激活和抑制Stat3信号途径对胰腺癌细胞侵袭能力的影响

目的:通过激活和阻断人胰腺癌细胞中的Stat3信号转导通路,观察细胞株侵袭能力的变化并探讨其作用机制。方法:采用IL-6处理人胰腺癌细胞Capan-2,AG490处理人胰腺癌细胞SW1990后,MTT法检测细胞的增殖状态,免疫细胞化学法和Western印迹法检测p-Stat3的表达,实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western印迹法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)mRNA及其蛋白的表达,体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力。结果:IL-6可促进Capan-2细胞的增殖能力提高(P<0.05),p-Stat3的表达增强,VEGF和MMP-2mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞侵袭能力增强。AG490可抑制SW1990细胞株的增殖(P<0.05),p-Stat3的表达下降,VEGF和MMP-2 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05),侵袭能力减弱。结论:Stat3信号转导通路在胰腺癌侵袭过程中起着重要作用,以Stat3信号转导通路为靶点的基因治疗可能为胰腺癌治疗提供新的方向。

阻断STAT3信号转导通路对人胰腺癌细胞生长的影响

目的:探讨Janus激酶(Janus kinase,JAK)特异性抑制剂AG490阻断STAT3信号转导通路对高表达STAT3的人胰腺癌细胞系SW1990生长增殖的作用及其机制。方法:使用AG490处理人胰腺癌细胞系SW1990,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测STAT3信号转导通路成员的表达。结果:AG490作用于人胰腺癌细胞系SW1990后,细胞增殖水平明显下降(P<0.05);细胞凋亡百分比显著升高(P<0.05);Western blot显示SW1990细胞中磷酸化STAT3(p-STAT3)、bcl-xL和cyclin D1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:STAT3信号转导通路在胰腺癌进展过程中起着重要作用;阻断STAT3信号转导通路可抑制人胰腺癌细胞增殖,促进其凋亡;以STAT3信号转导通路为靶点的治疗策略可能为胰腺癌治疗提供新的思路。

雷公藤甲素对裸鼠胰腺癌皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的:观察雷公藤甲素对人胰腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用,探讨其作用的分子机制。方法:选择健康BALB/c裸鼠于右后肢皮肤移植人胰腺癌SW1990细胞,建立裸鼠荷瘤模型,将建模成功的裸鼠分为模型组、吉西他滨组和雷公藤甲素组,每组10只,另选10只健康裸鼠作为对照组。测量各组SW1990胰腺癌荷瘤裸鼠体质量,取肿瘤组织称质量,计算肿瘤抑制率;采用免疫组织化学法检测各组裸鼠胰腺组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况;采用Western blotting法检测各组裸鼠胰腺组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-9和Caspase-3表达水平。结果:与吉西他滨组比较,雷公藤甲素组SW1990胰腺癌的肿瘤抑制率明显升高(P<0.05)。HE染色观察,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺癌肿瘤细胞增殖受到抑制。免疫组织化学检测,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺组织中Bcl-2表达水平和Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺组织中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:雷公藤甲素能抑制裸鼠肿瘤组织的生长,其机制可能与抑制胰腺肿瘤组织中Bcl-2的激活、促进Bax的表达、降低Bcl-2/Bax的比值、促使Caspase-9和Caspase-3激活及诱导胰腺癌移植瘤细胞凋亡有关。

华蟾素注射液诱导人胰腺癌细胞阻滞于G2/M期抑制细胞增殖的实验研究

目的通过观察华蟾素注射液（Cmobutacini）对人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3细胞周期的影响以探讨其抑制肿瘤细胞增殖的作用机理。方法采用CCK-8法检测法在不同的时间点（12h、24h、48h、72h和96h）检测华蟾素注射液对人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果华蟾素注射液对人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3具有抑制细胞增殖的作用，并具有时间及剂量依赖性。其中对SW1990的半数抑制率浓度（IC50）为（8．92±1．98）mg／mL，对BxPC3的半数抑制率浓度（IC50）为（5．00±0．66）mg／mL。流式细胞术检测发现，华蟾素注射液可使人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3阻滞于的G2／M期。结论华蟾素注射液能通过诱导人胰腺癌细胞SW1990、BxPC3阻滞于G2／M期以抑制细胞增殖，为临床应用华蟾素注射液治疗胰腺癌提供实验依据。

长链非编码RNA母源性印记基因3对人胰腺癌SW1990细胞生物学行为及p53蛋白水平的影响

我们选取母源性印记基因3（MEG3）表达缺失的人胰腺癌SW1990细胞株,向其导入并表达外源性MEG3基因片段,观察胰腺癌细胞的增殖、凋亡和p53蛋白水平的变化.