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SV40LTAg基因永生化软骨细胞体外培养的生物学特性
被引量:
5
1
作者
王吉兴
姚军
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第12期1338-1340,1343,共4页
目的探讨永生化关节软骨细胞体外培养的生物学特性。方法用SV40LTAg(类人猿40病毒大T抗原)基因转染原代培养的关节软骨细胞,构建永生化关节软骨细胞系(immortalized cartilage chondrocytes)并体外培养,以正常关节软骨细胞(normal carti...
目的探讨永生化关节软骨细胞体外培养的生物学特性。方法用SV40LTAg(类人猿40病毒大T抗原)基因转染原代培养的关节软骨细胞,构建永生化关节软骨细胞系(immortalized cartilage chondrocytes)并体外培养,以正常关节软骨细胞(normal cartilage chondrocytes)作对照。倒置显微镜下观察永生化软骨细胞的形态学变化和增殖情况;应用甲苯胺蓝、番红O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,观察永生化软骨细胞在培养过程中酸性粘多糖(GAG)和胶原分泌情况。结果永生化关节软骨细胞体外培养呈贴壁单层生长,长期传代(50代)仍有很强的增殖能力,形态呈现多角形和三角形,GAG和胶原染色均呈阳性。结论构建的永生化关节软骨细胞在体外培养能长期维持软骨细胞的特征性表型。
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关键词
sv40ltag
基因永生化
软骨细胞
体外培养
生物学特性
基因转染
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职称材料
SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建
被引量:
2
2
作者
李兰娟
李君
+4 位作者
曹红翠
徐威
俞云松
盛吉芳
陈亚岗
《透析与人工器官》
2004年第4期17-21,共5页
目的 :建立人源性永生化肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 :利用 SV4 0 L Tag基因和真核表达载体 pc DNA3.1(- )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态...
目的 :建立人源性永生化肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 :利用 SV4 0 L Tag基因和真核表达载体 pc DNA3.1(- )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能。结果 :经 G4 1870 0~ 30 0μg/ ml筛选 ,4 2天后获一抗 G4 18永生化肝细胞系。该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长 ,体外培养可无限传代 ,具有分泌 AL B、ALT、AST及 LDH的功能 ,超微结构观察发现 ,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征 ,如较大的细胞核、胞浆内含有丰富的糖原颗粒、大量的线粒体和粗面内质网等。经 RT- PCR和 Western blot检测 ,转染肝细胞的 ALB m RNA阳性和细胞色素 P4 5 0 2 E1阳性。结论 :新建人源性肝细胞系与原代培养肝细胞具有类似的形态学特征和生物学功能。
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关键词
人源性肝细胞系
抗原介导
永生化肝细胞系
原代培养肝细胞
细胞色素P450
生物学功能
形态学特征
原代培养细胞
PCDNA3
真核表达载体
肝细胞移植
生物人工肝
脂质体转染
超微结构观
粗面内质网
脑死亡者
形态生长
体外培养
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职称材料
题名
SV40LTAg基因永生化软骨细胞体外培养的生物学特性
被引量:
5
1
作者
王吉兴
姚军
机构
第一军医大学南方医院脊柱骨科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第12期1338-1340,1343,共4页
文摘
目的探讨永生化关节软骨细胞体外培养的生物学特性。方法用SV40LTAg(类人猿40病毒大T抗原)基因转染原代培养的关节软骨细胞,构建永生化关节软骨细胞系(immortalized cartilage chondrocytes)并体外培养,以正常关节软骨细胞(normal cartilage chondrocytes)作对照。倒置显微镜下观察永生化软骨细胞的形态学变化和增殖情况;应用甲苯胺蓝、番红O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,观察永生化软骨细胞在培养过程中酸性粘多糖(GAG)和胶原分泌情况。结果永生化关节软骨细胞体外培养呈贴壁单层生长,长期传代(50代)仍有很强的增殖能力,形态呈现多角形和三角形,GAG和胶原染色均呈阳性。结论构建的永生化关节软骨细胞在体外培养能长期维持软骨细胞的特征性表型。
关键词
sv40ltag
基因永生化
软骨细胞
体外培养
生物学特性
基因转染
Keywords
immortalization
chondrocytes/cytology
cell culture
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建
被引量:
2
2
作者
李兰娟
李君
曹红翠
徐威
俞云松
盛吉芳
陈亚岗
机构
浙江大学医学院附属第一医院生物人工肝实验室
出处
《透析与人工器官》
2004年第4期17-21,共5页
文摘
目的 :建立人源性永生化肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 :利用 SV4 0 L Tag基因和真核表达载体 pc DNA3.1(- )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能。结果 :经 G4 1870 0~ 30 0μg/ ml筛选 ,4 2天后获一抗 G4 18永生化肝细胞系。该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长 ,体外培养可无限传代 ,具有分泌 AL B、ALT、AST及 LDH的功能 ,超微结构观察发现 ,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征 ,如较大的细胞核、胞浆内含有丰富的糖原颗粒、大量的线粒体和粗面内质网等。经 RT- PCR和 Western blot检测 ,转染肝细胞的 ALB m RNA阳性和细胞色素 P4 5 0 2 E1阳性。结论 :新建人源性肝细胞系与原代培养肝细胞具有类似的形态学特征和生物学功能。
关键词
人源性肝细胞系
抗原介导
永生化肝细胞系
原代培养肝细胞
细胞色素P450
生物学功能
形态学特征
原代培养细胞
PCDNA3
真核表达载体
肝细胞移植
生物人工肝
脂质体转染
超微结构观
粗面内质网
脑死亡者
形态生长
体外培养
Keywords
Bioartificial liver Hepatocyte C ell culture Immortalized cell line
sv40ltag
pcDNA3.1(-),RT-PCR Western blot
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
R692.303 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SV40LTAg基因永生化软骨细胞体外培养的生物学特性
王吉兴
姚军
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003
5
下载PDF
职称材料
2
SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建
李兰娟
李君
曹红翠
徐威
俞云松
盛吉芳
陈亚岗
《透析与人工器官》
2004
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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