 果 观 察 组 Ｒ ＋ＳⅢ、ＳⅢ＞Ｒ 、Ｓｖ３＞Ｓｖ２、Ｒｖ６＞Ｒ ｖ５、Ｓｖ１＋Ｖ５、Ｓｖ３＋Ｒ ｖ６、Ｓｖ１＋Ｓｖ６ 值 与 对 照 组 相 比 差 异 有 Ⅰ Ⅱ非 常显 著 性意 义（Ｐ＜０．０１）。Ｓｖ３＞２．７ｍ Ｖ ，敏感 性 为 ８９．２％ ，准 确性为 ８５．３％ ，特异 性为 ８７．９％ ；其 次 Ｓｖ３＞Ｓｖ２，敏 感性 为 ５８．０％ ，准 确性 为 ６１．０％ ，特 异性 为 ７３．７％ ； Ｓｖ３＋Ｒｖ６＞４．３ｍ Ｖ，敏 感性 为 ６８．８％ ，准 确 性 为 ６３．７％ ，特 异 性 为 ７４．１％ ； Ｒ ｖ６＞Ｒ ｖ５，敏 感 性 为 ５２．４％ ，准 确 性 为 ６０．４％ ，特 异 性 为 ７０．６％ 。 结 论 Ｓｖ３＞２．７ｍ Ｖ 、Ｓｖ３＋Ｒ ｖ６＞４．３ｍ Ｖ 、Ｓｖ３＞Ｓｖ２、Ｒ ｖ６＞Ｒｖ５、ＱＲ Ｓ 时 间 ＞０．１５ｓ是 合 并左 心室 肥 大的 有效 心 电图 参数 。

人SVOP基因的cDNA克隆及表达

SV2和SVOP都是大鼠中包含有12个跨膜结构域的突触小泡蛋白.笔者从人类大脑的cDNA文库中分离得到了一个类似于大鼠突触小泡蛋白SV2和SVOP的人类新基因的全长cDNA序列,它包含一个含有1 646个核苷酸的开放阅读框,编码一个含548个氨基酸的蛋白质.生物信息学分析表明:该基因定位在第12号染色体的12q24.12区域.Northern杂交结果表明:该基因只在人类大脑组织中表达,且与无脊椎动物线虫、疟蚊和果蝇的同源基因有50%的氨基酸同源性,与脊椎动物大鼠和小鼠的同源基因有90%以上的氨基酸同源性.

完全性左束支传导阻滞时SV_3>SV_2、RV_6>RV_5对左心室肥厚的诊断价值

目的 对 5 0例左束支传导阻滞 (LBBB)合并左心室肥厚 (LVH) (A组 )的心电图诊断 ,与 4 0例单纯完全性LBBB(B组 )对照。结果 A组RⅠ +SⅢ 、SⅢ >RⅡ 、SV2 、SV3、SV3>SV2 、RV6 >RV5、SV1 +RV5、S V3+RV6 、SV1 +SV6 等指标 ,与B组相比P <0 0 1 ,SV3>2 7mV ,敏感性为 89 2 %,准确性为 85 3%,特异性为 87 9%;其次为SV3>SV2 ,敏感性为 5 8 1 %,准确性为 6 1 6 %,特异性为 73 6 %;SV3+RV6 >4 3mV ,敏感性为 6 8 8%,准确性为 6 3 7%,特异性为 74 1 %;RV6 >RV5,敏感性为 5 2 4%,准确性为 6 0 4%,特异性为 70 6 %。结论 SV3、SV3+RV6 >4 3mV、SV3>SV2 、RV6 >RV5、QRS >0 1 5s是LBBB合并LVH的有效参数。

70SV2P1机组的研制

本文介绍了 70 SV2 P1机组的设计和制造要点 ,简述了该类机组在石油、化工行业中的应用方向 ,并通过具体实用展望其前景。

心电图对完全性左束支传导阻滞伴左心室肥大的诊断价值

目的探讨心电图对左束支传导阻滞(LBBB)合并左心室肥大(LVH)的诊断价值。方法分析30例LBBB合并LVH(A组)与30例单纯LBBB(B组)的心电图。结果A组SV3>SV2、SV1+RV5、SV1+RV6、SV3+RV6、QRS时间与B组比较有显著性意义(P<0.05)。SV3>2.7mV,敏感性为80%,特异性为75.3%,准确性为77.5%;SV3+RV6>4.3mV,敏感性为80%,特异性为60%,准确性为70%;SV3>SV2,敏感性为53.3%,特异性为86.7%,准确性为70%;QRS>0.15s,敏感性为53.3%,特异性为80%,准确性为67%。结论SV3>2.7mV、SV3+RV6>4.3mV、SV3>SV2、QRS时间>0.15s是LBBB合并LVH的有效心电图参数。

技嘉RX30SV2DP向低价PCI-E显卡市场冲击

随着PCI-E接口显卡的逐步普及，技嘉科技在新年到来之际．推出了其显卡热点产品——技嘉ATI RX300系列。这款型号为GV-RS30SV2DP的显卡采用了蓝色PCB．使用的ATi RX300显示核心采用最新工艺制程，通过技嘉的超静音，无风扇设计，非常符合家用环境。此款显卡由技嘉原G400显卡设计小组设计，用料上多采用了高品质电容和高能率电源控制器。随卡搭配的4片16bit TSOP封装现代显存颗粒，组成了128MB显存容量64bit显存带宽的显存单元，其默认的核心和显存频率为325MHz/400MHz。

599元RX30SV2DP低价冲击PCI-E显卡市场

技嘉推出PCI-E显卡市场主力产品RX30SV2DP．以599元的价格使得PCI-E显卡直接步入家庭用户市场．让PCI-E显卡终于低下了高贵的头。这款ATI RX300显卡——GV-RS30SV2DP，

台达工业自动化方案在电梯改造领域的应用

为了提高自动控制系统的可靠性和设备的工作效率,本人设计了一套以台达PLC为核心控制器的电梯自动控制系统,用来取代以往较复杂的继电器。系统的核心部分(控制部分)采用台达公司生产的DVPSV2型的PLC,因为核心控制部分采用的是软件程序控制,从而在保证电梯在正常运行要求下,大大提高了电梯故障检查和维修的方便性和容易性,同时还克服了手动操作带来的一些人为干扰因素,取得了良好的预期效果。

BCC-CPSv3-S2Sv2模式对中国区域降水和气温预测的性能评价

利用北京气候中心第3代气候模式预测业务系统的第2代次季节至季节预测子系统(Beijing Climate Centerclimate prediction system version 3-subseasonal to seasonal version 2,BCC-CPSv3-S2Sv2)模式发布的次季节至季节(sub-seasonal to seasonal,S2S)回算数据,从确定性预报和概率性预报这2方面对该模式降水和气温的预测性能进行系统评价,并与上一代北京气候中心第2代气候模式预测业务系统的第1代次季节至季节预测子系统(Beijing Climate Center-climate prediction system version 2-subseasonal to seasonal version 1,BCC-CPSv2-S2Sv1)模式和欧洲中期天气预报中心综合预报系统(European Centre for Medium-Range Weather Forecasts-integrated forecasting system,ECMWF-IFS)模式预测结果的表现对比,研究现有模式较上一代在预测表现方面是否有所提升,且其是否达到国际先进水平。结果表明:现有模式整体预测效果优于上一代,但差于ECMWF-IFS模式。在提前1周时,现有模式对降水和气温的预测技巧有明显改进,但在提前3、4周时,预测效果仍较差,降水预测相关系数的平均值在提前4周时为0.11。BCC-CPSv3-S2Sv2春季降水预测对青藏高原中部地区在各个起报时间始终有较好的预测效果,相关系数均大于0.4。此外,现有模式冬季降水预测表现与ECMWF-IFS模式相近。对于气温预测,提前4周时其在西北、华北部分区域的预测技巧比提前3周、甚至2周更高,表明模式能较好把握S2S尺度上气温预测的可预报性来源。从概率预报的表现来看,现有模式降水和气温预测的欠离散问题更突出,但均值误差变小。此外,现有模式降水预测对负异常事件的预测表现更好。

左乙拉西坦对小鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用

目的研究突触囊泡蛋白2A(SV2A)配体左乙拉西坦(LEV)对小鼠急性局灶性脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法实验第一部分:将20只SPF级C57BL/6小鼠分为三组:手术组(WT组,n=6),腹腔注射(150 mg/kg)LEV 60 min后手术组(WT-LEV组,n=8),假手术组(sham组,n=6),采用线栓法制作小鼠大脑中动脉闭塞缺血-再灌注模型后检测脑组织损伤情况。第二部分:体外进行C57BL/6小鼠海马神经元培养后通过氧糖剥夺建立缺血神经元模型,A组不添加上清液正常培养,作为对照组(n=3),B组添加野生型C57BL/6小鼠的CD8+T淋巴细胞激活后的上清液进行体外培养(n=3),C组添加穿孔素基因敲除C57BL/6 Prf1-/-小鼠的CD8+T淋巴细胞激活后的上清液进行体外培养(n=3),D组培养液中加入穿孔素抗体(n=3),分别检测各组神经元活性。结果 (1)脑缺血-再灌注后24 h:WT-LEV组小鼠神经行为评分(Longa评分)低于WT组(1.82±0.74 vs.2.81±1.03,P<0.05),WT-LEV组小鼠脑梗死体积百分比小于WT组[(11.29±2.30)%vs.(25.21±5.31)%,P<0.05],WT-LEV组小鼠脑组织凋亡细胞数比率低于WT组[(49.05±15.49)%vs.(77.73±12.77)%,P<0.05]。(2)离体培养缺血海马神经元24、36、48 h时,B组的MTT标记的阳性细胞相对数和A组相比均明显减少(24 h:76.93±4.48 vs.94.57±4.17,P<0.05;36 h:63.10±12.80 vs.94.57±4.45,P<0.05;48 h:41.33±9.76 vs.93.07±4.54,P<0.05);D组的MTT标记的阳性细胞相对数和A组相比在共同培养24 h和36 h均没有明显降低,在48 h时出现明显降低(76.53±6.73 vs.93.07±4.54,P<0.05);在共同培养从0 h开始至48 h时,C组的MTT标记的阳性细胞相对数和A组相比均没有明显减少。结论 SV2A配体LEV对小鼠急性脑缺血-再灌注的神经损伤有保护作用,其机制可能与通过抑制脑内穿孔素的释放有关。