富含血管基质层细胞自体脂肪颗粒移植纠正颜面萎缩的临床观察

目的:探讨富含血管基质层细胞(stromal vascular fraction,SVF)的自体脂肪颗粒注射移植在面部萎缩中的应用,达到提高脂肪存活率效果。方法:从2011年8月到2013年2月,我们选择6例半侧颜面萎缩的患者,于下腹部采用肿胀吸脂术获得自体颗粒脂肪,通过静置,纯化后采用多层次、多隧道、多点的注射方法,充填修复颜面部凹陷畸形。术后3个月随访,效果欠佳者即进行第二次手术脂肪颗粒移植,直至效果满意为止。结果:本组6例半侧颜面萎缩患者,随访3～12个月(平均6.5个月),充填后脂肪吸收率低,面部两侧基本达到对称,效果满意。结论:应用自体颗粒脂肪移植修复半侧颜面萎缩操作简单,创伤性小,效果理想,对于轻度中度的颜面萎缩患者而言,是一种较为理想的简单有效的治疗方法,值得推广。

脂肪组织中血管基质部分细胞向内皮细胞诱导分化的实验研究

目的探讨脂肪组织中血管基质部分(Stromal vascular fraction,SVF)细胞向内皮细胞诱导分化的方法。方法脂肪抽吸术获取人脂肪组织,消化法得到的细胞接种在FN包被的培养皿内,细胞培养,传至第2代,分诱导组和非诱导组进行培养。免疫细胞荧光分别检测诱导组和非诱导组的vWF表达;流式细胞仪分别检测诱导组和非诱导组的CD34、CD45、CD133和PECAM-1表达率;荧光显微镜观察细胞摄取DiI-ac-LDL的功能。结果诱导组细胞12d后呈现内皮细胞典型的铺路石样形态;免疫细胞荧光显示诱导组vWF表达阳性;荧光显微镜观察显示诱导组细胞具有摄取DiI-ac-LDL的功能;流式细胞仪检测显示诱导组PECAM-1阳性率为(67.41±13.35)%,明显高于非诱导组的(6.73±2.21)%(p<0.01),非诱导组CD34阳性率(72.39±13.45)%,明显高于诱导组的(16.06±3.86)%阳性率(p<0.01)。结论脂肪组织中血管基质部分细胞能够诱导分化为成熟内皮细胞,有望为血管组织工程提供新的种子细胞来源。

血管基质成分提升面部脂肪移植存活率的临床观察

目的：探讨间质血管基质成分（stromal vascular fraction,SVF）在颜面部微整形中的应用,降低移植的脂肪颗粒被吸收率.方法：笔者选择24例进行面部精雕脂肪填充的患者,于下腹部采用肿胀吸脂术获得自体颗粒脂肪,通过静置,纯化后,加自身血管基质细胞.混合液采用多点、多层、多部位的注射方法,精雕塑型颜面部.结果：术后随访12～24个月,22例效果满意,面部两侧基本达到对称,脂肪颗粒基本上没有被吸收,不必进行第二次脂肪填充手术.而46例对照组单纯进行脂肪填充的患者均有不同程度的脂肪被吸收,其中有34例需要进行第二次脂肪填充.结论：血管基质细胞可以提高自体颗粒脂肪的存活率,面部脂肪填充可以一次成形,减少手术次数.

番石榴叶提取物调节白色脂肪组织棕色化作用机制研究

目的:探究番石榴叶提取物调节脂肪细胞分化的作用机制。方法:6周龄雄性SPF级db/db小鼠24只、同龄C57BL/6J正常组小鼠6只,将符合纳入标准的db/db小鼠根据体重、血糖随机分为模型组和番石榴叶提取物高剂量组、番石榴叶提取物中剂量组、番石榴叶提取物低剂量组,并将番石榴叶提取物按高、中、低剂量进行灌胃,于4周后空腹脱臼处死所有小鼠,分别取后腿腓肠肌组织、皮下脂肪组织进行原代成肌细胞、原代脂肪组织SVF细胞的培养、接种和传代。培养48 h后收集细胞并提取蛋白,Western blot法检测各组成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白和各组脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白的表达。结果:第4周时,与模型组小鼠相比,番石榴叶提取物高剂量组小鼠体重、血糖、低密度脂蛋白降低(均P<0.05)。番石榴叶提取物高剂量组小鼠成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白表达升高,脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白表达较模型组升高(均P<0.05)。结论:番石榴叶提取物高剂量可通过促进白色脂肪细胞向棕色脂肪细胞分化,提高棕色脂肪水平,从而通过增加机体的能量代谢来调节脂质代谢。

细胞辅助的自体脂肪移植术治疗先天性乳房发育不良

目的:观察CAL技术治疗先天性乳房发育不良的临床效果。方法:肿胀麻醉下,50ml注射器负压抽吸身体赘积部位的脂肪,生理盐水反复冲洗,静置后过滤除去液体和油状物,700rpm离心3mi n,弃上清。将其中半量的脂肪颗粒用来抽提富含ADSC的自体SVFs,并与剩余脂肪颗粒充分混合后,注射至乳房后间隙及皮下,每次单侧注射量100～150ml,间隔3～6个月。结果:采用CAL技术治疗先天性乳房发育不良36例,共72侧乳房。其中7例14侧填充1次,24例48侧填充2次,5例10侧填充3次,均达到理想效果。结论:细胞辅助的自体脂肪移植技术治疗先天性乳房发育不良受术者满意度好,效果理想有效,是一种值得推广的手术方法。

脂肪来源干细胞在改善老化皮肤质地中的作用及其临床应用

脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一类存在脂肪组织中,具有多向分化潜能的干细胞。由于其获取简便,不易造成供区畸形,且与胚胎干细胞相比更加安全等原因,现已在各个领域得到广泛应用。迄今ADSCs在抗皮肤老化方面的作用已被多个体外实验及动物实验证实。而如何将ADSCs的组织更新能力应用于临床,完成干细胞的转化一直是近年来研究的热点。本文对ADSCs改善老化皮肤质地的实验研究和临床应用进展进行综述。

人源脂肪干细胞胶注射治疗贴骨瘢痕的临床疗效分析

目的探讨含人源脂肪干细胞的血管基质组分胶(stromal vascular fraction-gel, SVF-gel)对贴骨瘢痕治疗的临床效果。方法回顾性分析本科室2018年6月至2020年6月收治的符合入选标准采用SVF-gel注射治疗的贴骨瘢痕患者的临床资料。SVF-gel由患者腹部或大腿皮下抽吸的脂肪经机械乳化处理获得,于患者贴骨瘢痕区域注射(穿刺隧道内间隔2 mm注入0.02 mL SVF-gel),留取少量等体积颗粒脂肪与SVF-gel进行体外消化培养及鉴定。术前及术后6个月检测患者瘢痕硬度与厚度;采用患者和观察者瘢痕评价量表(patient and observer scar assessment scale, POSAS)评估瘢痕情况,并统计患者满意度情况。结果共入选8例患者,累计10处贴骨瘢痕;凹陷区域面积:(5.56±4.50)cm2;贴骨瘢痕下SVF-gel注射量(3.90±3.00)mL。SVF-gel与颗粒脂肪经消化后培养均可见短梭形细胞生长,经细胞表型鉴定,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)特异性标志物CD73、CD90、CD105表达率均大于95%;同时间同体积的SVF-gel经消化后培养的原代细胞数明显多于颗粒脂肪;且细胞经体外诱导培养可见脂肪样细胞生长,油红O染色阳性。比较术前与术后6个月瘢痕情况,瘢痕硬度由(48.13±20.59)邵氏单位减小为(30.96±15.66)邵氏单位,差异有统计学意义(P<0.05);瘢痕皮肤厚度由(2.00±0.60)mm增加为(2.72±0.63)mm,差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月,患者瘢痕皮肤外观及活动度显著改善,均无并发症发生;患者评估量表(patient scar assessment scale, PSAS)和观察者评估量表(observer scar assessment scale, OSAS)评分分别为(12.0±2.8)分和(13.7±3.9)分,患者满意度评分为4~5分,平均4.6分。结论颗粒脂肪经机械处理后形成的SVF-gel内含更多活性脂肪干细胞;贴骨瘢痕经SVF-gel注射治疗后局部凹陷减轻,患者满意度较好。

自体脂肪基质细胞组织-脱细胞骨基质-壳聚糖支架对兔胫骨骨缺损修复作用

目的:探究自体脂肪基质细胞组织(SVF)联合脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复兔胫骨缺损的效果。方法:取新西兰兔背部皮下脂肪制备获取SVF细胞、取股骨干制备获取脱细胞骨基质,将SVF细胞种植于脱细胞骨基质-壳聚糖支架上,于种植当日及种植第7天时,扫描电镜观察支架上SVF细胞生长情况,计算种植当日及种植第3天时的SVF细胞存活率;将20只兔胫骨缺损动物模型均分为研究组和对照组,研究组用SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复,对照组用脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复;于术后6及12周时检测2组胫骨缺损部位的骨密度,并进行X线拍照,于术后12周时检测2组骨缺损部位最大弯曲度负荷、抗弯钢度及破坏扰度的力学特征,检测缺损骨骨膜中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和表皮生长因子(EGF)水平。结果:电镜结果显示,SVF细胞种植第7天,支架上黏附大量的SVF细胞,并且SVF细胞在支架表面上生长、增殖;SVF种植当日的SVF细胞存活率为100.0%,种植第3天SVF细胞的存活率为(98.54±1.83)%,2者比较差异无统计学意义(P>0.05);术后第6及12周时,研究组新西兰兔骨缺损处的支架材料和周围骨组织之间的界限模糊,周围骨组织有骨茄形成;2组新西兰兔术后第12周时骨缺损部位骨密度均高于同组术后第6周,研究组术后同时点的骨缺损部位骨密度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后第12周时,研究组新西兰兔最大弯曲度负荷和抗弯钢度大于对照组,破坏扰度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后第12周时,研究组新西兰兔骨缺损部位骨膜中的VEGF和EGF蛋白水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架可促进兔胫骨骨缺损修复,可能机制与SVF促进骨膜内的血管新生有关。

多种辅助材料结合自体脂肪移植在瘢痕防治中的优势探讨

自体脂肪组织作为一种理想的软组织填充材料,具有来源丰富、取材容易、操作简单、充盈外形好、无免疫排斥反应等优点,目前已被广泛用于乳房重建、臀部畸形矫正、面部整形、促进创面愈合、毛发再生以及皮肤年轻化等领域,而在瘢痕治疗方面的应用也只是在最近几年才逐渐开展起来。该文针对目前已知的多种辅助材料,如:脂肪干细胞、基质血管成分、纳米脂肪及脂肪来源干细胞基质胶、血小板浓缩物结合自体脂肪移植,探讨其在瘢痕防治方面的优势。

诱导小鼠白色脂肪来源的SVF分化为米色脂肪细胞的方法初探

目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8、10天收取细胞样品进行Western blot和RT-qPCR实验,油红O染色观察不同时间点培养皿中的脂质生成情况,并对针对脂滴大小定量。结果:实验分离的SVF细胞随着接种时间的延长逐渐呈长梭形,在+接种120 h后有呈螺旋式生长的趋势。Western blot和RT-qPCR结果显示两种诱导方法皆使过氧化物酶体增殖物受体γ(Peroxisomeproliferator activated receptor γ,PPARγ)和CCAAT-增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins α,C/EBPα)基因表达升高(P<0.05),油红O染色结果显示,在两种方法的诱导下,脂质生成水平无差异,但与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法的脂肪细胞脂滴面积明显减少(P<0.05),并且小体积脂滴所占百分比较高。Western blot和RT-qPCR结果显示,与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法使解偶联蛋白1(Uncoupling protein 1,UCP1)和含PR结构域蛋白16(PRD1-BF1-RIZ1 homologous domain containing 16,PRDM16)基因表达升高(P<0.05)。结论:与鸡尾酒法相比,该方法能够成功诱导SVF细胞向米色脂肪细胞分化,脂滴具备米色脂肪特征,并表达米色脂肪标记基因。

机械剪切力对人脂肪组织细胞表型及特性的影响

目的分析脂肪胶制备过程中所受的剪切力对最终脂肪成活率的影响。方法自2018年7月至2019年1月,广东省妇幼保健院医学美容科获取吸脂手术患者的脂肪,将其制备成标准的Coleman fat作为对照组,再将Coleman fat进一步利用机械剪切分离,制备成的基质血管片段(stromal vascular fraction,SVF)/细胞外基质(extracellular matrix,ECM)凝胶状(gel)脂肪(SVF/ECM gel)作为实验组。对这两种脂肪成活率、细胞组分及表型进行对比研究。结果裸鼠背部移植后3、14、28、60 d,SVF/ECM gel的成活率显著高于Coleman fat。脂肪的粘度与剪切力成正比。虽然剪切力不影响细胞总数,但它显著减少了活细胞的数量。流式细胞术显示,SVF/ECM gel中间充质干细胞、细胞外膜上脂肪基质细胞和脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)数量较多,但内皮祖细胞数量较Coleman fat减少。结论机械剪切力分离脂肪可以增加脂肪细胞的多能性,从而在细胞疗法中改善脂肪移植物成活率。

体质量指数对脂肪组织血管基质组分细胞亚群的影响

目的 探究体质量指数(body mass index, BMI)对于脂肪组织基质血管组分(stromal vascular fraction,SVF)细胞亚群相对百分比的影响。方法 自2022年2月至2023年6月,本研究纳入61例上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科接受脂肪抽吸术患者的腹部皮下脂肪样本,按照BMI分为正常体质量组(BMI<25 kg/m^(2))和超重及肥胖组(BMI≥25 kg/m^(2));采用胶原酶消化法提取SVF;将获得的SVF进行流式细胞术检测;统计SVF内细胞亚群相对百分比。结果 流式细胞术检测结果显示,相对于正常体质量组,超重及肥胖组脂肪组织SVF内脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)、脂肪前体细胞、CD34^(+)细胞、内皮细胞、M2型巨噬细胞亚群相对百分比显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);而两组间内皮祖细胞、造血干细胞、单核细胞、周细胞亚群相对百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05);与正常体质量组相比,超重及肥胖组M1型巨噬细胞/M2型巨噬细胞比值显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 脂肪组织SVF细胞亚群在不同BMI分组有着显著变化,超重及肥胖脂肪组织SVF的增殖、脂肪生成、血管生成和再生能力受损,炎症增加,可能进一步导致脂肪组织功能障碍,从而影响SVF临床应用的疗效。

脂肪源基质血管组分细胞及其临床应用进展

脂肪源基质血管组分(SVF)细胞是一种具有干细胞特性的异质性细胞群,SVF含有的多种细胞类型使其具有强大的免疫调节、血管新生和组织重建等再生潜能。目前将其应用于多种疾病的临床治疗,均显示出良好的安全性和治愈效果。综述目前提取脂肪源SVF的不同方法及其所含细胞群的具体表型,同时也总结了SVF在脂肪移植、糖尿病、克罗恩病和骨关节炎等多种疾病中的临床应用进展。